摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
主要符号对照表 | 第10-13页 |
第1章 引言 | 第13-37页 |
1.1 适体 | 第13-20页 |
1.1.1 适体概述 | 第13页 |
1.1.2 适体的优越性质 | 第13-14页 |
1.1.3 适体的筛选 | 第14-15页 |
1.1.4 适体在生物医学领域的应用 | 第15-20页 |
1.2 肿瘤细胞靶向适体AS1411 | 第20-25页 |
1.2.1 富含G的寡核酸链研究 | 第20-21页 |
1.2.2 适体AS1411的研究历程 | 第21-23页 |
1.2.3 适体AS1411的药理学作用 | 第23-25页 |
1.3 细胞自噬 | 第25-34页 |
1.3.1 自噬概述 | 第25-27页 |
1.3.2 自噬相关基因及其蛋白 | 第27-30页 |
1.3.3 细胞自噬的调控 | 第30-33页 |
1.3.4 自噬与肿瘤 | 第33-34页 |
1.4 课题来源、意义及主要研究内容 | 第34-37页 |
1.4.1 课题来源及意义 | 第34-35页 |
1.4.2 课题主要研究内容及方法 | 第35-37页 |
第2章 AS1411对A549细胞生物学功能的影响 | 第37-47页 |
2.1 实验材料 | 第37-39页 |
2.1.1 实验试剂及材料 | 第37-38页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第38页 |
2.1.3 常用试剂的配置 | 第38-39页 |
2.2 实验方法 | 第39-41页 |
2.2.1 A549细胞体外培养 | 第39页 |
2.2.2 AS1411进入A549细胞的经时实验 | 第39页 |
2.2.3 细胞双重免疫荧光染色 | 第39-40页 |
2.2.4 观测AS1411对A549细胞的形态学影响 | 第40页 |
2.2.5 检测AS1411对A549细胞的活性影响 | 第40-41页 |
2.2.6 统计 | 第41页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第41-45页 |
2.3.1 AS1411进入A549细胞的特异性验证 | 第41-42页 |
2.3.2 AS1411进入A549细胞的动态观测 | 第42页 |
2.3.3 适体AS1411受体核仁素的验证 | 第42-43页 |
2.3.4 观测AS1411对A549细胞的形态学影响 | 第43-44页 |
2.3.5 AS1411对A549细胞活性影响的检测 | 第44-45页 |
2.4 本章小结 | 第45-47页 |
第3章 AS1411诱导A549细胞发生自噬 | 第47-59页 |
3.1 实验材料 | 第47-50页 |
3.1.1 实验试剂及材料 | 第47-48页 |
3.1.2 主要实验仪器 | 第48-49页 |
3.1.3 常用试剂的配置 | 第49-50页 |
3.2 实验方法 | 第50-53页 |
3.2.1 Western Blotting | 第50-52页 |
3.2.2 EGFP-LC3质粒提取 | 第52页 |
3.2.3 自噬小体荧光斑点检测 | 第52-53页 |
3.2.4 统计 | 第53页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第53-57页 |
3.3.1 AS1411诱导自噬相关蛋白LC3转型 | 第53-54页 |
3.3.2 AS1411可诱导A549自噬流发生 | 第54-56页 |
3.3.3 AS1411诱导A549胞内自噬亮斑生成 | 第56-57页 |
3.4 本章小结 | 第57-59页 |
第4章 AS1411诱导A549细胞自噬的分子机制 | 第59-67页 |
4.1 实验材料与仪器 | 第59-61页 |
4.1.1 实验试剂及材料 | 第59-60页 |
4.1.2 主要实验仪器 | 第60-61页 |
4.1.3 常用试剂的配置 | 第61页 |
4.2 实验方法 | 第61-62页 |
4.2.1 Western Blotting | 第61-62页 |
4.2.2 统计 | 第62页 |
4.3 实验结果与讨论 | 第62-65页 |
4.3.1 AS1411诱导A549细胞自噬的分子机制 | 第62-63页 |
4.3.2 AS1411诱导Akt磷酸化增多的分子机制 | 第63-65页 |
4.4 本章小结 | 第65-67页 |
第5章 AS1411诱导的A549细胞自噬性质研究 | 第67-77页 |
5.1 实验材料与仪器 | 第67-69页 |
5.1.1 实验试剂及材料 | 第67-68页 |
5.1.2 主要实验仪器 | 第68-69页 |
5.1.3 常用试剂的配置 | 第69页 |
5.2 实验方法 | 第69-71页 |
5.2.1 Western Blotting | 第69-70页 |
5.2.2 检测AS1411与LY294002联合用药对A549细胞活性的影响 | 第70页 |
5.2.3 流式细胞术检测AS1411对A549细胞周期的影响 | 第70-71页 |
5.2.4 统计 | 第71页 |
5.3 实验结果与讨论 | 第71-74页 |
5.3.1 AS1411诱导的A549细胞自噬性质研究 | 第71-73页 |
5.3.2 AS1411对A549细胞周期的影响 | 第73-74页 |
5.4 本章小结 | 第74-77页 |
总结与展望 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-89页 |
致谢 | 第89-91页 |
附录A 阴性药物CRO对A549细胞形态学影响 | 第91-93页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文和研究成果 | 第93页 |