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桃组织培养及遗传转化的研究

致谢第8-9页
缩略语表第9-11页
中文摘要第11-13页
第一章 文献综述第13-37页
    引言第13页
    1 核果类果树组织培养第13-20页
        1.1 桃第13-17页
            1.1.1 茎尖培养第14-15页
            1.1.2 胚培养第15-16页
            1.1.3 其它类型的外植体培养第16-17页
        1.2 樱桃第17-18页
            1.2.1 茎尖和茎段培养第17页
            1.2.2 胚培养第17-18页
            1.2.3 叶片培养第18页
            1.2.4 其它类型的外植体培养第18页
        1.3 杏第18-20页
            1.3.1 茎尖培养第18-19页
            1.3.2 胚培养第19-20页
            1.3.3 其它类型的外植体培养第20页
    2 核果类果树原生质体培养第20-27页
        2.1 分离原生质体的材料第21-23页
        2.2 原生质体分离第23-24页
        2.3 原生质体培养第24-25页
        2.4 原生质体培养再生植株第25-26页
        2.5 小结第26-27页
    3 核果类果树遗传转化第27-30页
        3.1 樱桃第27-28页
        3.2 桃第28-29页
        3.3 其它核果类果树第29页
        3.4 小结第29-30页
    4 反义RNA及其在控制果实成熟中的应用第30-36页
        4.1 反义RNA技术抑制乙烯合成途径中关键酶第31-33页
            4.1.1 乙烯合成途径及其关键酶第31-32页
            4.1.2 反义技术控制乙烯合成关键酶第32-33页
        4.2 反义RNA技术抑制多聚半乳糖醛酸酶或果胶(甲)脂酶的表达第33-34页
        4.3 反义RNA技术调控果实成熟中色素基因表达第34-35页
        4.4 反义RNA技术在调控果实成熟其它代谢途径的应用第35页
        4.5 小结第35-36页
    5 立题背景及主要研究内容第36-37页
第二章 桃幼胚愈伤组织诱导及愈伤组织分化第37-46页
    1 材料与方法第37-39页
        1.1 试验材料第37-38页
        1.2 试验方法第38-39页
            1.2.1 桃幼胚的预处理及培养条件第38-39页
            1.2.2 愈伤组织培养基的配制及组合第39页
            1.2.3 愈伤组织分化培养基及生根培养基第39页
            1.2.4 统计分析第39页
    2 结果分析第39-43页
        2.1 愈伤组织的诱导第39-43页
            2.1.1 培养基类型第39-41页
            2.1.2 激素类型第41-43页
        2.2 愈伤组织再分化第43页
        2.3 再生芽生根第43页
    3 讨论第43-45页
    附图版第45-46页
第三章 桃幼胚子叶离体再生第46-55页
    1 材料与方法第46-47页
        1.1 试验材料第46页
        1.2 培养基及培养条件第46-47页
    2 结果分析第47-51页
        2.1 不定梢(芽)的发生第47-51页
            2.1.1 不定芽发生部位第47页
            2.1.2 激素配比对幼胚子叶不定梢(芽)发生的影响第47-49页
            2.1.3 品种对幼胚子叶不定梢(芽)发生的影响第49页
            2.1.4 幼胚发育天数对幼胚子叶不定芽发生的影响第49页
            2.1.5 幼胚子叶损伤方式对不定芽发生的影响第49-51页
        2.2 不定梢(芽)生根第51页
    3 讨论第51-52页
    附图版第52-55页
第四章 根癌农杆菌介导的桃幼胚转化第55-61页
    1 材料和方法第55-57页
        1.1 材料第55-56页
            1.1.1 植物材料第55页
            1.1.2 质粒及菌株第55-56页
        1.2 方法第56-57页
            1.2.1 质粒的提取第56页
            1.2.2 质粒冻融法转入根癌农杆菌第56页
            1.2.3 幼胚的剥取第56-57页
            1.2.4 幼胚的预培养第57页
            1.2.5 农杆菌的培养、活化第57页
            1.2.6 根癌农杆菌对外植体的浸染与共培养第57页
            1.2.7 影响根癌农杆菌转化效果的因素第57页
            1.2.8 GUS基因瞬间表达的组织化学分析第57页
    2 结果分析第57-60页
        2.1 预培养时间对转化效率的影响第58页
        2.2 感染时间对转化效率的影响第58-59页
        2.3 感染时间对转化效率的影响第59页
        2.4 AS添加方式对转化效率的影响第59-60页
        2.5 外植体中GUS基因的瞬间表达第60页
    3 讨论第60-61页
第五章 基因枪介导桃ACO反义基因转化桃幼胚子叶的研究第61-66页
    1 材料方法第62-64页
        1.1 材料第62页
            1.1.1 植物材料第62页
            1.1.2 质粒载体及菌株第62页
            1.1.3 仪器、附件及耗材第62页
        1.2 方法第62-64页
            1.2.1 轰击材料准备第62页
            1.2.2 质粒的制备第62页
            1.2.3 金粉悬浮液的制备第62-63页
            1.2.4 微弹制备第63页
            1.2.5 基因枪的装备第63页
            1.2.6 基因枪的轰击第63-64页
    2 结果分析第64页
        2.1 基因枪介导的桃抗性芽苗的获得第64页
    3 讨论第64-66页
第六章 根癌农杆菌介导桃ACO反义基因转化桃幼胚子叶的研究第66-70页
    1 材料方法第66-68页
        1.1 材料第66页
            1.1.1 植物材料第66页
        1.2 方法第66-68页
            1.2.1 植物材料的准备第66页
            1.2.2 农杆菌菌株及质粒第66-67页
            1.2.3 农杆菌对幼胚子叶的感染第67-68页
            1.2.4 抗性不定芽的诱导第68页
            1.2.5 微芽嫁接第68页
    2 结果与讨论第68-70页
第七章 ACO基因反义转化桃转基因植株的分子检测第70-79页
    1 材料方法第70-72页
        1.1 材料第70页
            1.1.1 植物材料第70页
        1.2 方法第70-72页
            1.2.1 基因组DNA的提取第70页
            1.2.2 PCR检测第70-71页
            1.2.3 转基因植株的Southern blot检测第71-72页
                1.2.3.1 植物总DNA的限制性酶切、电泳及转膜第71页
                1.2.3.2 探针制备及标记第71-72页
                1.2.3.3 Southern blot分析第72页
            1.2.4 GUS组织化学染色分析第72页
    2 结果分析第72-75页
        2.1 转基因桃的PCR特异扩增检测第72-74页
        2.2 转基因桃的Southern blot分析第74-75页
        2.3 GUS组织化学染色结果第75页
    3 讨论第75-77页
    附第四-七章图版第77-79页
参考文献第79-91页
英文摘要第91页
攻博期间发表论文第93页

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