致谢 | 第8-9页 |
缩略语表 | 第9-11页 |
中文摘要 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-37页 |
引言 | 第13页 |
1 核果类果树组织培养 | 第13-20页 |
1.1 桃 | 第13-17页 |
1.1.1 茎尖培养 | 第14-15页 |
1.1.2 胚培养 | 第15-16页 |
1.1.3 其它类型的外植体培养 | 第16-17页 |
1.2 樱桃 | 第17-18页 |
1.2.1 茎尖和茎段培养 | 第17页 |
1.2.2 胚培养 | 第17-18页 |
1.2.3 叶片培养 | 第18页 |
1.2.4 其它类型的外植体培养 | 第18页 |
1.3 杏 | 第18-20页 |
1.3.1 茎尖培养 | 第18-19页 |
1.3.2 胚培养 | 第19-20页 |
1.3.3 其它类型的外植体培养 | 第20页 |
2 核果类果树原生质体培养 | 第20-27页 |
2.1 分离原生质体的材料 | 第21-23页 |
2.2 原生质体分离 | 第23-24页 |
2.3 原生质体培养 | 第24-25页 |
2.4 原生质体培养再生植株 | 第25-26页 |
2.5 小结 | 第26-27页 |
3 核果类果树遗传转化 | 第27-30页 |
3.1 樱桃 | 第27-28页 |
3.2 桃 | 第28-29页 |
3.3 其它核果类果树 | 第29页 |
3.4 小结 | 第29-30页 |
4 反义RNA及其在控制果实成熟中的应用 | 第30-36页 |
4.1 反义RNA技术抑制乙烯合成途径中关键酶 | 第31-33页 |
4.1.1 乙烯合成途径及其关键酶 | 第31-32页 |
4.1.2 反义技术控制乙烯合成关键酶 | 第32-33页 |
4.2 反义RNA技术抑制多聚半乳糖醛酸酶或果胶(甲)脂酶的表达 | 第33-34页 |
4.3 反义RNA技术调控果实成熟中色素基因表达 | 第34-35页 |
4.4 反义RNA技术在调控果实成熟其它代谢途径的应用 | 第35页 |
4.5 小结 | 第35-36页 |
5 立题背景及主要研究内容 | 第36-37页 |
第二章 桃幼胚愈伤组织诱导及愈伤组织分化 | 第37-46页 |
1 材料与方法 | 第37-39页 |
1.1 试验材料 | 第37-38页 |
1.2 试验方法 | 第38-39页 |
1.2.1 桃幼胚的预处理及培养条件 | 第38-39页 |
1.2.2 愈伤组织培养基的配制及组合 | 第39页 |
1.2.3 愈伤组织分化培养基及生根培养基 | 第39页 |
1.2.4 统计分析 | 第39页 |
2 结果分析 | 第39-43页 |
2.1 愈伤组织的诱导 | 第39-43页 |
2.1.1 培养基类型 | 第39-41页 |
2.1.2 激素类型 | 第41-43页 |
2.2 愈伤组织再分化 | 第43页 |
2.3 再生芽生根 | 第43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
附图版 | 第45-46页 |
第三章 桃幼胚子叶离体再生 | 第46-55页 |
1 材料与方法 | 第46-47页 |
1.1 试验材料 | 第46页 |
1.2 培养基及培养条件 | 第46-47页 |
2 结果分析 | 第47-51页 |
2.1 不定梢(芽)的发生 | 第47-51页 |
2.1.1 不定芽发生部位 | 第47页 |
2.1.2 激素配比对幼胚子叶不定梢(芽)发生的影响 | 第47-49页 |
2.1.3 品种对幼胚子叶不定梢(芽)发生的影响 | 第49页 |
2.1.4 幼胚发育天数对幼胚子叶不定芽发生的影响 | 第49页 |
2.1.5 幼胚子叶损伤方式对不定芽发生的影响 | 第49-51页 |
2.2 不定梢(芽)生根 | 第51页 |
3 讨论 | 第51-52页 |
附图版 | 第52-55页 |
第四章 根癌农杆菌介导的桃幼胚转化 | 第55-61页 |
1 材料和方法 | 第55-57页 |
1.1 材料 | 第55-56页 |
1.1.1 植物材料 | 第55页 |
1.1.2 质粒及菌株 | 第55-56页 |
1.2 方法 | 第56-57页 |
1.2.1 质粒的提取 | 第56页 |
1.2.2 质粒冻融法转入根癌农杆菌 | 第56页 |
1.2.3 幼胚的剥取 | 第56-57页 |
1.2.4 幼胚的预培养 | 第57页 |
1.2.5 农杆菌的培养、活化 | 第57页 |
1.2.6 根癌农杆菌对外植体的浸染与共培养 | 第57页 |
1.2.7 影响根癌农杆菌转化效果的因素 | 第57页 |
1.2.8 GUS基因瞬间表达的组织化学分析 | 第57页 |
2 结果分析 | 第57-60页 |
2.1 预培养时间对转化效率的影响 | 第58页 |
2.2 感染时间对转化效率的影响 | 第58-59页 |
2.3 感染时间对转化效率的影响 | 第59页 |
2.4 AS添加方式对转化效率的影响 | 第59-60页 |
2.5 外植体中GUS基因的瞬间表达 | 第60页 |
3 讨论 | 第60-61页 |
第五章 基因枪介导桃ACO反义基因转化桃幼胚子叶的研究 | 第61-66页 |
1 材料方法 | 第62-64页 |
1.1 材料 | 第62页 |
1.1.1 植物材料 | 第62页 |
1.1.2 质粒载体及菌株 | 第62页 |
1.1.3 仪器、附件及耗材 | 第62页 |
1.2 方法 | 第62-64页 |
1.2.1 轰击材料准备 | 第62页 |
1.2.2 质粒的制备 | 第62页 |
1.2.3 金粉悬浮液的制备 | 第62-63页 |
1.2.4 微弹制备 | 第63页 |
1.2.5 基因枪的装备 | 第63页 |
1.2.6 基因枪的轰击 | 第63-64页 |
2 结果分析 | 第64页 |
2.1 基因枪介导的桃抗性芽苗的获得 | 第64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
第六章 根癌农杆菌介导桃ACO反义基因转化桃幼胚子叶的研究 | 第66-70页 |
1 材料方法 | 第66-68页 |
1.1 材料 | 第66页 |
1.1.1 植物材料 | 第66页 |
1.2 方法 | 第66-68页 |
1.2.1 植物材料的准备 | 第66页 |
1.2.2 农杆菌菌株及质粒 | 第66-67页 |
1.2.3 农杆菌对幼胚子叶的感染 | 第67-68页 |
1.2.4 抗性不定芽的诱导 | 第68页 |
1.2.5 微芽嫁接 | 第68页 |
2 结果与讨论 | 第68-70页 |
第七章 ACO基因反义转化桃转基因植株的分子检测 | 第70-79页 |
1 材料方法 | 第70-72页 |
1.1 材料 | 第70页 |
1.1.1 植物材料 | 第70页 |
1.2 方法 | 第70-72页 |
1.2.1 基因组DNA的提取 | 第70页 |
1.2.2 PCR检测 | 第70-71页 |
1.2.3 转基因植株的Southern blot检测 | 第71-72页 |
1.2.3.1 植物总DNA的限制性酶切、电泳及转膜 | 第71页 |
1.2.3.2 探针制备及标记 | 第71-72页 |
1.2.3.3 Southern blot分析 | 第72页 |
1.2.4 GUS组织化学染色分析 | 第72页 |
2 结果分析 | 第72-75页 |
2.1 转基因桃的PCR特异扩增检测 | 第72-74页 |
2.2 转基因桃的Southern blot分析 | 第74-75页 |
2.3 GUS组织化学染色结果 | 第75页 |
3 讨论 | 第75-77页 |
附第四-七章图版 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-91页 |
英文摘要 | 第91页 |
攻博期间发表论文 | 第93页 |