| 英汉缩略语名词对照（Abbreviations） | 第9-11页 |
| 中文摘要 | 第11-17页 |
| 英文摘要 | 第17-21页 |
| 论文正文一： ZEB1通过诱导ER-α 启动子甲基化调控乳腺癌抗雌激素治疗耐药的研究 | 第22-104页 |
| 前言 | 第22-25页 |
| 第一章 实验材料与方法 | 第25-61页 |
| 第一节 实验材料 | 第25-33页 |
| 1 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2 实验所用细胞系 | 第26-27页 |
| 3 实验所用菌株 | 第27页 |
| 4 实验所用质粒载体 | 第27页 |
| 5 实验所用抗体 | 第27-28页 |
| 6 实验所用试剂盒 | 第28-29页 |
| 7 实验所用试剂及耗材 | 第29-31页 |
| 8 实验用动物 | 第31页 |
| 9 实验服务 | 第31页 |
| 10 实验溶液配置 | 第31-33页 |
| 第二节 实验方法与步骤 | 第33-61页 |
| 1 细胞培养 | 第33-34页 |
| 2 细胞计数 | 第34页 |
| 3 CCK8细胞活力实验 | 第34-35页 |
| 4 EdU细胞增殖实验 | 第35-36页 |
| 5 细胞克隆形成实验 | 第36页 |
| 6 细胞划痕实验检测细胞迁移能力 | 第36-37页 |
| 7 Transwell实验检测细胞侵袭能力 | 第37页 |
| 8 细胞总RNA的提取 | 第37-38页 |
| 9 组织及细胞基因组提取 | 第38页 |
| 10 PCR引物设计 | 第38-40页 |
| 11 RNA反转录成cDNA | 第40页 |
| 12 Real-time PCR检测 | 第40页 |
| 13 RT-PCR（检测） | 第40-41页 |
| 14 RT-PCR（克隆） | 第41页 |
| 15电泳检测DNA条带 | 第41-42页 |
| 16 DNA片段切胶回收 | 第42页 |
| 17 DNA片段酶切 | 第42页 |
| 18 连接质粒载体 | 第42-43页 |
| 19 重组质粒转化感受态大肠杆菌 | 第43页 |
| 20 质粒DNA提取 | 第43-44页 |
| 21 重组质粒酶切鉴定 | 第44页 |
| 22 ER-α 启动子定点突变 | 第44-45页 |
| 23 shRNA设计合成 | 第45-46页 |
| 24 sh-pLV-RNAi vector构建 | 第46-47页 |
| 25 基因组DNA亚硫酸盐修饰 | 第47-48页 |
| 26 甲基化检测引物设计 | 第48-49页 |
| 27 甲基化特异性PCR | 第49页 |
| 28 亚硫酸盐修饰测序PCR | 第49-50页 |
| 29 HEK 293T细胞培养 | 第50-51页 |
| 30 质粒病毒包装 | 第51页 |
| 31 病毒感染 | 第51页 |
| 32 稳定细胞系筛选 | 第51-52页 |
| 33 Luciferase荧光素酶实验检测启动子活性 | 第52页 |
| 34 Western Blot免疫印迹 | 第52-55页 |
| 35 免疫沉淀IP | 第55页 |
| 36 染色质免疫共沉淀ChIP | 第55-56页 |
| 37 乳腺癌细胞小鼠移植瘤模型建立 | 第56-57页 |
| 38 移植瘤检测及小鼠组织标本处理 | 第57页 |
| 39 组织脱水和石蜡包埋切片 | 第57-58页 |
| 40 HE染色 | 第58-59页 |
| 41 免疫组化 | 第59-61页 |
| 第二章 实验结果 | 第61-93页 |
| 第一节 ZEB1过表达诱导乳腺癌细胞雌激素受体ER-α 启动子高甲基化并沉默其表达 | 第61-70页 |
| 1 乳腺癌细胞雌激素受体ER-α 启动子差异性甲基化调控区DMR预测分析 | 第61-63页 |
| 2 ER-α 上游转录调控因子预测分析 | 第63页 |
| 3 乳腺癌细胞系中ZEB1和ER-α 表达情况检测 | 第63-65页 |
| 4 ZEB1过表达和沉默对乳腺癌细胞ER-α 启动子甲基化的影响 | 第65-70页 |
| 第二节 ZEB1调控ER-α 启动子甲基化抑制其转录的机制 | 第70-77页 |
| 1 ZEB1抑制ER-α 启动子转录活性 | 第70-74页 |
| 2 ZEB1通过招募DNMT3B和HDAC1到ER-α 启动子抑制其转录 | 第74-77页 |
| 第三节 ZEB1与乳腺癌患者ER-α 表达及其启动子甲基化程度的关系 | 第77-82页 |
| 1 ZEB1在乳腺癌中的表达 | 第77-80页 |
| 2 乳腺癌中ZEB1表达与ER-α 启动子呈负相关 | 第80-82页 |
| 第四节 过表达ZEB1介导了乳腺癌细胞抗雌激素耐药 | 第82-90页 |
| 第五节 小鼠移植瘤模型验证ZEB1诱导抗雌激素耐药 | 第90-93页 |
| 讨论 | 第93-95页 |
| 结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-104页 |
| 论文正文二：新型VEGFR2小分子抑制剂YLL545对乳腺癌新生血管的抑制作用及其抗癌机理研究 | 第104-152页 |
| 前言 | 第104-108页 |
| 第一章 实验材料与方法 | 第108-121页 |
| 第一节 实验材料 | 第108-111页 |
| 1 主要仪器 | 第108页 |
| 2 实验所用细胞 | 第108页 |
| 3 实验所用菌株 | 第108页 |
| 4 实验所用质粒载体 | 第108-109页 |
| 5 实验所用抗体 | 第109页 |
| 6 实验所用试剂盒 | 第109页 |
| 7 实验所用试剂及耗材 | 第109-110页 |
| 8 实验用动物 | 第110页 |
| 9 实验溶液配置 | 第110-111页 |
| 第二节 实验方法与步骤 | 第111-121页 |
| 1 斑马鱼胚胎血管发育抑制实验 | 第111-112页 |
| 2 斑马鱼断尾再生实验 | 第112页 |
| 3 斑马鱼药物毒性实验 | 第112页 |
| 4 小鼠Matrigel胶塞血管新生实验 | 第112页 |
| 5 人脐静脉血管内皮细胞HUVEC提取与培养 | 第112-113页 |
| 6 细胞培养 | 第113-114页 |
| 7 细胞计数 | 第114页 |
| 8 CCK8细胞活力实验 | 第114页 |
| 9 EdU细胞增殖实验 | 第114页 |
| 10 细胞划痕实验检测细胞迁移能力 | 第114页 |
| 11 Transwell实验检测细胞侵袭能力 | 第114页 |
| 12 HUVEC成管实验 | 第114-115页 |
| 13 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第115页 |
| 14 Western Blot免疫印迹 | 第115页 |
| 15 细胞热迁移实验（CETSA） | 第115-116页 |
| 16 细胞总RNA的提取 | 第116页 |
| 17 RNA反转录成cDNA | 第116页 |
| 18 电泳检测DNA条带 | 第116页 |
| 19 PCR引物设计 | 第116-117页 |
| 20 Real-time PCR检测 | 第117页 |
| 21 RNA array检测YLL545对HUVECs血管生成相关信号通路分子表达的影响 | 第117-118页 |
| 22 shRNA设计合成 | 第118页 |
| 23 sh-VEGFR2-p LV-RNAi vector构建 | 第118页 |
| 24 重组质粒转化感受态大肠杆菌 | 第118页 |
| 25 质粒DNA提取 | 第118页 |
| 26 重组质粒酶切鉴定 | 第118页 |
| 27 HEK 293T细胞培养 | 第118页 |
| 28 质粒病毒包装 | 第118页 |
| 29 病毒感染 | 第118页 |
| 30 稳定细胞系筛选 | 第118页 |
| 31 乳腺癌细胞小鼠移植瘤模型建立 | 第118页 |
| 32 移植瘤检测及小鼠组织标本处理 | 第118-119页 |
| 33 组织脱水和石蜡包埋切片 | 第119页 |
| 34 HE染色 | 第119页 |
| 35 免疫组化 | 第119页 |
| 36 冰冻切片 | 第119-120页 |
| 37 免疫荧光染色 | 第120-121页 |
| 第二章 实验结果 | 第121-141页 |
| 第一节 小分子抑制剂高通量筛选 | 第121-125页 |
| 1 小分子抑制剂设计合成 | 第121-122页 |
| 2 小分子抑制剂对斑马鱼胚胎血管发育的抑制作用 | 第122-124页 |
| 3 小分子YLL545对斑马鱼尾鳍血管再生的抑制作用 | 第124-125页 |
| 第二节YLL545对血管生成的抑制作用 | 第125-129页 |
| 1 YLL545对HUVEC细胞增殖的影响 | 第125-126页 |
| 2 YLL545对HUVEC细胞迁移和侵袭的影响 | 第126-127页 |
| 3 YLL545对HUVEC细胞成管能力的影响 | 第127-128页 |
| 4 YLL545影响血管生成的体内作用 | 第128-129页 |
| 第三节YLL545抑制血管生成的分子机制 | 第129-133页 |
| 1 YLL545通过VEGFR2途径抑制血管生成 | 第129-130页 |
| 2 YLL545通过VEGFR2非依赖途径抑制血管生成 | 第130-133页 |
| 第四节YLL545抑制乳腺癌细胞生长 | 第133-137页 |
| 1 YLL545抑制乳腺癌细胞增殖 | 第133-134页 |
| 2 YLL545促进乳腺癌细胞的凋亡 | 第134-135页 |
| 3 YLL545对正常细胞增殖的影响 | 第135-137页 |
| 第五节YLL545抑制乳腺癌细胞移植瘤血管生成 | 第137-141页 |
| 1 YLL545抑制乳腺癌细胞移植瘤生长 | 第137-139页 |
| 2 YLL545抑制乳腺癌细胞移植瘤血管生成 | 第139-140页 |
| 3 YLL545药物安全性评估 | 第140-141页 |
| 讨论 | 第141-143页 |
| 结论 | 第143-144页 |
| 参考文献 | 第144-152页 |
| 文献综述一 乳腺癌内分泌治疗耐药的表观遗传调控机制 | 第152-166页 |
| 参考文献 | 第157-166页 |
| 文献综述二 抗VEGF治疗与肿瘤血管新生 | 第166-178页 |
| 参考文献 | 第171-178页 |
| 致谢 | 第178-179页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第179页 |
