| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩写表 | 第8-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-33页 |
| 1.1. 研究背景 | 第13-18页 |
| 1.1.1. 微藻生物柴油的优势 | 第13-14页 |
| 1.1.2. 微藻生物柴油技术的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.1.3. 微藻固碳与产油机理的探究 | 第17-18页 |
| 1.2. 提高微藻油脂含量的调控策略 | 第18-25页 |
| 1.2.1. 利用诱变筛选与环境胁迫提高微藻的油脂含量 | 第19-20页 |
| 1.2.2. 三脂酰甘油（TAG）合成途径的基因改造策略 | 第20-25页 |
| 1.3. Dof-type型转录因子的研究进展 | 第25-31页 |
| 1.3.1. Dof-type型转录因子的酶学特征 | 第26-27页 |
| 1.3.2. Dof-type型转录因子的作用机制及生物学功能 | 第27-31页 |
| 1.4. Dof基因在莱茵衣藻中过表达提高油脂含量 | 第31-33页 |
| 1.4.1. 莱茵衣藻的研究优势 | 第31页 |
| 1.4.2. 本实验研究目的、意义及技术路线 | 第31-33页 |
| 第2章 莱茵衣藻Dof表达载体的构建及其遗传转化 | 第33-54页 |
| 2.1. 实验材料 | 第33-36页 |
| 2.1.1. 实验藻株及菌株 | 第33-34页 |
| 2.1.2. 实验仪器及试剂 | 第34-36页 |
| 2.2. 实验方法 | 第36-43页 |
| 2.2.1. crdof基因的分子克隆及其生物信息学分析 | 第36-40页 |
| 2.2.2. c-gdof基因的改造合成 | 第40-41页 |
| 2.2.3. pJD-c-crdof, pJD-c-gdof表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 2.2.4. 莱茵衣藻的遗传转化 | 第42页 |
| 2.2.5. 转基因藻的分子水平检测 | 第42-43页 |
| 2.3. 实验结果 | 第43-52页 |
| 2.3.1. crdof基因的分子克隆及其生物信息学分析 | 第43-47页 |
| 2.3.2. c-gdof基因的改造合成 | 第47-49页 |
| 2.3.3. pJD-c-crdof与pJD-c-gdof表达载体的构建 | 第49-51页 |
| 2.3.4. 转基因衣藻的筛选 | 第51-52页 |
| 2.4. 本章小结与讨论 | 第52-54页 |
| 第3章 转基因藻crdof与gdof基因的表达及脂肪酸积累的初步分析 | 第54-63页 |
| 3.1. 实验材料 | 第54-55页 |
| 3.1.1. 实验藻株 | 第54页 |
| 3.1.2. 实验仪器及试剂 | 第54-55页 |
| 3.2. 实验方法 | 第55-57页 |
| 3.2.1. 莱茵衣藻总RNA的提取 | 第55页 |
| 3.2.2. 转基因衣藻RNA的定量反转 | 第55-56页 |
| 3.2.3. 转基因衣藻的荧光定量PCR检测 | 第56-57页 |
| 3.3. 实验结果 | 第57-61页 |
| 3.3.1. 荧光定量PCR分析方法的建立 | 第57-58页 |
| 3.3.2. 转基因衣藻的荧光定量PCR分析 | 第58-60页 |
| 3.3.3. BODIPY染色法快速测定转基因衣藻中的油脂含量 | 第60-61页 |
| 3.4. 本章小结与讨论 | 第61-63页 |
| 第4章 转c-crdof和c-gdof基因衣藻的转录调控研究 | 第63-79页 |
| 4.1. 实验材料 | 第63-64页 |
| 4.1.1. 实验藻株 | 第63页 |
| 4.1.2. 实验仪器及试剂 | 第63-64页 |
| 4.2. 实验方法 | 第64-65页 |
| 4.2.1. 莱茵衣藻的热激处理 | 第64页 |
| 4.2.2. 总RNA提取及定量反转录 | 第64页 |
| 4.2.3. 目的基因的荧光定量PCR检测 | 第64-65页 |
| 4.3. 实验结果 | 第65-76页 |
| 4.3.1. c-crdof和c-gdof基因的转录水平分析 | 第65-68页 |
| 4.3.2. 相关酶基因荧光定量PCR分析方法的建立 | 第68-72页 |
| 4.3.3. 相关酶基因的转录水平分析 | 第72-76页 |
| 4.4. 本章小结与讨论 | 第76-79页 |
| 第5章 c-crdof与c-gdof基因对莱茵衣藻脂肪酸含量及组分的影响 | 第79-90页 |
| 5.1. 实验材料 | 第79页 |
| 5.1.1. 实验藻株 | 第79页 |
| 5.1.2. 实验仪器及试剂 | 第79页 |
| 5.2. 实验方法 | 第79-81页 |
| 5.2.1. 莱茵衣藻生长曲线绘制 | 第79页 |
| 5.2.2. 脂肪酸的甲酯化 | 第79-80页 |
| 5.2.3. 脂肪酸含量及组分的GC-MS检测 | 第80页 |
| 5.2.4. 荧光共聚焦显微镜检测转基因衣藻中性脂含量 | 第80-81页 |
| 5.3. 实验结果 | 第81-88页 |
| 5.3.1. 莱茵衣藻生长曲线绘制 | 第81页 |
| 5.3.2. 转基因衣藻脂肪酸检测方法的建立 | 第81-83页 |
| 5.3.3. 热激条件下转基因衣藻脂肪酸含量及组分的分析 | 第83-87页 |
| 5.3.4. 荧光共聚焦显微镜检测转基因衣藻油脂含量 | 第87-88页 |
| 5.4. 本章小结与讨论 | 第88-90页 |
| 第6章 结论及展望 | 第90-93页 |
| 6.1. c-crdof与c-gdof基因调控莱茵衣藻脂类代谢的实验结果 | 第90-91页 |
| 6.2. 利用转录因子工程提高微藻油脂含量的讨论及新策略 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-100页 |
| 附录Ⅰ | 第100-102页 |
| 附录Ⅱ | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 攻读硕士期间的研究成果 | 第104页 |
