英文缩写词对照表 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
前言 | 第11-19页 |
第一章小鼠肝脏磷酸化蛋白质组方法构建 | 第19-34页 |
1.1 材料与方法 | 第19-20页 |
1.1.1 实验材料和仪器 | 第19-20页 |
1.1.2 实验动物 | 第20页 |
1.2 实验方法 | 第20-22页 |
1.2.1 C57BL/6J小鼠肝脏蛋白质提取 | 第20页 |
1.2.2 小鼠肝脏蛋白酶切 | 第20-21页 |
1.2.3 TiO2富集磷酸化肽段 | 第21页 |
1.2.4 HPLC分离磷酸化肽段 | 第21页 |
1.2.5 磷酸化肽段质谱鉴定 | 第21-22页 |
1.2.6 数据库检索 | 第22页 |
1.3 结果与讨论 | 第22-32页 |
1.3.1 正常小鼠肝脏磷酸化蛋白质组数据集 | 第22-25页 |
1.3.2 激酶磷酸化位点分析 | 第25-30页 |
1.3.3 模序富集分析 | 第30-32页 |
1.4 小结 | 第32-34页 |
第二章HBx通过调控PDK1 磷酸化参与HCC发生 | 第34-46页 |
2.1 材料与方法 | 第34-35页 |
2.1.1 实验试剂和材料 | 第34-35页 |
2.1.2 仪器设备 | 第35页 |
2.2 实验方法 | 第35-40页 |
2.2.1 RT-PCR检测24月龄小鼠模型HBx表达 | 第35-38页 |
2.2.2 小鼠肝脏组织样品制备 | 第38页 |
2.2.3 HBx组和WT组小鼠肝脏蛋白酶切、富集、分离(方法同第一章) | 第38页 |
2.2.4 数据库检索和数据质控 | 第38-39页 |
2.2.5 蛋白印迹实验Western Bloting | 第39页 |
2.2.6 CCK-8 检测细胞增殖 | 第39页 |
2.2.7 免疫共沉淀Co-IP | 第39-40页 |
2.2.8 数据分析 | 第40页 |
2.3 结果 | 第40-46页 |
2.3.1 小鼠模型评价 | 第40页 |
2.3.2 定量磷酸化蛋白质组学数据产出 | 第40页 |
2.3.3 重要磷酸化蛋白的筛选 | 第40-41页 |
2.3.4 HBx过表达诱导PDK1 磷酸化水平上调 | 第41-42页 |
2.3.5 HBx减弱PI3K和PDK1 抑制剂的作用 | 第42-43页 |
2.3.6 HBx减弱了PI3K和PDK1 抑制剂的抑制增殖作用 | 第43-45页 |
2.3.7 P-PDK1 在HCC临床样本中的验证 | 第45-46页 |
2.4 小结 | 第46页 |
总结 | 第46-48页 |
文献综述 | 第48-54页 |
参考文献 | 第54-63页 |
附录 | 第63-103页 |
致谢 | 第103页 |