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小鼠肝脏磷酸化蛋白质组学方法构建与HBx通过调控PDK1磷酸化参与HCC发生

英文缩写词对照表第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-10页
前言第11-19页
第一章小鼠肝脏磷酸化蛋白质组方法构建第19-34页
    1.1 材料与方法第19-20页
        1.1.1 实验材料和仪器第19-20页
        1.1.2 实验动物第20页
    1.2 实验方法第20-22页
        1.2.1 C57BL/6J小鼠肝脏蛋白质提取第20页
        1.2.2 小鼠肝脏蛋白酶切第20-21页
        1.2.3 TiO2富集磷酸化肽段第21页
        1.2.4 HPLC分离磷酸化肽段第21页
        1.2.5 磷酸化肽段质谱鉴定第21-22页
        1.2.6 数据库检索第22页
    1.3 结果与讨论第22-32页
        1.3.1 正常小鼠肝脏磷酸化蛋白质组数据集第22-25页
        1.3.2 激酶磷酸化位点分析第25-30页
        1.3.3 模序富集分析第30-32页
    1.4 小结第32-34页
第二章HBx通过调控PDK1 磷酸化参与HCC发生第34-46页
    2.1 材料与方法第34-35页
        2.1.1 实验试剂和材料第34-35页
        2.1.2 仪器设备第35页
    2.2 实验方法第35-40页
        2.2.1 RT-PCR检测24月龄小鼠模型HBx表达第35-38页
        2.2.2 小鼠肝脏组织样品制备第38页
        2.2.3 HBx组和WT组小鼠肝脏蛋白酶切、富集、分离(方法同第一章)第38页
        2.2.4 数据库检索和数据质控第38-39页
        2.2.5 蛋白印迹实验Western Bloting第39页
        2.2.6 CCK-8 检测细胞增殖第39页
        2.2.7 免疫共沉淀Co-IP第39-40页
        2.2.8 数据分析第40页
    2.3 结果第40-46页
        2.3.1 小鼠模型评价第40页
        2.3.2 定量磷酸化蛋白质组学数据产出第40页
        2.3.3 重要磷酸化蛋白的筛选第40-41页
        2.3.4 HBx过表达诱导PDK1 磷酸化水平上调第41-42页
        2.3.5 HBx减弱PI3K和PDK1 抑制剂的作用第42-43页
        2.3.6 HBx减弱了PI3K和PDK1 抑制剂的抑制增殖作用第43-45页
        2.3.7 P-PDK1 在HCC临床样本中的验证第45-46页
    2.4 小结第46页
总结第46-48页
文献综述第48-54页
参考文献第54-63页
附录第63-103页
致谢第103页

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