| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 植物自交不亲和性类型 | 第11-13页 |
| 1.2 梨自交不亲和性研究 | 第13-19页 |
| 1.2.1 梨自交不亲和基因(S-RNase基因)研究 | 第13-14页 |
| 1.2.2 梨S-RNase研究方法 | 第14-19页 |
| 1.3 本研究的意义及技术路线 | 第19-21页 |
| 1.3.1 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第20-21页 |
| 2 梨S-RNASE基因CDNA芯片的制备及杂交条件的优化 | 第21-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 生物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验需要的PCR引物 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-33页 |
| 2.2.1 梨品种雌蕊总RNA提取和cDNA合成 | 第24-26页 |
| 2.2.2 S基因cDNA芯片探针制备 | 第26-29页 |
| 2.2.3 S基因cDNA芯片制备 | 第29-32页 |
| 2.2.4 S基因cDNA芯片杂交条件优化 | 第32-33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-37页 |
| 2.3.1 梨品种雌蕊总RNA提取结果 | 第33-34页 |
| 2.3.2 24个已知S基因型梨品种cDNA特异扩增产物检测 | 第34-35页 |
| 2.3.3 不同条件下cDNA芯片杂交效果分析 | 第35-37页 |
| 2.3.4 优化条件下S基因cDNA芯片杂交效果分析 | 第37页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第37-40页 |
| 3 利用梨S-RNASE基因CDNA芯片检测梨品种S基因型 | 第40-53页 |
| 3.1 实验材料 | 第40-43页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第40页 |
| 3.1.2 其他材料及主要试剂 | 第40-41页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第41-43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 3.2.1 50个梨品种嫩叶基因组DNA、雌蕊总RNA提取及cDNA合成 | 第43页 |
| 3.2.2 50个梨品种特异S基因特异片段扩增 | 第43-44页 |
| 3.2.3 S基因cDNA芯片检测待测梨品种S基因 | 第44页 |
| 3.2.4 杂交阵列出现1个杂交信号的梨品种S基因鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-51页 |
| 3.3.1 50个梨品种cDNA特异扩增结果 | 第45-47页 |
| 3.3.2 梨S基因cDNA芯片对50个梨品种S-RNase基因鉴定结果 | 第47-48页 |
| 3.3.3 一个杂交信号梨品种S基因鉴定结果 | 第48-51页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第51-53页 |
| 4 7个新S基因的分离鉴定和进化分析 | 第53-62页 |
| 4.1 实验材料 | 第53-54页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第53页 |
| 4.1.2 其他材料及主要试剂 | 第53页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第53-54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-55页 |
| 4.2.1 梨品种基因组DNA提取 | 第54页 |
| 4.2.2 梨品种DNA特异片段扩增 | 第54页 |
| 4.2.3 7个新S基因的分离鉴定 | 第54页 |
| 4.2.4 7个新S基因的序列结构特点及分子进化分析 | 第54-55页 |
| 4.3 结果与分析 | 第55-60页 |
| 4.3.1 梨品种基因组提取及DNA特异片段扩增结果 | 第55页 |
| 4.3.2 7个新S-RNase基因的鉴定及序列分析 | 第55-58页 |
| 4.3.3 7个新S-RNase基因进化分析 | 第58-60页 |
| 4.4 小节与讨论 | 第60-62页 |
| 5 结论与创新 | 第62-63页 |
| 5.1 结论 | 第62页 |
| 5.1.1 制备了梨S-RNase基因cDNA芯片并对芯片杂交系统进行了优化,进一步完善了梨品种S-RNase基因检测系统 | 第62页 |
| 5.1.2 利用梨S-RNase基因cDNA芯片鉴定了50个梨品种的S基因型 | 第62页 |
| 5.1.3 7个砂梨新的S等位基因的分离鉴定 | 第62页 |
| 5.2 创新点 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录A 主要试剂配置 | 第71-73页 |
| 附录B 硕士期间的学术成果 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
