摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-20页 |
1.1 研究背景 | 第11页 |
1.2 小麦转基因技术研究进展 | 第11-12页 |
1.3 小麦遗传转化方法 | 第12-15页 |
1.3.1 基因转化法 | 第12-14页 |
1.3.2 农杆菌转化法 | 第14页 |
1.3.3 花粉管通道法 | 第14-15页 |
1.4 小麦遗传转化中的筛选标记基因 | 第15-16页 |
1.4.1 磷酸甘露糖异构酶基因(manA) | 第15-16页 |
1.4.2 草丁膦N-乙酰转移酶基因(Bar) | 第16页 |
1.5 小麦抗赤霉病工程研究进展 | 第16-19页 |
1.5.1 小麦抗赤霉病基因研究现状 | 第16-17页 |
1.5.2 小麦抗赤霉病工程相关抗病基因 | 第17-19页 |
1.6 研究目的和意义 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-30页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 菌株、质粒及小麦材料 | 第20页 |
2.1.2 培养基配方 | 第20-21页 |
2.1.3 实验试剂及药品 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-30页 |
2.2.1 幼胚接种及培养 | 第22页 |
2.2.2 基因片段的制备 | 第22-24页 |
2.2.3 幼胚愈伤高渗处理及基因枪轰击 | 第24页 |
2.2.4 幼胚愈伤的恢复培养及植株再生 | 第24-25页 |
2.2.5 小麦基因组DNA提取试剂的配制 | 第25-26页 |
2.2.6 小麦基因组DNA的提取 | 第26页 |
2.2.7 转基因小麦植株的PCR鉴定 | 第26-27页 |
2.2.8 转基因小麦植株的RT-PCR鉴定 | 第27-28页 |
2.2.9 引物 | 第28-29页 |
2.2.10 转基因小麦的赤霉病抗性鉴定 | 第29-30页 |
3. 结果与分析 | 第30-49页 |
3.1 最小表达框的制备 | 第30页 |
3.2 用于基因枪转化的基因 | 第30-31页 |
3.3 Lem2-UEch42-D2 和Ubi-AFP2 基因共转化扬麦 158 | 第31-35页 |
3.3.1 幼胚愈伤转化和抗性苗的获得 | 第31-32页 |
3.3.2 转基因小麦植株PCR鉴定 | 第32-34页 |
3.3.3 转基因小麦植株T2 代RT-PCR鉴定 | 第34页 |
3.3.4 转基因小麦植株T2 代赤霉病抗性鉴定 | 第34-35页 |
3.4 Cmps-FenA和Cmps-FenB基因共转化郑麦 9023 | 第35-38页 |
3.4.1 幼胚愈伤转化和抗性苗的获得 | 第35页 |
3.4.2 转基因小麦植株PCR鉴定 | 第35-38页 |
3.5 Lem2-UEch42-D2、Ubi-Blf-A6、Amt-Blf基因共转化襄麦 76 | 第38-43页 |
3.5.1 幼胚愈伤转化和抗性苗的获得 | 第38-39页 |
3.5.2 转基因小麦植株PCR鉴定 | 第39-42页 |
3.5.3 转基因小麦T3 代RT-PCR鉴定 | 第42-43页 |
3.6 Ubi-PkcAs3-Chs3As4、Amt-Blf基因共转化襄麦 76 | 第43-47页 |
3.6.1 幼胚愈伤转化和抗性苗的获得 | 第43页 |
3.6.2 转基因小麦植株PCR鉴定 | 第43-45页 |
3.6.3 转基因小麦植株T3 代赤霉病抗性鉴定 | 第45-47页 |
3.7 Dubiubi-Chs3As3-Chs3As4 基因转化襄麦 76 | 第47-49页 |
3.7.1 幼胚愈伤转化和抗性苗的获得 | 第47页 |
3.7.2 转基因小麦植株PCR鉴定 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
4.1 外源基因的导入形式 | 第49页 |
4.2 外源基因的分离及表达 | 第49-51页 |
4.3 转基因后代赤霉病抗性分析 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60页 |