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基因枪介导的转抗赤霉病相关基因小麦的研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略语表第10-11页
1 前言第11-20页
    1.1 研究背景第11页
    1.2 小麦转基因技术研究进展第11-12页
    1.3 小麦遗传转化方法第12-15页
        1.3.1 基因转化法第12-14页
        1.3.2 农杆菌转化法第14页
        1.3.3 花粉管通道法第14-15页
    1.4 小麦遗传转化中的筛选标记基因第15-16页
        1.4.1 磷酸甘露糖异构酶基因(manA)第15-16页
        1.4.2 草丁膦N-乙酰转移酶基因(Bar)第16页
    1.5 小麦抗赤霉病工程研究进展第16-19页
        1.5.1 小麦抗赤霉病基因研究现状第16-17页
        1.5.2 小麦抗赤霉病工程相关抗病基因第17-19页
    1.6 研究目的和意义第19-20页
2 材料与方法第20-30页
    2.1 实验材料第20-22页
        2.1.1 菌株、质粒及小麦材料第20页
        2.1.2 培养基配方第20-21页
        2.1.3 实验试剂及药品第21-22页
    2.2 实验方法第22-30页
        2.2.1 幼胚接种及培养第22页
        2.2.2 基因片段的制备第22-24页
        2.2.3 幼胚愈伤高渗处理及基因枪轰击第24页
        2.2.4 幼胚愈伤的恢复培养及植株再生第24-25页
        2.2.5 小麦基因组DNA提取试剂的配制第25-26页
        2.2.6 小麦基因组DNA的提取第26页
        2.2.7 转基因小麦植株的PCR鉴定第26-27页
        2.2.8 转基因小麦植株的RT-PCR鉴定第27-28页
        2.2.9 引物第28-29页
        2.2.10 转基因小麦的赤霉病抗性鉴定第29-30页
3. 结果与分析第30-49页
    3.1 最小表达框的制备第30页
    3.2 用于基因枪转化的基因第30-31页
    3.3 Lem2-UEch42-D2 和Ubi-AFP2 基因共转化扬麦 158第31-35页
        3.3.1 幼胚愈伤转化和抗性苗的获得第31-32页
        3.3.2 转基因小麦植株PCR鉴定第32-34页
        3.3.3 转基因小麦植株T2 代RT-PCR鉴定第34页
        3.3.4 转基因小麦植株T2 代赤霉病抗性鉴定第34-35页
    3.4 Cmps-FenA和Cmps-FenB基因共转化郑麦 9023第35-38页
        3.4.1 幼胚愈伤转化和抗性苗的获得第35页
        3.4.2 转基因小麦植株PCR鉴定第35-38页
    3.5 Lem2-UEch42-D2、Ubi-Blf-A6、Amt-Blf基因共转化襄麦 76第38-43页
        3.5.1 幼胚愈伤转化和抗性苗的获得第38-39页
        3.5.2 转基因小麦植株PCR鉴定第39-42页
        3.5.3 转基因小麦T3 代RT-PCR鉴定第42-43页
    3.6 Ubi-PkcAs3-Chs3As4、Amt-Blf基因共转化襄麦 76第43-47页
        3.6.1 幼胚愈伤转化和抗性苗的获得第43页
        3.6.2 转基因小麦植株PCR鉴定第43-45页
        3.6.3 转基因小麦植株T3 代赤霉病抗性鉴定第45-47页
    3.7 Dubiubi-Chs3As3-Chs3As4 基因转化襄麦 76第47-49页
        3.7.1 幼胚愈伤转化和抗性苗的获得第47页
        3.7.2 转基因小麦植株PCR鉴定第47-49页
4 讨论第49-52页
    4.1 外源基因的导入形式第49页
    4.2 外源基因的分离及表达第49-51页
    4.3 转基因后代赤霉病抗性分析第51-52页
参考文献第52-60页
致谢第60页

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