| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-20页 |
| 1.1 天然免疫 | 第15页 |
| 1.2 NLRs | 第15-16页 |
| 1.3 NLRP3炎症小体 | 第16-17页 |
| 1.4 DDX19A的生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.5 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染诱导炎症反应 | 第18-19页 |
| 1.6 重要的科学问题及研究意义 | 第19-20页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第20-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 病毒株、菌株、质粒和细胞 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要溶液及配方 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 HP-PRRSV扩增和病毒滴度的测定 | 第21-22页 |
| 2.2.2 RNA提取及cDNA合成 | 第22页 |
| 2.2.3 定量Real time PCR (qRT-PCR) | 第22页 |
| 2.2.4 ELISA方法检测IL-1β | 第22页 |
| 2.2.5 质粒、RNA或siRNA转染 | 第22-23页 |
| 2.2.6 质粒构建 | 第23-24页 |
| 2.2.7 体外反转录试验 | 第24页 |
| 2.2.8 免疫共沉淀试验和Western blot检测 | 第24页 |
| 2.2.9 PAM感染、刺激及检测试验 | 第24页 |
| 2.2.10 慢病毒包装、感染及敲低效率检测 | 第24-25页 |
| 2.2.11 重组蛋白表达及纯化 | 第25页 |
| 2.2.12 GST pulldown试验 | 第25页 |
| 2.2.13 激光共聚焦试验 | 第25-26页 |
| 2.2.14 RNA pulldown试验 | 第26页 |
| 2.2.15 RNA竞争结合试验 | 第26-27页 |
| 2.2.16 统计学方法 | 第27-28页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第28-50页 |
| 3.1 HP-PRRSV感染激活NLRP3炎症小体 | 第28-32页 |
| 3.1.1 HP-PRRSV扩增及滴度测定 | 第28页 |
| 3.1.2 HP-PRRSV感染诱导IL-1β 表达和分泌 | 第28-29页 |
| 3.1.3 HP-PRRSV感染诱导pro-IL-1β 切割成熟 | 第29页 |
| 3.1.4 HP-PRRSV感染诱导caspase-1 活化 | 第29-30页 |
| 3.1.5 HP-PRRSV感染诱导NLRP3炎症小体形成 | 第30页 |
| 3.1.6 HP-PRRSV感染诱导的IL-1β 分泌依赖于NLRP3 | 第30-32页 |
| 3.1.7 小结 | 第32页 |
| 3.2 HP-PRRSV基因组RNA激活NLRP3炎症小体 | 第32-36页 |
| 3.2.1 HP-PRRSV基因组RNA的提取 | 第32页 |
| 3.2.2 HP-PRRSV HuN4的基因组RNA诱导IL-1β 分泌 | 第32-34页 |
| 3.2.3 HP-PRRSV基因组RNA刺激诱导NLRP3炎症小体形成 | 第34-35页 |
| 3.2.4 HP-PRRSV基因组RNA刺激诱导的IL-1β 分泌依赖于NLRP3 | 第35-36页 |
| 3.2.5 小结 | 第36页 |
| 3.3 DDX19A识别RNA并激活NLRP3炎症小体 | 第36-50页 |
| 3.3.1 DDX19A参与NLRP3炎症复合物形成 | 第36-38页 |
| 3.3.2 DDX19A的分子特征 | 第38-39页 |
| 3.3.3 DDX19A与NLRP3相互作用 | 第39-40页 |
| 3.3.4 DDX19A识别HP-PRRSV基因组RNA | 第40-42页 |
| 3.3.5 DDX19A识别poly I:C | 第42-43页 |
| 3.3.6 DDX19A识别细菌RNA | 第43-44页 |
| 3.3.7 DDX19A参与HP-PRRSV感染诱导的NLRP3炎症小体活化和IL-1β 分泌 | 第44-46页 |
| 3.3.8 DDX19A参与HP-PRRSV RNA基因组诱导的NLRP3炎症小体活化和IL-1β 分泌 | 第46-47页 |
| 3.3.9 DDX19A参与细菌RNA诱导的NLRP3炎症小体活化和IL-1β 分泌 .. 333.3.10 DDX19A不影响poly I:C诱导的NLRP3炎症小体活化和IL-1β 分泌 | 第47-48页 |
| 3.3.10 DDX19A不影响polyI:C 诱导的NLRP3炎症小体活化和IL-1β分泌 | 第48页 |
| 3.3.11 DDX19A不影响ATP/LPS诱导的NLRP3炎症小体活化和IL-1β 分泌 | 第48-49页 |
| 3.3.12 小结 | 第49-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-55页 |
| 4.1 PRRSV诱导炎症反应的分子机制 | 第50-53页 |
| 4.2 RNA激活NLRP3炎症小体的分子机制 | 第53-55页 |
| 第五章 全文结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简历 | 第63页 |
