摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
前言 | 第10-13页 |
第一部分 α-MMC对肝细胞的毒性作用及其机制 | 第13-27页 |
1 引言 | 第13页 |
2 实验材料 | 第13-16页 |
2.1 实验药品、细胞株及试剂 | 第13-14页 |
2.2 主要仪器 | 第14-15页 |
2.3 主要配置溶液 | 第15-16页 |
3 实验方法 | 第16-20页 |
3.1 细胞冻存 | 第16-17页 |
3.2 细胞复苏 | 第17页 |
3.3 细胞培养与传代 | 第17-18页 |
3.4 细胞计数 | 第18页 |
3.5 蛋白浓度测定 | 第18页 |
3.6 SDS-PAGE及银染 | 第18-19页 |
3.7 细胞毒实验 | 第19页 |
3.8 L02细胞凋亡实验 | 第19-20页 |
4 实验结果 | 第20-25页 |
4.1 α-MMC银染染色结果图 | 第20-21页 |
4.2 蛋白浓度测定 | 第21-22页 |
4.3 α-MMC的细胞毒实验结果 | 第22-23页 |
4.4 细胞凋亡形态学观察 | 第23-24页 |
4.5 流式细胞仪测定细胞凋亡率 | 第24-25页 |
5 讨论 | 第25-27页 |
第二部分 α-MMC受体介导的内吞途径研究及其受体确认 | 第27-49页 |
1 引言 | 第27页 |
2 实验材料 | 第27-30页 |
2.1 试剂 | 第27-29页 |
2.2 主要仪器 | 第29页 |
2.3 主要配置溶液 | 第29-30页 |
3 实验方法 | 第30-37页 |
3.1 α-MMC细胞膜特异性受体确认及其结合亲和力测定 | 第30-31页 |
3.2 α-MMC受体介导内吞实验 | 第31-33页 |
3.3 α-MMC受体介导内吞阻滞实验 | 第33-37页 |
4 实验结果 | 第37-46页 |
4.1 放射性配体结合分析 | 第37-40页 |
4.2 α-MMC进入细胞的图像 | 第40-42页 |
4.3 WB法筛选实验结果 | 第42-43页 |
4.4 免疫荧光法对siRNA(编号为C)的基因沉默效果再确认 | 第43页 |
4.5 LRP1基因沉默对α-MMC细胞毒性的抑制作用 | 第43-44页 |
4.6 LRP1基因沉默对α-MMC内吞入胞的阻滞作用 | 第44-46页 |
5 讨论 | 第46-49页 |
第三部分 α-MMC受体介导的细胞凋亡信号转导研究 | 第49-56页 |
1 引言 | 第49页 |
2 实验材料 | 第49页 |
2.1 试剂及材料 | 第49页 |
2.2 主要仪器 | 第49页 |
2.3 主要溶液配置 | 第49页 |
3 实验方法 | 第49-51页 |
3.1 α-MMC细胞凋亡信号转导实验 | 第49-51页 |
3.2 α-MMC细胞凋亡信号转导阻滞实验 | 第51页 |
3.3 数据处理 | 第51页 |
4 实验结果 | 第51-54页 |
4.1 α-MMC细胞凋亡信号转导作用 | 第51-52页 |
4.2 α-MMC细胞凋亡信号转导阻滞作用 | 第52-54页 |
5 讨论 | 第54-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
文献综述 | 第61-75页 |
参考文献 | 第71-75页 |
附录 | 第75-77页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |