| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 1 鱼类基因组编辑技术研究概述 | 第13-16页 |
| 1.1 鱼类基因突变体的传统制备 | 第13-14页 |
| 1.2 淡水鱼类基因组编辑技术研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 海洋动物基因组编辑技术研究进展 | 第15-16页 |
| 2 鱼类性别相关基因研究概述 | 第16-24页 |
| 2.1 Dmrt1基因 | 第17-19页 |
| 2.2 Amh基因 | 第19-21页 |
| 2.3 Sox9基因 | 第21-22页 |
| 2.4 Foxl2基因 | 第22-23页 |
| 2.5 Cyp19ala基因 | 第23-24页 |
| 3 鱼类性别相关基因研究概述 | 第24-26页 |
| 3.1 基因组编辑育种已成为农作物的遗传改良的新途径 | 第24-25页 |
| 3.2 鱼类传统的性别控制育种 | 第25-26页 |
| 第二章 半滑舌鳎显微注射技术的建立 | 第26-31页 |
| 1 材料与方法 | 第26-29页 |
| 1.1 实验材料 | 第26页 |
| 1.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 1.2.1 smyd1:gfp质粒的扩培、提取与保种 | 第26-27页 |
| 1.2.2 显微注射针和凹槽板的制备 | 第27-28页 |
| 1.2.3 受精卵前期培育 | 第28页 |
| 1.2.4 显微注射 | 第28页 |
| 1.2.5 受精卵的孵化 | 第28页 |
| 1.2.6 鱼苗中GFP表达观察 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 半滑舌鳎基因组编辑TALEN技术的建立 | 第31-45页 |
| 1 材料与方法 | 第31-39页 |
| 1.1 实验样本 | 第31页 |
| 1.2 实验方法 | 第31-39页 |
| 1.2.1 半滑舌鳎dmrt1 TALEN质粒的设计与构建 | 第31-35页 |
| 1.2.2 TALEN质粒的扩培、提取与保种 | 第35页 |
| 1.2.3 基因组编辑质粒的体外转录 | 第35-36页 |
| 1.2.4 体外转录的dmrt1 TALEN m RNA向鲆鲽鱼类受精卵的转移与培养 | 第36页 |
| 1.2.5 基因发生定点突变鱼苗的养殖与检测 | 第36-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 3.1 基因组编辑技术将在海水鱼类重要经济性状遗传解析上发挥重要作用 | 第43页 |
| 3.2 基因组编辑技术将成为海水鱼类遗传改良和良种培育的重要手段 | 第43-45页 |
| 第四章 半滑舌鳎雄性性别决定基因dmrt1在性腺分化和发育过程中的功能分析 | 第45-63页 |
| 1 材料与方法 | 第45-52页 |
| 1.1 实验样本 | 第45页 |
| 1.2 实验步骤 | 第45-52页 |
| 1.2.1 dmrt1基因定点突变鱼组织结构观察方法 | 第45-49页 |
| 1.2.2 基因定点突变鱼性腺中性别相关基因的表达检测 | 第49-52页 |
| 1.2.3 dmrt1基因定点突变鱼生长性能比较 | 第52页 |
| 2 结果及分析 | 第52-60页 |
| 2.1 dmrt1缺陷的半滑舌鳎雄鱼有性逆转表型 | 第52-53页 |
| 2.2 性别相关基因的表达模式 | 第53-55页 |
| 2.3 dmrt1基因定点突变鱼生长性能比较 | 第55-57页 |
| 2.4 嵌合的dmrt1突变鱼发育成一个dmrt1突变卵巢和一个野生型精巢的雌雄同体鱼 | 第57-60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 第五章 半滑舌鳎雄性性别决定基因dmrt1突变家系的建立 | 第63-68页 |
| 1 材料与方法 | 第63-64页 |
| 1.1 实验样本 | 第63页 |
| 1.2 实验步骤 | 第63-64页 |
| 1.2.1 dmrt1基因突变鱼的检测 | 第63页 |
| 1.2.2 dmrt1基因突变鱼的养殖和强化培育 | 第63-64页 |
| 1.2.3 dmrt1基因突变雄鱼与野生型雌鱼的人工繁育 | 第64页 |
| 1.2.4 dmrt1基因突变雌鱼与野生型雄鱼的人工繁育 | 第64页 |
| 1.2.5 dmrt1基因突变雌鱼与dmrt1基因突变雄鱼的人工繁育 | 第64页 |
| 1.2.6 子代鱼dmrt1基因突变检测 | 第64页 |
| 2 结果及分析 | 第64-67页 |
| 2.1 dmrt1基因突变亲鱼检测情况 | 第64-65页 |
| 2.2 子代鱼dmrt1基因突变检测结果 | 第65-66页 |
| 2.3 dmrt1基因突变亲鱼的可遗传突变类型的确定 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-68页 |
| 总结和展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-82页 |
| 科研成果 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
