| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 木质素综述 | 第12-19页 |
| 1.1.1 木质素的生物学特征 | 第12页 |
| 1.1.2 木质素的生物合成途径 | 第12-15页 |
| 1.1.3 木质素的生物合成受转录因子调控 | 第15-18页 |
| 1.1.4 木质素的生物学功能 | 第18-19页 |
| 1.2 油菜的抗逆性 | 第19-22页 |
| 1.2.1 油菜的逆境胁迫 | 第19页 |
| 1.2.2 油菜抗菌核病的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2.3 油菜抗倒伏的研究进展 | 第21-22页 |
| 第二章 绪论 | 第22-24页 |
| 2.1 研究的目的与意义 | 第22页 |
| 2.2 研究内容和技术路线 | 第22-24页 |
| 2.2.1 研究内容 | 第22-23页 |
| 2.2.2 技术路线 | 第23-24页 |
| 第三章 材料和方法 | 第24-40页 |
| 3.1 菌株和载体 | 第24页 |
| 3.1.1 菌株 | 第24页 |
| 3.1.2 载体 | 第24页 |
| 3.2 主要仪器与设备 | 第24页 |
| 3.2.1 仪器 | 第24页 |
| 3.2.2 设备与耗材 | 第24页 |
| 3.3 主要试剂盒和试剂 | 第24-25页 |
| 3.4 主要溶液及培养基的配制 | 第25-27页 |
| 3.5 NST3基因的生物信息学分析 | 第27页 |
| 3.6 油菜DNA提取 | 第27页 |
| 3.7 油菜RNA提取 | 第27-28页 |
| 3.8 基因敲除靶位引物序列的设计 | 第28-29页 |
| 3.9 CRISPR-Cas9敲除载体的构建 | 第29-34页 |
| 3.9.1 Cas9载体的酶切处理 | 第29页 |
| 3.9.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| 3.9.3 胶回收酶切产物 | 第29-30页 |
| 3.9.4 接头的磷酸化和退火处理 | 第30页 |
| 3.9.5 连接 | 第30-31页 |
| 3.9.6 转化大肠杆菌DH5ɑ感受态细胞 | 第31页 |
| 3.9.7 重组子筛选、菌液PCR鉴定及测序 | 第31-32页 |
| 3.9.8 质粒提取 | 第32-33页 |
| 3.9.9 双酶切及连接 | 第33-34页 |
| 3.9.10 转化及重组子筛选 | 第34页 |
| 3.9.11 转化农杆菌感受态细胞 | 第34页 |
| 3.10 超表达载体的构建 | 第34-37页 |
| 3.10.1 超表达引物的设计 | 第34-35页 |
| 3.10.2 编码区的克隆 | 第35页 |
| 3.10.3 超量表达载体构建与鉴定 | 第35-37页 |
| 3.11 甘蓝型油菜的遗传转化 | 第37-38页 |
| 3.11.1 外植体的获得 | 第37页 |
| 3.11.2 侵染液的准备 | 第37页 |
| 3.11.3 外植体的转化 | 第37-38页 |
| 3.11.4 转基因苗的培育 | 第38页 |
| 3.12 转基因苗的鉴定 | 第38-40页 |
| 3.12.1 CRISPR-Cas9敲除转基因再生植株的鉴定 | 第38-39页 |
| 3.12.2 超量表达转基因再生植株的鉴定 | 第39-40页 |
| 第四章 结果与分析 | 第40-56页 |
| 4.1 NST3基因成员在不同器官中的表达情况 | 第40页 |
| 4.2 甘蓝型油菜NST3基因的生物信息学分析 | 第40-45页 |
| 4.2.1 NST3基因结构分析 | 第40-41页 |
| 4.2.2 甘蓝型油菜NST3基因编码蛋白的二级结构预测 | 第41-44页 |
| 4.2.3 甘蓝型油菜NST3基因编码蛋白的三级结构预测 | 第44页 |
| 4.2.4 NST3基因编码蛋白保守区域预测 | 第44-45页 |
| 4.3 NST3基因敲除载体结果 | 第45-48页 |
| 4.4 超表达载体构建的结果 | 第48-50页 |
| 4.5 敲除和超表达载体转化油菜及鉴定 | 第50-56页 |
| 4.5.1 植物的再生情况 | 第50-51页 |
| 4.5.2 转基因油菜的鉴定 | 第51-56页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第56-60页 |
| 5.1 讨论 | 第56-58页 |
| 5.2 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 在校期间发表论文 | 第70页 |
