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力生长因子对骨髓间充质干细胞的生物学作用及机制研究

中文摘要第3-6页
英文摘要第6-8页
1 绪论第13-23页
    1.1 问题的提出与研究意义第13-14页
    1.2 国内外研究的现状第14-20页
        1.2.1 骨髓间充质干细胞的生物学特性第14-16页
        1.2.2 骨髓间充质干细胞的应用第16-17页
        1.2.3 MGF的结构第17-19页
        1.2.4 MGF的作用第19页
        1.2.5 MGF的作用机制第19-20页
    1.3 本文研究的目的及主要内容第20-23页
        1.3.1 研究目的第20页
        1.3.2 研究内容第20-21页
        1.3.3 创新点第21-23页
2 骨髓间充质干细胞的培养、鉴定及MGF的表达第23-37页
    2.1 引言第23页
    2.2 实验材料与试剂第23-26页
        2.2.1 实验细胞第23-24页
        2.2.2 主要实验仪器及耗材第24页
        2.2.3 主要实验试剂第24-25页
        2.2.4 主要实验试剂的配制方法第25-26页
    2.3 实验方法第26-30页
        2.3.1 骨髓间充质干细胞的分离培养第26页
        2.3.2 细胞免疫荧光染色第26-27页
        2.3.3 骨髓间充质干细胞多向分化能力的检测第27页
        2.3.4 骨髓间充质干细胞特性分析第27页
        2.3.5 骨髓间充质干细胞体外周期性力学加载第27-28页
        2.3.6 RT-PCR第28-30页
        2.3.7 统计分析第30页
    2.4 实验结果第30-35页
        2.4.1 人骨髓间充质干细胞的形态观察第30-31页
        2.4.2 人骨髓间充质干细胞的多向分化潜能第31-33页
        2.4.3 人骨髓间充质干细胞特性分析第33页
        2.4.4 周期性力学刺激下 MGF 基因的表达情况第33-35页
    2.5 分分析与讨论第35-36页
    2.6 本章小结第36-37页
3 力生长因子对hBMSCs增殖、迁移的影响第37-51页
    3.1 引言第37页
    3.2 实验材料与试剂第37-40页
        3.2.1 实验细胞第37-38页
        3.2.2 主要实验仪器及耗材第38页
        3.2.3 主要实验试剂第38-39页
        3.2.4 主要实验试剂的配制第39-40页
    3.3 实验方法第40-43页
        3.3.1 骨髓间充质干细胞培养第40页
        3.3.2 CCK-8 法测细胞增殖方法第40-41页
        3.3.3 创伤愈合实验测细胞迁移方法第41页
        3.3.4 Transwell小室测细胞迁移方法第41页
        3.3.5 Western blot实验方法第41-42页
        3.3.6 RT-PCR第42-43页
        3.3.7 统计分析第43页
    3.4 实验结果第43-48页
        3.4.1 MGF对骨髓间充质干细胞增殖的影响第43-44页
        3.4.2 MGF对骨髓间充质干细胞迁移的影响第44-46页
        3.4.3 MGF对骨髓间充质干细胞COX-2 表达的影响第46-47页
        3.4.4 COX-2 抑制剂NS-398对骨髓间充质干细胞迁移的影响第47-48页
    3.5 分析与讨论第48-50页
    3.6 本章小结第50-51页
4 力生长因子对hBMSCs分化的影响第51-69页
    4.1 引言第51页
    4.2 实验材料与试剂第51-54页
        4.2.1 实验细胞第51-52页
        4.2.2 主要实验仪器及耗材第52页
        4.2.3 主要实验试剂第52-54页
    4.3 实验方法第54-58页
        4.3.1 细胞成骨分化实验第54-55页
        4.3.2 细胞成脂肪分化实验第55-56页
        4.3.3 细胞成软骨分化实验第56-58页
        4.3.4 统计分析第58页
    4.4 实验结果第58-65页
        4.4.1 MGF对hBMSCs向成骨分化的影响第58-61页
        4.4.2 MGF对hBMSCs向脂肪分化的影响第61-63页
        4.4.3 MGF对hBMSCs向软骨分化的影响第63-65页
    4.5 分析与讨论第65-66页
    4.6 本章小结第66-69页
5 过表达MGF对hBMSCs分化的影响第69-79页
    5.1 引言第69页
    5.2 实验材料与试剂第69-70页
        5.2.1 主要实验仪器及耗材第69-70页
        5.2.2 主要实验试剂第70页
    5.3 实验方法第70-75页
        5.3.1 载体构建第70-73页
        5.3.2 质粒扩增第73-74页
        5.3.3 质粒转染第74-75页
        5.3.4 过表达MGF对hBMSCs分化的影响第75页
        5.3.5 统计分析第75页
    5.4 结果及讨论第75-78页
        5.4.1 hBMSCs中MGF过表达结果第75-76页
        5.4.2 过表达MGF对hBMSCs分化的影响第76-78页
    5.5 本章小结第78-79页
6 MGF对hBMSCs细胞周期的影响第79-87页
    6.1 引言第79-80页
    6.2 实验材料与试剂第80-81页
        6.2.1 主要实验仪器及耗材第80页
        6.2.2 主要实验试剂第80-81页
    6.3 实验方法第81-82页
        6.3.1 流式细胞术检测hBMSCs细胞周期第81页
        6.3.2 RT-PCR检测hBMSCs中细胞周期调节基因的表达第81-82页
        6.3.3 统计分析第82页
    6.4 实验结果第82-84页
        6.4.1 MGF抑制hBMSCs细胞周期转化第82-83页
        6.4.2 MGF调节hBMSCs细胞周期基因表达情况第83-84页
    6.5 分分析与讨论第84-85页
    6.6 本章小结第85-87页
7 结论与展望第87-89页
    7.1 本文主要结论第87-88页
    7.2 后续工作展望第88-89页
致谢第89-91页
参考文献第91-105页
附录第105-106页
    A. 作者在攻读博士学位期间科研及发表的论文第105页
    B. 会议文章第105-106页
    C. 作者在攻读博士学位期间参加的科研项目情况第106页

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