中文摘要 | 第3-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
1 绪论 | 第13-23页 |
1.1 问题的提出与研究意义 | 第13-14页 |
1.2 国内外研究的现状 | 第14-20页 |
1.2.1 骨髓间充质干细胞的生物学特性 | 第14-16页 |
1.2.2 骨髓间充质干细胞的应用 | 第16-17页 |
1.2.3 MGF的结构 | 第17-19页 |
1.2.4 MGF的作用 | 第19页 |
1.2.5 MGF的作用机制 | 第19-20页 |
1.3 本文研究的目的及主要内容 | 第20-23页 |
1.3.1 研究目的 | 第20页 |
1.3.2 研究内容 | 第20-21页 |
1.3.3 创新点 | 第21-23页 |
2 骨髓间充质干细胞的培养、鉴定及MGF的表达 | 第23-37页 |
2.1 引言 | 第23页 |
2.2 实验材料与试剂 | 第23-26页 |
2.2.1 实验细胞 | 第23-24页 |
2.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第24页 |
2.2.3 主要实验试剂 | 第24-25页 |
2.2.4 主要实验试剂的配制方法 | 第25-26页 |
2.3 实验方法 | 第26-30页 |
2.3.1 骨髓间充质干细胞的分离培养 | 第26页 |
2.3.2 细胞免疫荧光染色 | 第26-27页 |
2.3.3 骨髓间充质干细胞多向分化能力的检测 | 第27页 |
2.3.4 骨髓间充质干细胞特性分析 | 第27页 |
2.3.5 骨髓间充质干细胞体外周期性力学加载 | 第27-28页 |
2.3.6 RT-PCR | 第28-30页 |
2.3.7 统计分析 | 第30页 |
2.4 实验结果 | 第30-35页 |
2.4.1 人骨髓间充质干细胞的形态观察 | 第30-31页 |
2.4.2 人骨髓间充质干细胞的多向分化潜能 | 第31-33页 |
2.4.3 人骨髓间充质干细胞特性分析 | 第33页 |
2.4.4 周期性力学刺激下 MGF 基因的表达情况 | 第33-35页 |
2.5 分分析与讨论 | 第35-36页 |
2.6 本章小结 | 第36-37页 |
3 力生长因子对hBMSCs增殖、迁移的影响 | 第37-51页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 实验材料与试剂 | 第37-40页 |
3.2.1 实验细胞 | 第37-38页 |
3.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第38页 |
3.2.3 主要实验试剂 | 第38-39页 |
3.2.4 主要实验试剂的配制 | 第39-40页 |
3.3 实验方法 | 第40-43页 |
3.3.1 骨髓间充质干细胞培养 | 第40页 |
3.3.2 CCK-8 法测细胞增殖方法 | 第40-41页 |
3.3.3 创伤愈合实验测细胞迁移方法 | 第41页 |
3.3.4 Transwell小室测细胞迁移方法 | 第41页 |
3.3.5 Western blot实验方法 | 第41-42页 |
3.3.6 RT-PCR | 第42-43页 |
3.3.7 统计分析 | 第43页 |
3.4 实验结果 | 第43-48页 |
3.4.1 MGF对骨髓间充质干细胞增殖的影响 | 第43-44页 |
3.4.2 MGF对骨髓间充质干细胞迁移的影响 | 第44-46页 |
3.4.3 MGF对骨髓间充质干细胞COX-2 表达的影响 | 第46-47页 |
3.4.4 COX-2 抑制剂NS-398对骨髓间充质干细胞迁移的影响 | 第47-48页 |
3.5 分析与讨论 | 第48-50页 |
3.6 本章小结 | 第50-51页 |
4 力生长因子对hBMSCs分化的影响 | 第51-69页 |
4.1 引言 | 第51页 |
4.2 实验材料与试剂 | 第51-54页 |
4.2.1 实验细胞 | 第51-52页 |
4.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第52页 |
4.2.3 主要实验试剂 | 第52-54页 |
4.3 实验方法 | 第54-58页 |
4.3.1 细胞成骨分化实验 | 第54-55页 |
4.3.2 细胞成脂肪分化实验 | 第55-56页 |
4.3.3 细胞成软骨分化实验 | 第56-58页 |
4.3.4 统计分析 | 第58页 |
4.4 实验结果 | 第58-65页 |
4.4.1 MGF对hBMSCs向成骨分化的影响 | 第58-61页 |
4.4.2 MGF对hBMSCs向脂肪分化的影响 | 第61-63页 |
4.4.3 MGF对hBMSCs向软骨分化的影响 | 第63-65页 |
4.5 分析与讨论 | 第65-66页 |
4.6 本章小结 | 第66-69页 |
5 过表达MGF对hBMSCs分化的影响 | 第69-79页 |
5.1 引言 | 第69页 |
5.2 实验材料与试剂 | 第69-70页 |
5.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第69-70页 |
5.2.2 主要实验试剂 | 第70页 |
5.3 实验方法 | 第70-75页 |
5.3.1 载体构建 | 第70-73页 |
5.3.2 质粒扩增 | 第73-74页 |
5.3.3 质粒转染 | 第74-75页 |
5.3.4 过表达MGF对hBMSCs分化的影响 | 第75页 |
5.3.5 统计分析 | 第75页 |
5.4 结果及讨论 | 第75-78页 |
5.4.1 hBMSCs中MGF过表达结果 | 第75-76页 |
5.4.2 过表达MGF对hBMSCs分化的影响 | 第76-78页 |
5.5 本章小结 | 第78-79页 |
6 MGF对hBMSCs细胞周期的影响 | 第79-87页 |
6.1 引言 | 第79-80页 |
6.2 实验材料与试剂 | 第80-81页 |
6.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第80页 |
6.2.2 主要实验试剂 | 第80-81页 |
6.3 实验方法 | 第81-82页 |
6.3.1 流式细胞术检测hBMSCs细胞周期 | 第81页 |
6.3.2 RT-PCR检测hBMSCs中细胞周期调节基因的表达 | 第81-82页 |
6.3.3 统计分析 | 第82页 |
6.4 实验结果 | 第82-84页 |
6.4.1 MGF抑制hBMSCs细胞周期转化 | 第82-83页 |
6.4.2 MGF调节hBMSCs细胞周期基因表达情况 | 第83-84页 |
6.5 分分析与讨论 | 第84-85页 |
6.6 本章小结 | 第85-87页 |
7 结论与展望 | 第87-89页 |
7.1 本文主要结论 | 第87-88页 |
7.2 后续工作展望 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-105页 |
附录 | 第105-106页 |
A. 作者在攻读博士学位期间科研及发表的论文 | 第105页 |
B. 会议文章 | 第105-106页 |
C. 作者在攻读博士学位期间参加的科研项目情况 | 第106页 |