| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 主要英文缩写词 | 第7-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-18页 |
| 1.1 人类免疫缺陷病毒简述 | 第12-13页 |
| 1.2 艾滋病疫苗研发面临的挑战 | 第13-14页 |
| 1.3 艾滋病治疗性疫苗的研究现状 | 第14页 |
| 1.4 痘苗病毒载体疫苗 | 第14-15页 |
| 1.4.1 痘苗病毒载体简介 | 第14-15页 |
| 1.4.2 改良的痘苗病毒安卡拉株载体疫苗 | 第15页 |
| 1.5 DNA疫苗 | 第15-16页 |
| 1.6 本文的研究背景、主要内容及意义 | 第16-18页 |
| 第2章 表达HIV-1 CRF01_AE亚型gp145的DNA疫苗构建及免疫原性研究 | 第18-30页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.2.1 目的基因、表达载体来源 | 第18页 |
| 2.2.2 细胞 | 第18页 |
| 2.2.3 试剂及工具酶 | 第18-19页 |
| 2.2.4 主要实验器材 | 第19-20页 |
| 2.2.5 引物合成 | 第20页 |
| 2.2.6 多肽合成 | 第20页 |
| 2.2.7 实验动物 | 第20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-26页 |
| 2.3.1 DNA疫苗pVR-AEgp145的构建 | 第20-23页 |
| 2.3.2 DNA疫苗pVR-AEgp145的酶切鉴定 | 第23页 |
| 2.3.3 DNA疫苗pVR-AEgp145的蛋白表达鉴定 | 第23页 |
| 2.3.4 DNA疫苗pVR-AEgp145的大量扩增 | 第23-25页 |
| 2.3.5 初步评价DNA疫苗pVR-AEgp145在小鼠体内的免疫反应水平 | 第25-26页 |
| 2.4 实验结果 | 第26-28页 |
| 2.4.1 重组质粒pVR-AEgp145双酶切鉴定 | 第26-27页 |
| 2.4.2 重组质粒pVR-AEgp145蛋白表达水平的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.4.3 DNA疫苗pVR-AEgp145在小鼠体内的免疫反应水平分析 | 第28页 |
| 2.5 讨论 | 第28-29页 |
| 2.6 小结 | 第29-30页 |
| 第3章 表达HIV-1 CRF01_AE亚型gp145的MVA疫苗构建及单独或与DNA疫苗联合免疫的研究 | 第30-44页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.2.1 目的基因MVA载体来源 | 第30页 |
| 3.2.2 细胞及病毒株 | 第30页 |
| 3.2.3 试剂及工具酶 | 第30-31页 |
| 3.3 主要实验器材 | 第31-32页 |
| 3.4 引物的合成 | 第32页 |
| 3.5 实验方法 | 第32-38页 |
| 3.5.1 穿梭质粒pSC11-AEgp145的构建 | 第32-33页 |
| 3.5.2 重组痘苗病毒rMVA- AEgp145的包装 | 第33页 |
| 3.5.3 重组痘苗病毒rMVA- AEgp145的筛选 | 第33-34页 |
| 3.5.4 重组病毒rMVA- AE gp145的鉴定 | 第34-35页 |
| 3.5.5 Western blot方法检测重组痘苗病毒Gp145蛋白的表达 | 第35页 |
| 3.5.6 大量扩增和纯化重组痘苗病毒rMVA- AEgp145 | 第35-36页 |
| 3.5.7 重组痘苗病毒rMVA- AE gp145滴度的测定 | 第36-37页 |
| 3.5.8 重组痘苗病毒rMVA-AEgp145的单独及与DNA疫苗联合免疫方案 | 第37-38页 |
| 3.5.9 IFN-ELISpot检测小鼠体内特异性T细胞反应 | 第38页 |
| 3.5.10 ELISA方法检测免疫小鼠体内的抗体滴度 | 第38页 |
| 3.6 实验结果 | 第38-41页 |
| 3.6.1 重组病毒的筛选结果 | 第38-39页 |
| 3.6.2 重组MVA疫苗r MVA-AEgp145基因水平的鉴定 | 第39-40页 |
| 3.6.3 重组MVA疫苗r MVA-AEgp145蛋白表达水平的鉴定 | 第40页 |
| 3.6.4 rMVA-AEgp145单独及与pVR-AEgp145联合免疫效果 | 第40-41页 |
| 3.6.5 免疫小鼠血清抗体滴度的检测 | 第41页 |
| 3.7 讨论 | 第41-42页 |
| 3.8 本章小结 | 第42-44页 |
| 结论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 攻读硕士学位期间的主要成果 | 第50-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
