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基于适配体核酶催化的微流控化学发光法在微量分析中的应用研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 绪论第13-36页
    1.1 引言第13页
    1.2 核酸适配体第13-15页
    1.3 适配体生物传感器的分类第15-20页
        1.3.1 基于电化学检测法的适配体生物传感器第15-16页
        1.3.2 基于比色法的适配体生物传感器第16-18页
        1.3.3 基于荧光法的适配体生物传感器第18-20页
    1.4 基于G四联体DNA酶的适配体生物传感器第20-27页
        1.4.1 G四联体与DNA酶第20-21页
        1.4.2 G四联体DNA酶在生物传感器中的设计应用第21-27页
    1.5 核酸信号放大技术第27-31页
        1.5.1 聚合酶链式反应第28-29页
        1.5.2 滚环扩增反应第29页
        1.5.3 杂交链式反应第29-31页
    1.6 核酸二级结构预测软件—适配体传感器设计的辅助工具第31-34页
        1.6.1 UNAFold第32-33页
        1.6.2 NUPACK第33-34页
    1.7 本论文的研究目的及内容第34-36页
第二章 均相适配体核酶传感器的机理研究及其在生化分析中的应用第36-56页
    2.1 引言第36-37页
    2.2 实验部分第37-41页
        2.2.1 试剂第37-39页
        2.2.2 仪器第39页
        2.2.3 适配体核酶传感器的设计及制备第39-40页
        2.2.4 变温紫外-可见分光光度实验第40页
        2.2.5 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验(PAGE)第40页
        2.2.6 化学发光实验第40-41页
    2.3 结果与讨论第41-55页
        2.3.1 传感模式的选择及机理分析第41-45页
        2.3.2 功能链抑制程度的调节第45-46页
        2.3.3 金属阳离子诱导的Watson-Crick与G四联体的二级结构互变第46-49页
        2.3.4 适配体核酶传感器的其他条件优化第49-51页
        2.3.5 化学发光的条件优化第51-53页
        2.3.6 传感器的灵敏度与特异性第53-55页
    2.4 本章小结第55-56页
第三章 基于NUPACK预测设计的toehold诱导链置换反应及其在DNA酶催化微流控化学发光SNP分析中的应用第56-65页
    3.1 引言第56-57页
    3.2 实验部分第57-59页
        3.2.1 试剂第57-58页
        3.2.2 实验仪器第58页
        3.2.3 SNP分析溶液的制备第58页
        3.2.4 基因的定量检测第58页
        3.2.5 区分因子DF的计算第58页
        3.2.6 电泳实验第58-59页
        3.2.7 NUPACK预测模拟计算第59页
    3.3 结果与讨论第59-64页
        3.3.1 SNP分析原理第59-60页
        3.3.2 toehold序列长度的软件预测与实验对比第60-61页
        3.3.3 SNP分析原理验证第61-62页
        3.3.4 反应时间的影响第62-63页
        3.3.5 分析性能第63-64页
        3.3.6 SNP探针特异性与适用性第64页
    3.4 本章小结第64-65页
第四章 基于发夹自组装的DNA酶增敏微流控化学发光法在检测SNP的应用研究第65-75页
    4.1 引言第65-66页
    4.2 实验部分第66-68页
        4.2.1 试剂第66-67页
        4.2.2 仪器第67页
        4.2.3 发夹自组装(CHA)传感器的制备第67页
        4.2.4 化学发光实验第67页
        4.2.5 DF的计算第67-68页
    4.3 结果与讨论第68-74页
        4.3.1 传感器工作原理第68-69页
        4.3.2 实验原理的验证第69-70页
        4.3.3 Toehold长度调节第70-71页
        4.3.4 传感器相关条件的优化第71-73页
        4.3.5 基因的定量分析第73-74页
        4.3.6 实际样品的检测第74页
    4.4 本章小结第74-75页
第五章 总结与展望第75-77页
参考文献第77-87页
附录第87页

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