致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第13-36页 |
1.1 引言 | 第13页 |
1.2 核酸适配体 | 第13-15页 |
1.3 适配体生物传感器的分类 | 第15-20页 |
1.3.1 基于电化学检测法的适配体生物传感器 | 第15-16页 |
1.3.2 基于比色法的适配体生物传感器 | 第16-18页 |
1.3.3 基于荧光法的适配体生物传感器 | 第18-20页 |
1.4 基于G四联体DNA酶的适配体生物传感器 | 第20-27页 |
1.4.1 G四联体与DNA酶 | 第20-21页 |
1.4.2 G四联体DNA酶在生物传感器中的设计应用 | 第21-27页 |
1.5 核酸信号放大技术 | 第27-31页 |
1.5.1 聚合酶链式反应 | 第28-29页 |
1.5.2 滚环扩增反应 | 第29页 |
1.5.3 杂交链式反应 | 第29-31页 |
1.6 核酸二级结构预测软件—适配体传感器设计的辅助工具 | 第31-34页 |
1.6.1 UNAFold | 第32-33页 |
1.6.2 NUPACK | 第33-34页 |
1.7 本论文的研究目的及内容 | 第34-36页 |
第二章 均相适配体核酶传感器的机理研究及其在生化分析中的应用 | 第36-56页 |
2.1 引言 | 第36-37页 |
2.2 实验部分 | 第37-41页 |
2.2.1 试剂 | 第37-39页 |
2.2.2 仪器 | 第39页 |
2.2.3 适配体核酶传感器的设计及制备 | 第39-40页 |
2.2.4 变温紫外-可见分光光度实验 | 第40页 |
2.2.5 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验(PAGE) | 第40页 |
2.2.6 化学发光实验 | 第40-41页 |
2.3 结果与讨论 | 第41-55页 |
2.3.1 传感模式的选择及机理分析 | 第41-45页 |
2.3.2 功能链抑制程度的调节 | 第45-46页 |
2.3.3 金属阳离子诱导的Watson-Crick与G四联体的二级结构互变 | 第46-49页 |
2.3.4 适配体核酶传感器的其他条件优化 | 第49-51页 |
2.3.5 化学发光的条件优化 | 第51-53页 |
2.3.6 传感器的灵敏度与特异性 | 第53-55页 |
2.4 本章小结 | 第55-56页 |
第三章 基于NUPACK预测设计的toehold诱导链置换反应及其在DNA酶催化微流控化学发光SNP分析中的应用 | 第56-65页 |
3.1 引言 | 第56-57页 |
3.2 实验部分 | 第57-59页 |
3.2.1 试剂 | 第57-58页 |
3.2.2 实验仪器 | 第58页 |
3.2.3 SNP分析溶液的制备 | 第58页 |
3.2.4 基因的定量检测 | 第58页 |
3.2.5 区分因子DF的计算 | 第58页 |
3.2.6 电泳实验 | 第58-59页 |
3.2.7 NUPACK预测模拟计算 | 第59页 |
3.3 结果与讨论 | 第59-64页 |
3.3.1 SNP分析原理 | 第59-60页 |
3.3.2 toehold序列长度的软件预测与实验对比 | 第60-61页 |
3.3.3 SNP分析原理验证 | 第61-62页 |
3.3.4 反应时间的影响 | 第62-63页 |
3.3.5 分析性能 | 第63-64页 |
3.3.6 SNP探针特异性与适用性 | 第64页 |
3.4 本章小结 | 第64-65页 |
第四章 基于发夹自组装的DNA酶增敏微流控化学发光法在检测SNP的应用研究 | 第65-75页 |
4.1 引言 | 第65-66页 |
4.2 实验部分 | 第66-68页 |
4.2.1 试剂 | 第66-67页 |
4.2.2 仪器 | 第67页 |
4.2.3 发夹自组装(CHA)传感器的制备 | 第67页 |
4.2.4 化学发光实验 | 第67页 |
4.2.5 DF的计算 | 第67-68页 |
4.3 结果与讨论 | 第68-74页 |
4.3.1 传感器工作原理 | 第68-69页 |
4.3.2 实验原理的验证 | 第69-70页 |
4.3.3 Toehold长度调节 | 第70-71页 |
4.3.4 传感器相关条件的优化 | 第71-73页 |
4.3.5 基因的定量分析 | 第73-74页 |
4.3.6 实际样品的检测 | 第74页 |
4.4 本章小结 | 第74-75页 |
第五章 总结与展望 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-87页 |
附录 | 第87页 |