摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第—章 研究背景综述 | 第8-32页 |
1.1 癌症内容概述 | 第9-15页 |
1.1.1 癌症临床现状 | 第9-11页 |
1.1.1.1 癌症患者临床数据 | 第9-10页 |
1.1.1.2 癌症治疗手段 | 第10-11页 |
1.1.2 癌症遗传学背景 | 第11-15页 |
1.1.2.1 原癌基因 | 第13-14页 |
1.1.2.2 抑癌基因 | 第14页 |
1.1.2.3 非编码RNA分子 | 第14-15页 |
1.2 miRNAs内容概述 | 第15-22页 |
1.2.1 miRNA的发现历程和命名 | 第15-17页 |
1.2.1.1 miRNA的发现过程 | 第15-16页 |
1.2.1.2 miRNA的命名 | 第16-17页 |
1.2.2 miRNA的合成 | 第17-18页 |
1.2.3 miRNA的作用机制 | 第18-22页 |
1.2.3.1 植物中miRNA的作用机制——指导靶mRNA的切割 | 第19-20页 |
1.2.3.2 动物中miRNA的作用机制——指导翻译抑制 | 第20页 |
1.2.3.3 RISC沉默复合体 | 第20-21页 |
1.2.3.4 靶分子的识别 | 第21-22页 |
1.3 内含子miRNA反馈调节宿主基因的表达与功能研究进展 | 第22-24页 |
1.3.1 内含子miRNA定义 | 第22-23页 |
1.3.2 内含子miRNA在基因表达调控中的作用 | 第23-24页 |
1.4 miRNA的功能意义 | 第24-27页 |
1.4.1 miRNA的生物学意义 | 第24-25页 |
1.4.2 目前亟需解决的问题 | 第25-26页 |
1.4.3. 前景及展望 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-32页 |
第二章 实验部分 | 第32-63页 |
2.1 引言 | 第33-35页 |
2.2 材料和方法 | 第35-46页 |
2.2.1 实验材料 | 第35-37页 |
2.2.2 实验方法 | 第37-45页 |
2.2.2.1 组织、细胞蛋白的提取 | 第37-38页 |
2.2.2.2 组织或细胞RNA的提取 | 第38页 |
2.2.2.3 细胞培养 | 第38页 |
2.2.2.4 细胞转染 | 第38-39页 |
2.2.2.5 实时荧光定量PCR | 第39-42页 |
2.2.2.5.1 miRNAs的表达检测 | 第39-41页 |
2.2.2.5.2 mRNA的表达检测 | 第41-42页 |
2.2.2.6 质粒构建和荧光素酶实验 | 第42-44页 |
2.2.2.7 细胞增殖实验 | 第44页 |
2.2.2.8 Transwell实验 | 第44-45页 |
2.2.3 数值的统计分析 | 第45-46页 |
2.3 实验结果 | 第46-61页 |
2.3.1 miR-4728-5p在乳腺癌癌组织样本中表达升高 | 第46-48页 |
2.3.2 生物信息学预测EBP1为miR-4728-5p的靶基因 | 第48-49页 |
2.3.3 荧光素酶报告基因实验验证miR-4728-5p和EBP1mRNA3'-UTR结合 | 第49-50页 |
2.3.4 在乳腺癌细胞系中过表达或者降低miR-4728-5p水平可改变EBP1和Erbb2蛋白水平 | 第50-53页 |
2.3.5 EBP1水平的变化对Erbb2和miR-4728-5p的影响 | 第53-56页 |
2.3.6 过表达EBP1蛋白可回复miR-4728-5p对EBP1的抑制作用 | 第56-57页 |
2.3.7 miR-4728-5p通过调节EBPl蛋白水平影响乳腺癌细胞增殖和迁移 | 第57-59页 |
2.3.8 过表达EBP1蛋白可回复miR-4728-5p对BT474细胞迁移和增殖的影响 | 第59-61页 |
2.4 讨论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-65页 |
攻读硕士学位期间发表成果 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |