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miR-4728-5p在乳腺癌发生中的作用和机制研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第—章 研究背景综述第8-32页
    1.1 癌症内容概述第9-15页
        1.1.1 癌症临床现状第9-11页
            1.1.1.1 癌症患者临床数据第9-10页
            1.1.1.2 癌症治疗手段第10-11页
        1.1.2 癌症遗传学背景第11-15页
            1.1.2.1 原癌基因第13-14页
            1.1.2.2 抑癌基因第14页
            1.1.2.3 非编码RNA分子第14-15页
    1.2 miRNAs内容概述第15-22页
        1.2.1 miRNA的发现历程和命名第15-17页
            1.2.1.1 miRNA的发现过程第15-16页
            1.2.1.2 miRNA的命名第16-17页
        1.2.2 miRNA的合成第17-18页
        1.2.3 miRNA的作用机制第18-22页
            1.2.3.1 植物中miRNA的作用机制——指导靶mRNA的切割第19-20页
            1.2.3.2 动物中miRNA的作用机制——指导翻译抑制第20页
            1.2.3.3 RISC沉默复合体第20-21页
            1.2.3.4 靶分子的识别第21-22页
    1.3 内含子miRNA反馈调节宿主基因的表达与功能研究进展第22-24页
        1.3.1 内含子miRNA定义第22-23页
        1.3.2 内含子miRNA在基因表达调控中的作用第23-24页
    1.4 miRNA的功能意义第24-27页
        1.4.1 miRNA的生物学意义第24-25页
        1.4.2 目前亟需解决的问题第25-26页
        1.4.3. 前景及展望第26-27页
    参考文献第27-32页
第二章 实验部分第32-63页
    2.1 引言第33-35页
    2.2 材料和方法第35-46页
        2.2.1 实验材料第35-37页
        2.2.2 实验方法第37-45页
            2.2.2.1 组织、细胞蛋白的提取第37-38页
            2.2.2.2 组织或细胞RNA的提取第38页
            2.2.2.3 细胞培养第38页
            2.2.2.4 细胞转染第38-39页
            2.2.2.5 实时荧光定量PCR第39-42页
                2.2.2.5.1 miRNAs的表达检测第39-41页
                2.2.2.5.2 mRNA的表达检测第41-42页
            2.2.2.6 质粒构建和荧光素酶实验第42-44页
            2.2.2.7 细胞增殖实验第44页
            2.2.2.8 Transwell实验第44-45页
        2.2.3 数值的统计分析第45-46页
    2.3 实验结果第46-61页
        2.3.1 miR-4728-5p在乳腺癌癌组织样本中表达升高第46-48页
        2.3.2 生物信息学预测EBP1为miR-4728-5p的靶基因第48-49页
        2.3.3 荧光素酶报告基因实验验证miR-4728-5p和EBP1mRNA3'-UTR结合第49-50页
        2.3.4 在乳腺癌细胞系中过表达或者降低miR-4728-5p水平可改变EBP1和Erbb2蛋白水平第50-53页
        2.3.5 EBP1水平的变化对Erbb2和miR-4728-5p的影响第53-56页
        2.3.6 过表达EBP1蛋白可回复miR-4728-5p对EBP1的抑制作用第56-57页
        2.3.7 miR-4728-5p通过调节EBPl蛋白水平影响乳腺癌细胞增殖和迁移第57-59页
        2.3.8 过表达EBP1蛋白可回复miR-4728-5p对BT474细胞迁移和增殖的影响第59-61页
    2.4 讨论第61-63页
参考文献第63-65页
攻读硕士学位期间发表成果第65-66页
致谢第66-67页

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