摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
缩略语 | 第11-12页 |
1 绪论 | 第12-18页 |
1.1 引言 | 第12页 |
1.2 AmB | 第12-13页 |
1.3 AmB的作用机制 | 第13-14页 |
1.4 真菌对AmB的耐药机制 | 第14-16页 |
1.5 PMP3 调节 AmB 抗性 | 第16页 |
1.6 MAPK 与 ROS 相关性 | 第16页 |
1.7 实验设计方案 | 第16-18页 |
1.7.1 实验目的及意义 | 第16-17页 |
1.7.2 研究内容 | 第17-18页 |
2 PMP3能增加细胞质膜的稳定性 | 第18-31页 |
2.1 实验材料和方法 | 第18-25页 |
2.1.1 实验材料 | 第18-20页 |
2.1.2 实验使用的方法 | 第20-25页 |
2.2 实验结果与分析 | 第25-29页 |
2.2.1 建立AmB梯度并分析其对酵母细胞的作用 | 第25-26页 |
2.2.2 野生型菌株以及缺失突变体的AmB胁迫响应表型分析 | 第26页 |
2.2.3 PMP3的同源性分析与克隆 | 第26-27页 |
2.2.4 PMP3 基因克隆 PCR | 第27页 |
2.2.5 PMP3 超表达对细胞 PI 染色的影响 | 第27-28页 |
2.2.6 PMP3 的超表达对细胞罗丹明 123 吸收与外排的影响 | 第28-29页 |
2.3 小节讨论 | 第29-31页 |
3 PMP3能增加细胞内钠离子的代谢平衡 | 第31-37页 |
3.1 实验材料和方法 | 第31-32页 |
3.1.1 实验仪器与材料 | 第31页 |
3.1.2 实验使用的方法 | 第31-32页 |
3.2 实验步骤与结果 | 第32-35页 |
3.2.1 PMP3缺陷菌株对不同离子的耐受性 | 第32页 |
3.2.2 PMP3 及同工基因与钠钾离子通道的关系 | 第32-33页 |
3.2.3 细胞内离子的检测 | 第33-35页 |
3.3 小节讨论 | 第35-37页 |
4 PMP3参与AmB抗性与甾醇合成通路的相关性探究 | 第37-42页 |
4.1 实验材料和方法 | 第37-38页 |
4.1.1 实验仪器与材料 | 第37页 |
4.1.2 实验使用的方法 | 第37-38页 |
4.2 实验步骤与结果 | 第38-40页 |
4.2.1 PMP3 超标达对 Am B 的抗性与甾醇合成通路的关系 | 第38-40页 |
4.2.2 PMP3 超标达不影响甾醇合成 | 第40页 |
4.3 小节讨论 | 第40-42页 |
5 PMP3参与细胞抗氧化作用与AmB耐药性相关研究 | 第42-64页 |
5.1 PMP3通过抗氧化酶系统改变细胞的AmB耐药性 | 第42-53页 |
5.1.1 实验仪器与材料 | 第42-43页 |
5.1.1.1 主要试剂 | 第42页 |
5.1.1.2 主要仪器 | 第42-43页 |
5.1.1.3 主要菌株 | 第43页 |
5.1.2 实验使用的方法 | 第43-46页 |
5.1.3 实验步骤与结果 | 第46-53页 |
5.2 PMP3通过MAPK通路参与细胞抗氧化作用 | 第53-60页 |
5.2.1 实验仪器与材料 | 第53页 |
5.2.1.1 主要试剂 | 第53页 |
5.2.1.2 主要仪器 | 第53页 |
5.2.1.3 主要菌株 | 第53页 |
5.2.2 实验使用的方法 | 第53-56页 |
5.2.3 实验步骤与结果 | 第56-60页 |
5.2.3.1 PMP3与MAPK通路的关系 | 第56-57页 |
5.2.3.2 MAPK缺陷菌株中PMP3和活性氧的关系 | 第57-58页 |
5.2.3.3 RT-PCR检测MAPK与PMP3的相关性 | 第58-60页 |
5.3 小节讨论 | 第60-64页 |
6 总结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
学位期间的研究成果 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |