| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-46页 |
| 1.1 绪论 | 第18-19页 |
| 1.2 人血白蛋白 | 第19-23页 |
| 1.2.1 人血白蛋白的分子特征 | 第19-20页 |
| 1.2.2 血浆中分离人血白蛋白 | 第20-22页 |
| 1.2.3 人血白蛋白和血液制品行情 | 第22-23页 |
| 1.3 重组人血白蛋白 | 第23-32页 |
| 1.3.1 重组人血白蛋白的表达系统 | 第23-24页 |
| 1.3.2 重组人血白蛋白的要求 | 第24-25页 |
| 1.3.3 rHSA分离纯化和典型工艺 | 第25-29页 |
| 1.3.4 rHSA研究进展 | 第29-32页 |
| 1.4 混合模式层析 | 第32-39页 |
| 1.4.1 基本原理 | 第33页 |
| 1.4.2 混合模式配基 | 第33-37页 |
| 1.4.3 蛋白分离应用 | 第37-39页 |
| 1.5 扩张床吸附 | 第39-43页 |
| 1.5.1 基本原理 | 第39-41页 |
| 1.5.2 扩张床吸附的关键技术 | 第41-42页 |
| 1.5.3 扩张床吸附的应用 | 第42-43页 |
| 1.6 本文研究思路 | 第43-46页 |
| 第二章 基于色氨酸类似物的混合模式配基筛选 | 第46-76页 |
| 2.1 引言 | 第46-47页 |
| 2.2 材料和方法 | 第47-50页 |
| 2.2.1 主要试剂与仪器 | 第47页 |
| 2.2.2 混合模式介质制备 | 第47-48页 |
| 2.2.3 配基密度测定 | 第48页 |
| 2.2.4 静态吸附平衡 | 第48-49页 |
| 2.2.5 蛋白与配基的性质计算 | 第49-50页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第50-74页 |
| 2.3.1 配基结构分析 | 第50-52页 |
| 2.3.2 混合模式介质制备 | 第52页 |
| 2.3.3 pH对HSA吸附性能的影响 | 第52-58页 |
| 2.3.4 盐对HSA吸附性能的影响 | 第58-68页 |
| 2.3.5 HSA-配基相互作用分析 | 第68-74页 |
| 2.4 本章小结 | 第74-76页 |
| 第三章 以色胺为配基的混合模式介质优化及吸附性能 | 第76-98页 |
| 3.1 引言 | 第76页 |
| 3.2 材料和方法 | 第76-81页 |
| 3.2.1 主要试剂与仪器 | 第76-77页 |
| 3.2.2 琼脂糖微球基质的基本性质 | 第77-78页 |
| 3.2.3 混合模式介质制备 | 第78-79页 |
| 3.2.4 介质的基本性质分析 | 第79-80页 |
| 3.2.5 静态吸附平衡 | 第80页 |
| 3.2.6 吸附动力学曲线 | 第80页 |
| 3.2.7 蛋白穿透曲线 | 第80-81页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第81-96页 |
| 3.3.1 琼脂糖凝胶的基本性质 | 第81-82页 |
| 3.3.2 基质活化 | 第82-83页 |
| 3.3.3 配基偶联 | 第83-85页 |
| 3.3.4 介质制备的放大 | 第85-88页 |
| 3.3.5 HSA静态吸附 | 第88-91页 |
| 3.3.6 吸附动力学 | 第91-94页 |
| 3.3.7 HSA动态载量 | 第94-96页 |
| 3.4 本章小结 | 第96-98页 |
| 第四章 混合模式层析分离重组人血白蛋白 | 第98-116页 |
| 4.1 引言 | 第98页 |
| 4.2 材料和方法 | 第98-101页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第98-99页 |
| 4.2.2 发酵液预处理 | 第99页 |
| 4.2.3 静态吸附平衡 | 第99页 |
| 4.2.4 rHSA动态载量 | 第99-100页 |
| 4.2.5 rHSA层析分离 | 第100页 |
| 4.2.6 SEC-HPLC分析 | 第100页 |
| 4.2.7 SDS-PAGE分析 | 第100-101页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第101-115页 |
| 4.3.1 原料液基本性质 | 第101-102页 |
| 4.3.2 静态吸附平衡 | 第102-108页 |
| 4.3.3 rHSA动态载量 | 第108-109页 |
| 4.3.4 酵母发酵液中分离rHSA | 第109-114页 |
| 4.3.5 过程稳定性验证 | 第114-115页 |
| 4.4 本章小结 | 第115-116页 |
| 第五章 混合模式扩张床吸附分离重组人血白蛋白 | 第116-140页 |
| 5.1 引言 | 第116-117页 |
| 5.2 材料与方法 | 第117-118页 |
| 5.2.1 主要试剂与仪器 | 第117页 |
| 5.2.2 扩张床介质制备 | 第117页 |
| 5.2.3 静态吸附平衡 | 第117页 |
| 5.2.4 穿透曲线 | 第117-118页 |
| 5.2.5 酵母发酵液中分离rHSA | 第118页 |
| 5.2.6 SEC-HPLC和SDS-PAGE分析 | 第118页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第118-138页 |
| 5.3.1 扩张床介质制备 | 第118-119页 |
| 5.3.2 静态吸附平衡 | 第119-125页 |
| 5.3.3 动态载量 | 第125-131页 |
| 5.3.4 酵母发酵液中分离rHSA | 第131-138页 |
| 5.4 本章小结 | 第138-140页 |
| 第六章 HSA与色胺配基的相互作用分析 | 第140-166页 |
| 6.1 引言 | 第140-141页 |
| 6.2 材料与方法 | 第141-144页 |
| 6.2.1 分子建模和主要软件 | 第141-142页 |
| 6.2.2 分子对接 | 第142页 |
| 6.2.3 分子动力学模拟 | 第142-143页 |
| 6.2.4 色胺介质吸附HSA的热力学分析 | 第143-144页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第144-164页 |
| 6.3.1 HSA分子的结构分析 | 第144-146页 |
| 6.3.2 分子对接和色胺配基结合位点分析 | 第146-149页 |
| 6.3.3 分子动力学模拟和色胺-HSA结合模式分析 | 第149-161页 |
| 6.3.4 色胺介质结合HSA的等温滴定量热分析 | 第161-164页 |
| 6.4 本章小结 | 第164-166页 |
| 第七章 结论和展望 | 第166-169页 |
| 7.1 结论 | 第166-168页 |
| 7.2 展望 | 第168-169页 |
| 参考文献 | 第169-182页 |
| 攻读博士学位期间的研究成果 | 第182-183页 |
| 作者简介 | 第183页 |