| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1.1 丹参素 | 第9-12页 |
| 1.1.1 丹参素的药理活性 | 第9-10页 |
| 1.1.2 丹参素的生产 | 第10-12页 |
| 1.2 基因表达的调控 | 第12-15页 |
| 1.2.1 启动子对转录水平的调控 | 第12-13页 |
| 1.2.2 非翻译区对翻译水平的调控 | 第13-14页 |
| 1.2.3 启动子和 5’非翻译区的组合对基因表达的调控 | 第14-15页 |
| 1.3 DNA组装技术 | 第15-17页 |
| 1.3.1 同尾酶切与连接酶组装 | 第15页 |
| 1.3.2 ⅡS型DNA组装技术 | 第15-16页 |
| 1.3.3 Gibson DNA组装技术 | 第16页 |
| 1.3.4 同源重组技术 | 第16-17页 |
| 1.4 本文研究的内容和意义 | 第17-19页 |
| 1.4.1 主要内容 | 第17-18页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第18-19页 |
| 第二章 构建组成型合成丹参素的大肠杆菌 | 第19-42页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-27页 |
| 2.1.1 实验所用菌株与质粒 | 第19-21页 |
| 2.1.2 实验所用试剂与仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.3 培养基及培养条件 | 第22页 |
| 2.1.4 实验所用方法 | 第22-27页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第27-40页 |
| 2.2.1 重叠延伸PCR构建ybhb-lacUV5-hpaBC-dldh-cm-ybhc片段 | 第27-30页 |
| 2.2.2 ⅡS DNA组装技术构建pBCL2-pBCL13 | 第30-32页 |
| 2.2.3 pJET1.2gz载体的构建 | 第32页 |
| 2.2.4 酶切连接构建pBCL2-pBCL13 | 第32-35页 |
| 2.2.5 λ-red同源重组构建菌株BCL1-BCL13 | 第35-36页 |
| 2.2.6 重组菌合成丹参素 | 第36-37页 |
| 2.2.7 启动子强度分析 | 第37页 |
| 2.2.8 最优启动子组合筛选 | 第37-39页 |
| 2.2.9 发酵动力学变化 | 第39-40页 |
| 2.3 本章小结 | 第40-42页 |
| 第三章 大孔吸附树脂从发酵液中分离纯化丹参素 | 第42-56页 |
| 3.1 材料仪器和方法 | 第42-46页 |
| 3.1.1 材料和仪器 | 第42页 |
| 3.1.2 大孔吸附树脂的预处理 | 第42-43页 |
| 3.1.3 发酵液的预处理 | 第43页 |
| 3.1.4 静态吸附和解吸实验 | 第43-45页 |
| 3.1.5 动态吸附解吸实验 | 第45页 |
| 3.1.6 样品中丹参素浓度的测定方法 | 第45-46页 |
| 3.1.7 丹参素最终纯度和收率的计算方法 | 第46页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第46-55页 |
| 3.2.1 静态吸附和解吸结果 | 第46-52页 |
| 3.2.2 动态条件下吸附和解吸结果 | 第52-55页 |
| 3.2.3 在最佳的吸附和解吸条件下制备性分离丹参素 | 第55页 |
| 3.3 本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 结论与展望 | 第56-58页 |
| 4.1 主要结论 | 第56页 |
| 4.2 展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
