| 致谢 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第14-64页 |
| 1.1 引言 | 第14-15页 |
| 1.2 微流控数字PCR分析 | 第15-34页 |
| 1.2.1 数字PCR技术概述 | 第15-17页 |
| 1.2.2 微流控数字PCR分析系统分类 | 第17-30页 |
| 1.2.2.1 引言 | 第17-18页 |
| 1.2.2.2 基于微反应室的数字PCR系统 | 第18-22页 |
| 1.2.2.3 基于液滴的数字PCR系统 | 第22-30页 |
| 1.2.2.3.1 基于微乳相液滴的数字PCR系统 | 第23-28页 |
| 1.2.2.3.2 基于二维液滴阵列的数字PCR系统 | 第28-30页 |
| 1.2.3 数字PCR技术的应用 | 第30-34页 |
| 1.2.3.1 肿瘤研究 | 第30-32页 |
| 1.2.3.2 产前诊断 | 第32页 |
| 1.2.3.3 单细胞分析 | 第32-33页 |
| 1.2.3.4 病毒、微生物分析 | 第33页 |
| 1.2.3.5 下一代测序验证 | 第33-34页 |
| 1.3 蛋白质-配体亲和力分析 | 第34-50页 |
| 1.3.1 概述 | 第34页 |
| 1.3.2 基于分离的蛋白质-配体亲和力分析 | 第34-37页 |
| 1.3.3 非分离的蛋白质-配体亲和力分析 | 第37-50页 |
| 1.3.3.1 基于光学检测法的蛋白质-配体亲和力分析 | 第37-45页 |
| 1.3.3.1.1 基于荧光标记的光学检测方法 | 第37-43页 |
| 1.3.3.1.2 无标记的光学检测方法 | 第43-45页 |
| 1.3.3.2 基于质谱检测的蛋白质-配体亲和力分析 | 第45-46页 |
| 1.3.3.3 基于量热法的蛋白质-配体亲和力分析 | 第46-50页 |
| 1.3.3.3.1 等温滴定量热法(ITC) | 第46-47页 |
| 1.3.3.3.2 差示扫描量热法(DSC) | 第47页 |
| 1.3.3.3.3 热稳定性分析法(TSA) | 第47-50页 |
| 1.4 小结 | 第50-51页 |
| 1.5 参考文献 | 第51-64页 |
| 第二章 多体积液滴数字PCR分析系统的研究 | 第64-99页 |
| 2.1 引言 | 第64-66页 |
| 2.2 实验部分 | 第66-76页 |
| 2.2.1 实验试剂及材料 | 第66-68页 |
| 2.2.2 实验溶液的配制 | 第68-69页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第69页 |
| 2.2.4 亲水柱阵列玻璃芯片的加工 | 第69-72页 |
| 2.2.5 PTFE管的加工 | 第72页 |
| 2.2.6 基于SAMFS法的液滴形成系统 | 第72-73页 |
| 2.2.7 大视场荧光成像检测系统 | 第73-74页 |
| 2.2.8 实验操作 | 第74-76页 |
| 2.2.8.1 芯片清洗 | 第74页 |
| 2.2.8.2 液滴阵列的形成 | 第74-75页 |
| 2.2.8.3 数字PCR实验 | 第75-76页 |
| 2.2.8.4 数据分析 | 第76页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第76-92页 |
| 2.3.1 系统设计 | 第76-77页 |
| 2.3.2 SAMFS法形成液滴 | 第77-84页 |
| 2.3.2.1 液滴形成过程 | 第77-78页 |
| 2.3.2.2 影响液滴形成过程的因素及液滴体积的计算 | 第78-82页 |
| 2.3.2.3 单体积和多体积液滴阵列的形成 | 第82-84页 |
| 2.3.3 多体积液滴数字PCR分析系统的优化 | 第84-88页 |
| 2.3.3.1 芯片的加工 | 第84-86页 |
| 2.3.3.2 点样探针的加工 | 第86页 |
| 2.3.3.3 多体积液滴阵列的设计 | 第86-87页 |
| 2.3.3.4 防止液滴蒸发的措施 | 第87-88页 |
| 2.3.4 多体积液滴数字PCR系统的分析性能 | 第88-90页 |
| 2.3.5 不同乳腺癌细胞中HER2基因表达的测定 | 第90-92页 |
| 2.4 结论与展望 | 第92-93页 |
| 2.5 参考文献 | 第93-99页 |
| 第三章 用于蛋白质-配体亲和力分析的基于液滴阵列的蛋白质热稳定性分析系统的研究 | 第99-135页 |
| 3.1 引言 | 第99-102页 |
| 3.2 实验部分 | 第102-112页 |
| 3.2.1 实验试剂及材料 | 第102-103页 |
| 3.2.2 实验溶液的配制 | 第103-104页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第104-106页 |
| 3.2.4 亲水点阵列硅芯片的加工 | 第106-108页 |
| 3.2.5 毛细管的加工 | 第108页 |
| 3.2.6 实验操作 | 第108-112页 |
| 3.2.6.1 芯片清洗 | 第108页 |
| 3.2.6.2 液滴反应器的形成 | 第108-111页 |
| 3.2.6.3 升温过程及图像采集 | 第111页 |
| 3.2.6.4 数据分析 | 第111-112页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第112-128页 |
| 3.3.1 系统设计 | 第112-113页 |
| 3.3.2 系统可行性验证 | 第113-116页 |
| 3.3.2.1 液滴荧光强度随温度变化的情况 | 第113-115页 |
| 3.3.2.2 不同蛋白质的熔解曲线及T_m值 | 第115-116页 |
| 3.3.3 dTSA系统优化 | 第116-122页 |
| 3.3.3.1 液滴体积的影响 | 第116-118页 |
| 3.3.3.2 SYPRO Orange浓度的影响 | 第118-119页 |
| 3.3.3.3 蛋白质浓度的影响 | 第119-120页 |
| 3.3.3.4 升温速率的影响 | 第120-122页 |
| 3.3.4 dTSA系统的分析性能 | 第122-124页 |
| 3.3.5 人凝血酶抑制剂筛选 | 第124-128页 |
| 3.4 结论与展望 | 第128-130页 |
| 3.5 参考文献 | 第130-135页 |
| 附录 | 第135-145页 |
| 作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第145-146页 |
