摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 前言 | 第10-24页 |
1.1 植物表皮蜡质的功能 | 第10-13页 |
1.1.1 控制植物与环境间的水分交换 | 第10-11页 |
1.1.2 抵抗病虫害 | 第11-12页 |
1.1.3 抵抗紫外线辐射 | 第12-13页 |
1.1.4 表皮蜡质的其他作用 | 第13页 |
1.2 植物表皮蜡质的生物合成、运输及调控 | 第13-21页 |
1.2.1 表皮蜡质的生物合成 | 第16-18页 |
1.2.2 表皮蜡质的运转 | 第18-20页 |
1.2.3 表皮蜡质合成的转录调控、转录后和翻译后调控 | 第20-21页 |
1.3 二氧化碳浓度变化对蜡质合成的影响 | 第21-22页 |
1.4 本研究的目的意义 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-40页 |
2.1 实验材料 | 第24-27页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第24-26页 |
2.1.2.1 菌株 | 第24页 |
2.1.2.2 载体 | 第24-26页 |
2.1.3 主要试剂 | 第26页 |
2.1.4 实验仪器 | 第26-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-40页 |
2.2.1 拟南芥种植及转录组测序材料取材 | 第27-28页 |
2.2.2 拟南芥总RNA提取 | 第28-29页 |
2.2.3 逆转录:cDNA的合成 | 第29-30页 |
2.2.4 实时荧光定量分析(qRT-PCR) | 第30页 |
2.2.5 CRISPR/Cas9基因敲除载体的构建 | 第30-31页 |
2.2.6 感受态的制备及转化 | 第31-34页 |
2.2.6.1 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第31-33页 |
2.2.6.2 根瘤农杆菌感受态的制备及转化 | 第33-34页 |
2.2.7 农杆菌介导法转化拟南芥 | 第34-35页 |
2.2.8 气相色谱分析植物表皮蜡质 | 第35页 |
2.2.8.1 拟南芥表皮蜡质的提取 | 第35页 |
2.2.8.2 拟南芥表皮蜡质的分析 | 第35页 |
2.2.9 转基因材料鉴定 | 第35-37页 |
2.2.9.1 T1代转基因株系筛选 | 第35-36页 |
2.2.9.2 阳性苗鉴定 | 第36-37页 |
2.2.10 凝胶回收和质粒抽提 | 第37-40页 |
2.2.10.1 凝胶回收 | 第37-38页 |
2.2.10.2 质粒抽提 | 第38-40页 |
3 结果与分析 | 第40-62页 |
3.1 二氧化碳浓度变化影响蜡质成分及含量 | 第40-42页 |
3.2 高浓度二氧化碳抑制烷烃合成的分子机制探讨 | 第42-57页 |
3.2.1 转录组测序的质量控制分析 | 第43-46页 |
3.2.1.1 测序数据质量评估 | 第43页 |
3.2.1.2 参考序列对比分析 | 第43页 |
3.2.1.3 基因功能注释 | 第43-45页 |
3.2.1.4 样品间基因表达水平相关性分析 | 第45-46页 |
3.2.1.5 差异表达分析 | 第46页 |
3.2.2 高浓度二氧化碳调控叶片基因表达的分析 | 第46-47页 |
3.2.3 高浓度二氧化碳调控蜡质基因表达的分析 | 第47-50页 |
3.2.4 拟南芥叶片下表皮蜡质合成相关基因分析 | 第50-57页 |
3.3 SPL13对表皮蜡质合成的影响 | 第57-62页 |
3.3.1 过量表达SPL13影响表皮蜡质 | 第57页 |
3.3.2 转基因株系的构建 | 第57-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-74页 |
附录 | 第74-77页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |