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两个抗病性增强的水稻类病变突变体基因的图位克隆及其功能的初步分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
缩略词表第13-14页
第一章 文献综述第14-27页
   ·水稻的主要病害第14-15页
     ·水稻条纹叶枯病第14-15页
     ·水稻白叶枯病第15页
   ·水稻抗病相关基因的挖掘及其功能研究第15-21页
     ·水稻抗条纹叶枯病基因的挖掘及其功能研究第16-17页
     ·水稻抗白叶枯病基因的挖掘及其功能研究第17-21页
   ·水稻类病变突变体第21-26页
     ·水稻类病变突变体概述第21-23页
     ·水稻类病变突变体在水稻抗病性研究中的作用第23-26页
   ·研究目的与意义第26-27页
第二章 突变体Z1834候选基因的克隆第27-46页
   ·实验材料与试剂第27页
   ·实验方法第27-37页
     ·候选基因的克隆第27-31页
       ·TRIZol法提取总RNA第28页
       ·逆转录成cDNA第28-29页
       ·PCR反应第29页
       ·凝胶回收纯化、连接及转化第29-31页
     ·表达载体的构建第31-35页
       ·超表达载体构建第31-34页
       ·RNAi干涉载体第34-35页
     ·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化第35-36页
       ·水稻成熟胚愈伤组织的诱导第35页
       ·胚性愈伤的继代增殖第35页
       ·农杆菌介导的侵染和抗性愈伤的选择第35-36页
       ·抗性愈伤的分化第36页
     ·转基因水稻植株的鉴定第36-37页
       ·转基因水稻的表型分析第36页
       ·转基因水稻的PCR验证第36-37页
   ·结果分析第37-45页
     ·Z1834突变体的获得第37-40页
     ·突变体Z1834目标基因的定位及候选位点的筛选第40-41页
     ·突变体Z1834候选基因的克隆第41-42页
     ·突变体Z1834表达载体的构建第42页
     ·突变体Z1834的遗传转化第42-43页
     ·突变体Z1834转基因植株的鉴定第43-45页
   ·讨论第45-46页
第三章 突变体Z1834目标基因功能的初步分析第46-64页
   ·实验材料与试剂第46页
   ·实验方法第46-51页
     ·目标基因的亚细胞定位第46-48页
       ·sGFP融合表达载体的构建第46-47页
       ·根癌农杆菌介导的烟草转染第47-48页
       ·原生质体转染第48页
     ·突变体相关的表达分析第48-50页
       ·半定量PCR第48-49页
       ·实时荧光定量PCR第49-50页
     ·突变体材料的生理分析第50-51页
       ·TB染色第50-51页
       ·DAB染色第51页
   ·结果分析第51-61页
     ·Z1834目标基因的亚细胞定位第51-53页
     ·突变体材料相关的表达分析第53-56页
       ·Z1834目标基因的组织特异性表达第53页
       ·类病变表型出现前后Z1834目标基因的表达分析第53-54页
       ·白叶枯病菌诱导Z1834目标基因在叶片中的表达分析第54-56页
     ·病程相关基因的表达分析第56-58页
     ·突变体材料的生理分析第58-61页
       ·突变体Z1834的TB染色第58-60页
       ·突变体Z1834的DAB染色第60-61页
   ·讨论第61-64页
第四章 突变体Z1828候选基因的克隆第64-73页
   ·实验材料与试剂第64页
   ·实验方法第64页
   ·结果分析第64-71页
     ·Z1828突变体的获得第64-67页
     ·突变体Z1828目标基因的定位及候选位点的筛选第67-68页
     ·突变体Z1828候选基因的克隆第68页
     ·突变体Z1828表达载体的构建第68页
     ·突变体Z1828的遗传转化第68-69页
     ·突变体Z1828转基因植株的鉴定第69-71页
   ·讨论第71-73页
第五章 突变体Z1828目标基因功能的初步分析第73-88页
   ·实验材料与试剂第73页
   ·实验方法第73页
   ·结果分析第73-85页
     ·Z1828目标基因的亚细胞定位第73-75页
     ·突变体材料相关的表达分析第75-80页
       ·Z1828目标基因的组织特异性表达第75页
       ·类病变表型出现前后Z1828目标基因的表达分析第75-76页
       ·白叶枯病菌诱导Z1828目标基因在叶片中的表达分析第76-78页
       ·Z1828同源基因的表达分析第78-80页
     ·病程相关基因的表达分析第80-82页
     ·突变体材料的生理分析第82-85页
       ·Z1828突变体的TB染色第82-83页
       ·Z1828突变体的DAB染色第83-85页
   ·讨论第85-88页
第六章 结论与展望第88-90页
   ·主要结论第88-89页
   ·创新之处第89页
   ·展望第89-90页
参考文献第90-99页
附录第99-105页
致谢第105-107页
攻读学位期间取得的研究成果第107-108页
浙江师范大学学位论文诚信承诺书第108-109页

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