| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| RNA干扰的原理、机制及在动物繁殖中的应用 | 第13-33页 |
| 1. RNAi的研究历史 | 第13-14页 |
| 2. RNAi的作用机理 | 第14-18页 |
| 3. siRNAs的常见制备 | 第18-22页 |
| 4. siRNA的介导途径 | 第22-26页 |
| 5. siRNA的体内导入途径 | 第26-27页 |
| 6. 检测RNAi结果的方法 | 第27-28页 |
| 7. RNAi的生物学意义 | 第28-30页 |
| 8. RNAi技术在动物繁殖中的应用 | 第30-32页 |
| 9. 展望 | 第32-33页 |
| 试验研究 | 第33-54页 |
| 实验一 小鼠Zfy基因shRNA表达载体的构建 | 第33-43页 |
| 1. 材料与方法 | 第33-38页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-38页 |
| 2. 结果与分析 | 第38-40页 |
| ·靶序列的选择 | 第38-39页 |
| ·表达载体的克隆与酶切鉴定 | 第39页 |
| ·重组表达质粒的测序鉴定 | 第39-40页 |
| 3. 讨论 | 第40-43页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第40-41页 |
| ·siRNA的设计原则 | 第41-42页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第42-43页 |
| 实验二 Zfy基因shRNA表达载体的体内RNA干扰试验 | 第43-54页 |
| 1. 材料与方法 | 第43-47页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·实验动物 | 第44页 |
| ·Zfy基因RNAi重组载体构建 | 第44页 |
| ·重组质粒的大量制备与纯化 | 第44-45页 |
| ·Zfy基因体内RNAi试验 | 第45页 |
| ·qRT-PCR测定睾丸Zfy mRNA表达水平 | 第45-47页 |
| ·数据统计 | 第47页 |
| 2. 结果与分析 | 第47-52页 |
| ·PCR扩增结果 | 第47-48页 |
| ·Zfy mRNA的表达水平 | 第48-51页 |
| ·后代的性别比例 | 第51-52页 |
| 3. 讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 创新点 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67-68页 |
| 导师评阅表 | 第68页 |