| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| ·肌肉生长抑制素（Myostatin） | 第11-15页 |
| ·肌肉生长抑制素基因的发现 | 第11-12页 |
| ·Myostatin 基因的结构 | 第12页 |
| ·Myostatin 基因表达特异性 | 第12-13页 |
| ·Myostatin 基因生物学功能 | 第13-14页 |
| ·Myostatin 基因的应用前景 | 第14页 |
| ·Myostatin 基因的启动子 | 第14-15页 |
| ·RNA 干扰 | 第15-19页 |
| ·RNA 干扰现象的发现 | 第15页 |
| ·RNA 干扰的机制 | 第15-16页 |
| ·哺乳动物的 RNA 干扰 | 第16-19页 |
| ·RNAI 在MSTN 基因功能研究中的应用 | 第19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-38页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·质粒和细胞 | 第21页 |
| ·工具酶、试剂盒及其它试剂 | 第21-22页 |
| ·主要器材 | 第22页 |
| ·缓冲液及主要试剂的配制 | 第22-23页 |
| ·主要生物学分析软件 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-38页 |
| ·猪胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第23-24页 |
| ·基因组DNA 及总cDNA 的获得 | 第24-26页 |
| ·猪Myostatin 基因克隆及真核表达载体的构建 | 第26-31页 |
| ·构建过表达MSTN 的成纤维细胞系 | 第31-32页 |
| ·shRNA 真核表达载体的构建 | 第32-35页 |
| ·干扰效率的测定 | 第35-36页 |
| ·MSTN 启动子的验证 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-47页 |
| ·MSTN 克隆质粒的构建及鉴定 | 第38-40页 |
| ·PCR 扩增MSTN 目的片段 | 第38页 |
| ·pMD-MSTN 重组质粒的酶切鉴定 | 第38-39页 |
| ·克隆质粒pMD-MSTN 的序列分析 | 第39页 |
| ·pMSTN-1 真核表达质粒的鉴定 | 第39-40页 |
| ·过表达MSTN 成纤维细胞的建系与鉴定 | 第40-41页 |
| ·表达MSTN 成纤维细胞DNA 水平的检测 | 第40页 |
| ·表达MSTN 成纤维细胞mRNA 水平的检测 | 第40-41页 |
| ·SIRNA 真核表达载体的构建 | 第41-43页 |
| ·siRNA 退火合成shRNA | 第41-42页 |
| ·pGenesil-1 质粒载体线性化 | 第42页 |
| ·干扰载体pGe-MSTNshRNA 的构建及鉴定 | 第42-43页 |
| ·干扰效率的测定 | 第43-44页 |
| ·MSTN 启动子功能的验证 | 第44-47页 |
| ·PCR 扩增MSTNPro 目的片段 | 第44页 |
| ·pMD-MSTNPro 重组质粒的酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·克隆质粒pMD-MSTNPro 的序列分析 | 第45页 |
| ·MSTNPro-EGFP 真核表达质粒的鉴定 | 第45-46页 |
| ·猪Myostatin 基因启动子在C2C12 细胞和成纤维细胞中的转录调控活性 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| ·Myostatin 基因编码区的克隆 | 第47页 |
| ·过表达Myostatin 基因成纤维细胞的建立 | 第47页 |
| ·Myostatin 基因的RNA 干扰 | 第47-48页 |
| ·Myostatin 启动子研究 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
