| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 一． 人脐带间充质干细胞的分离、培养和生物学特性研究 | 第15-26页 |
| 引言 | 第15页 |
| ·材料 | 第15-18页 |
| ·样本 | 第15页 |
| ·仪器与试剂 | 第15-16页 |
| ·主要溶液配制 | 第16-18页 |
| ·方法 | 第18-22页 |
| ·组织块贴壁法分离人脐带间充质干细胞 | 第18-20页 |
| ·流式细胞术（FCM）检测 hUC-MSCs 的免疫表型 | 第20页 |
| ·诱导 hUC-MSCs 向成骨细胞、成软骨细胞和脂肪细胞分化 | 第20-22页 |
| ·结果 | 第22-24页 |
| ·hUC-MSCs 的分离培养和形态学观察 | 第22页 |
| ·hUC-MSCs 的免疫表型分析 | 第22-23页 |
| ·hUC-MSCs 的分化潜能和鉴定 | 第23-24页 |
| ·小结 | 第24-26页 |
| 二． hUC-MSCs 上清对正常人外周血单个核细胞（PBMC）各淋巴细胞亚群比例的影响 | 第26-40页 |
| 引言 | 第26页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·样本 | 第26页 |
| ·仪器与试剂 | 第26-27页 |
| ·主要溶液配制 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-33页 |
| ·PBMC 的分离培养 | 第27-28页 |
| ·hUC-MSCs 上清对 PBMC 增殖的影响 | 第28-30页 |
| ·FCM 分析 hUC-MSCs 上清对 PBMC 各淋巴细胞亚群比例的影响 | 第30页 |
| ·ELISA 法检测 hUC-MSCs 上清对 PBMC 分泌 IFN-γ、IL-10 的影响 | 第30-32页 |
| ·Annexin V/PI 双染确定活化 PBMC 的凋亡情况 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-39页 |
| ·hUC-MSCs 上清对 PBMC 增殖的影响 | 第33-35页 |
| ·FCM 分析 hUC-MSCs 上清对 PBMC 各淋巴细胞亚群比例的影响 | 第35-37页 |
| ·ELISA 法检测 hUC-MSCs 上清对 PBMC 分泌 IFN-γ、IL-10 的影响 | 第37-38页 |
| ·Annexin V/PI 双染确定 PBMC 的凋亡情况 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 三． PGE2参与 hUC-MSCs 对 Treg 亚群比例的调节并影响 PBMC 的增殖活性 | 第40-52页 |
| 引言 | 第40页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·样本 | 第40页 |
| ·仪器与试剂 | 第40-41页 |
| ·主要溶液配制 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| ·PBMC 的分离培养（见第二章 2.2.1） | 第41页 |
| ·PGE2拮抗剂 NS-398 浓度摸索 | 第41-43页 |
| ·NS-398 作用后的 MSC 条件培养基对 CD4+CD25+CD127lowTreg 细胞亚群比例的影响 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-51页 |
| ·梯度浓度 NS-398 作用下 hUC-MSCs 形态观察 | 第44-45页 |
| ·梯度浓度 NS-398 作用下 hUC-MSCs 凋亡情况 | 第45-47页 |
| ·ELISA 法检测梯度浓度 NS-398 作用下 hUC-MSCs 分泌 PGE2的变化 | 第47-48页 |
| ·流式细胞术检测 PBMC 中 CD4+CD25+CD127lowTreg 细胞亚群的比例 | 第48-49页 |
| ·ELISA 法检测 NS-398 作用后的 MSC-CM 对 PBMC 分泌 IFN-γ、IL-10 的影响 | 第49-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 四． hUC-MSCs 上清与 CIK 及肿瘤细胞 A549 共培养体系的相互作用研究 | 第52-61页 |
| 引言 | 第52页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·样本与细胞 | 第52页 |
| ·仪器与试剂 | 第52页 |
| ·主要溶液配制 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-57页 |
| ·CIK 细胞的诱导培养 | 第53-54页 |
| ·CIK 细胞的免疫表型检测 | 第54-55页 |
| ·hUC-MSCs 上清对肿瘤细胞体外增殖能力的影响 | 第55-56页 |
| ·MTT 法检测经 hUC-MSCs 上清处理的 CIK 细胞对肿瘤细胞的杀伤能力 | 第56-57页 |
| ·结果 | 第57-60页 |
| ·CIK 免疫表型检测结果 | 第57-58页 |
| ·经 hUC-MSCs 上清处理后的肿瘤细胞周期检测 | 第58-59页 |
| ·MTT 法检测 hUC-MSC 上清作用后的肿瘤细胞体外生长曲线 | 第59页 |
| ·MTT 法检测 hUC-MSCs 上清处理后的 CIK 细胞对肿瘤细胞的体外杀伤活性 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 讨论 | 第61-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 附录一 英文缩略词表 | 第71-73页 |
| 附录二 攻读学位期间发表的论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
