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禽多杀性巴氏杆菌C48-3株外膜蛋白H的致病性及其受体的鉴定

目录第1-7页
表目录第7-8页
图目录第8-9页
摘要第9-10页
ABSTRACT第10-11页
第1章 绪论第11-16页
   ·多杀性巴氏杆菌第11页
   ·多杀性巴氏杆菌致病因子第11-12页
   ·外膜蛋白 OmpH第12-13页
   ·粘附素及其受体第13-14页
   ·研究目的和意义第14-15页
   ·主要研究内容和技术路线第15-16页
第2章 禽多杀性巴氏杆菌 C48-3 株 OmpH 的表达、纯化及抗血清制备第16-26页
   ·材料第16-18页
     ·质粒和菌株第16页
     ·实验主要试剂第16-18页
     ·实验仪器第18页
   ·方法第18-21页
     ·C48-3 株基因组 DNA 的提取第18-19页
     ·C48-3 株 ompH 基因的 PCR 扩增第19页
     ·ompH 基因 T 连接、转化及重组菌筛选第19页
     ·重组质粒 PCR 和酶切鉴定第19-20页
     ·ompH 基因片段测序及序列分析第20页
     ·重组表达质粒 pQE30-ompH 的构建第20页
     ·目的蛋白的诱导表达及其纯化第20页
     ·重组蛋白 rOmpH 抗体的制备第20页
     ·重组蛋白 rOmpH 的免疫原性检测第20-21页
   ·结果及分析第21-24页
     ·基因组 DNA 的琼脂糖电泳检测第21页
     ·PCR 产物的琼脂糖电泳检测第21-22页
     ·菌落 PCR 鉴定第22页
     ·重组质粒的鉴定第22-23页
     ·重组蛋白 rOmpH 表达和纯化第23-24页
     ·重组蛋白 rOmpH 的免疫原性检测第24页
   ·讨论第24-26页
第3章 禽多杀性巴氏杆菌 C48-3 株 OmpH 的致病性第26-35页
   ·材料第26-28页
     ·菌株和材料第26页
     ·实验试剂第26-27页
     ·主要仪器第27-28页
   ·方法第28-30页
     ·鸡胚成纤维细胞培养第28页
     ·粘附试验第28-29页
     ·粘附抑制试验第29页
     ·血清敏感性试验第29页
     ·吞噬试验第29-30页
   ·结果与分析第30-33页
     ·粘附试验第30-31页
     ·粘附抑制试验第31-32页
     ·血清敏感性试验第32页
     ·吞噬试验第32-33页
   ·讨论第33-35页
第4章 禽多杀性巴氏杆菌 C48-3 株 OmpH 受体的分离和鉴定第35-46页
   ·材料第35-37页
     ·实验材料第35页
     ·实验试剂第35-36页
     ·实验仪器第36-37页
     ·实验主要缓冲液第37页
   ·方法第37-40页
     ·鸡胚成纤维细胞的制备第37-38页
     ·鸡胚成纤维细胞的观察及收集第38页
     ·鸡胚成纤维细胞膜蛋白的制备第38页
     ·rOmpH 结合膜蛋白的 Ligand blot 试验第38-39页
     ·受体蛋白的 MALDI-TOF 鉴定第39页
     ·rOmpH 结合鸡胚成纤维细胞的间接免疫荧光检测第39页
     ·不同宿主粘膜细胞膜蛋白的制备及 Ligand blot 检测第39页
     ·rOmpH 结合不同宿主粘膜膜蛋白的间接 ELISA 检测第39页
     ·rOmpH 结合不同宿主粘膜膜蛋白的免疫荧光检测第39-40页
   ·结果及分析第40-45页
     ·鸡胚成纤维细胞第40页
     ·鸡胚成纤维细胞膜蛋白的 SDS-PAGE 检测第40-41页
     ·rOmpH 结合膜蛋白的 Ligand blot 检测第41-42页
     ·受体蛋白的 MALDI-TOF 鉴定第42页
     ·rOmpH 结合鸡胚成纤维细胞的间接免疫荧光检测第42-43页
     ·检测 rOmpH 结合不同宿主食管粘膜膜蛋白第43-45页
   ·讨论第45-46页
结束语第46-48页
 结论第46-47页
 展望第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-54页
作者在学期间取得的学术成果第54页

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