| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| ·表皮生长因子 | 第9-13页 |
| ·表皮生长因子的发现 | 第9页 |
| ·表皮生长因子的结构与功能 | 第9-10页 |
| ·表皮生长因子的生物学作用及临床应用 | 第10-11页 |
| ·重组表皮生长因子的分泌表达 | 第11-13页 |
| ·生物学活性检测 | 第13页 |
| ·表皮生长因子在化妆品中的应用 | 第13-15页 |
| ·表皮生长因子的嫩肤作用 | 第14页 |
| ·表皮生长因子对皮肤损伤的修复作用 | 第14页 |
| ·表皮生长因子的抗皱消纹作用 | 第14-15页 |
| ·表皮生长因子的美白祛斑功效 | 第15页 |
| ·细胞穿膜肽 | 第15-18页 |
| ·细胞穿膜肽的种类 | 第15-16页 |
| ·细胞穿膜肽的结构 | 第16-17页 |
| ·穿膜机制研究 | 第17-18页 |
| ·细胞穿膜肽的应用 | 第18页 |
| ·本课题的立题依据及研究内容 | 第18-20页 |
| ·立题依据 | 第18-19页 |
| ·研究内容 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-39页 |
| ·材料 | 第20-25页 |
| ·细胞、菌株与质粒 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·主要溶液 | 第21-22页 |
| ·试剂 | 第22-24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-39页 |
| ·质粒构建 | 第25-31页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第31-32页 |
| ·蛋白的分离纯化与定量 | 第32-34页 |
| ·SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳及蛋白免疫印迹 | 第34-36页 |
| ·细胞培养 | 第36-37页 |
| ·蛋白活性测定 | 第37-39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-61页 |
| ·重组表达质粒G-rhEGF及GP-EGF的构建 | 第39-42页 |
| ·表达质粒G-rhEGF的构建 | 第39-40页 |
| ·表达质粒GP-EGF的构建 | 第40-42页 |
| ·蛋白表达菌株的筛选 | 第42-44页 |
| ·融合蛋白可溶性表达的发酵条件优化 | 第44-53页 |
| ·发酵培养基的选择 | 第44-47页 |
| ·最适宜的发酵温度 | 第47-49页 |
| ·表达量最高的转速的确定 | 第49-50页 |
| ·诱导剂浓度的选择 | 第50-52页 |
| ·发酵时间的确定 | 第52-53页 |
| ·融合蛋白的分离纯化及Western blot检测 | 第53-57页 |
| ·利用GST柱进行蛋白的初步分离纯化 | 第53-54页 |
| ·融合蛋白融合标签的去除 | 第54-55页 |
| ·离子交换色谱对蛋白的进一步纯化 | 第55-57页 |
| ·重组蛋白的Western blot检测 | 第57页 |
| ·重组蛋白的生物学活性测定 | 第57-61页 |
| ·蛋白的促成纤维细胞增殖作用 | 第57-58页 |
| ·重组蛋白的促成纤维细胞迁移作用 | 第58-59页 |
| ·Pep-1融合表达对EGF的透膜能力影响的分析 | 第59-61页 |
| 4 结论 | 第61-62页 |
| 5 展望 | 第62-63页 |
| 6 参考文献 | 第63-69页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文 | 第69-70页 |
| 8 致谢 | 第70页 |