致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-31页 |
·植物逆境胁迫和应对逆境的方式 | 第11-12页 |
·植物逆境胁迫及其影响 | 第11页 |
·植物应对逆境的方式 | 第11-12页 |
·植物应对非生物胁迫的生理机制 | 第12-14页 |
·直接作用物质 | 第12-13页 |
·渗透调节物质 | 第12页 |
·渗透调节蛋白 | 第12-13页 |
·抗冻蛋白 | 第13页 |
·参与表达调控及信号传导的蛋白 | 第13-14页 |
·CBF/DREB转录因子 | 第13页 |
·蛋白激酶 | 第13-14页 |
·钙信使及钙信号的传导 | 第14-20页 |
·钙调素 | 第14-16页 |
·钙依赖蛋白激酶CDPK | 第16-17页 |
·CBL蛋白及其靶蛋白CIPK | 第17-20页 |
·CBL蛋白 | 第17-19页 |
·CIPK蛋白 | 第19-20页 |
·CBL-CIPK信号系统 | 第20-31页 |
·CBL-CIPK信号网络的作用机制 | 第20-21页 |
·CBL-CIPK信号系统的功能研究 | 第21-28页 |
·CBL-CIPK信号系统与盐胁迫 | 第22-24页 |
·CBL-CIPK信号系统与低钾胁迫 | 第24-26页 |
·CBL-CIPK信号系统与高pH胁迫 | 第26页 |
·CBL-CIPK信号系统与ABA途径 | 第26-27页 |
·CBL-CIPK信号系统的其他功能 | 第27-28页 |
·拟南芥外其它植物CBL-CIPK的功能 | 第28页 |
·CBL-CIPK的基因表达模式 | 第28-29页 |
·CBL-CIPK的亚细胞定位 | 第29-31页 |
2 引言 | 第31-32页 |
3 材料与方法 | 第32-46页 |
·试验材料 | 第32-33页 |
·植物材料和菌株 | 第32页 |
·植物材料 | 第32页 |
·菌株 | 第32页 |
·克隆载体 | 第32页 |
·工具酶及试剂盒 | 第32页 |
·实验仪器 | 第32页 |
·PCR引物 | 第32-33页 |
·培养基 | 第33页 |
·试验方法 | 第33-40页 |
·RNA提取及反转录反应 | 第33-34页 |
·试剂和器皿的准备 | 第34页 |
·总RNA提取(Trizol法) | 第34页 |
·反转录反应(cDNA合成第一条链) | 第34页 |
·目的基因克隆 | 第34-40页 |
·基因克隆的PCR反应 | 第34-35页 |
·RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)法全长扩增 | 第35-38页 |
·PCR产物胶回收 | 第38-39页 |
·目的片段与载体的连接 | 第39页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第39页 |
·PCR产物连接转化 | 第39-40页 |
·大肠杆菌菌液PCR检测 | 第40页 |
·重组质粒提取 | 第40页 |
·Ta CBLs和TaCIPKs基因的生物信息学分析 | 第40-41页 |
·Ta CIPKs基因的表达分析 | 第41-42页 |
·材料的处理 | 第41页 |
·荧光实时定量PCR反应程序 | 第41-42页 |
·荧光实时定量PCR的结果分析 | 第42页 |
·TaCBLs和TaCIPKs的酵母双杂交实验分析 | 第42-46页 |
·酵母双杂交载体和菌株 | 第42页 |
·试剂和培养基 | 第42-43页 |
·目的基因的扩增和酵母双杂交表达载体的构建 | 第43-44页 |
·酵母感受态制备和重组质粒的转化及鉴定 | 第44页 |
·融合蛋白自激活活性的测定 | 第44页 |
·酵母双杂交及其蛋白相互作用的鉴定 | 第44-46页 |
4 结果与分析 | 第46-70页 |
·RNA及cDNA检测 | 第46页 |
·小麦TaCBLs和TaCIPKs基因的全长克隆 | 第46-48页 |
·小麦TaCBLs基因的克隆 | 第46-47页 |
·小麦TaCIPKs基因的克隆 | 第47-48页 |
·小麦TaCBLs和TaCIPKs的生物信息学分析 | 第48-57页 |
·小麦TaCBLs和TaCIPKs的理化性质分析 | 第48页 |
·TaCIPKs蛋白疏水性/亲水性预测与分析 | 第48-49页 |
·TaCIPKs蛋白跨膜结构域预测 | 第49-50页 |
·小麦TaCBLs和TaCIPKs基因的同源性分析 | 第50-52页 |
·TaCBLs基因的同源性分析 | 第50-51页 |
·TaCIPKs基因的同源性分析 | 第51-52页 |
·TaCBLs和TaCIPKs氨基酸序列的功能结构域分析 | 第52-54页 |
·TaCBLs氨基酸序列的功能结构域分析 | 第52页 |
·TaCIPKs氨基酸序列的功能结构域分析 | 第52-54页 |
·TaCIPKs的蛋白磷酸化位点分析 | 第54-55页 |
·小麦TaCIPKs与该家族其它成员间的进化树分析 | 第55-57页 |
·小麦TaCIPKs基因的表达分析 | 第57-64页 |
·融解曲线分析 | 第57-58页 |
·TaCIPKs基因的表达模式分析 | 第58-64页 |
·不同胁迫下TaCIPK9基因的表达模式分析 | 第58-59页 |
·不同胁迫下TaCIPK15基因的表达模式分析 | 第59-61页 |
·不同胁迫下TaCIPK23基因的表达模式分析 | 第61-62页 |
·不同胁迫下TaCIPK31基因的表达模式分析 | 第62-64页 |
·TaCBLs和TaCIPKs蛋白的酵母双杂交实验分析 | 第64-70页 |
·酵母双杂交表达载体的构建及鉴定 | 第64-65页 |
·重组质粒转化及菌液PCR检测 | 第65-66页 |
·融合蛋白自激活活性测定 | 第66-67页 |
·TaCBLs与TaCIPKs相互作用鉴定 | 第67-70页 |
5 结论与讨论 | 第70-73页 |
·Ta CBLs和TaCIPKs基因的克隆 | 第70页 |
·Ta CBLs和TaCIPKs基因的生物信息学分析 | 第70页 |
·TaCBLs和TaCIPKs蛋白的功能位点分析 | 第70-71页 |
·不同胁迫下TaCIPKs基因的表达分析 | 第71页 |
·酵母双杂交法TaCBLs和TaCIPKs基因的互作分析 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-80页 |
abstract | 第80-83页 |
英文缩略表 | 第83页 |