摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
符号说明(Abbreviations) | 第11-13页 |
第一章 绪论 | 第13-32页 |
·前言 | 第13-14页 |
·非核糖体多肽合成酶 | 第14-20页 |
·聚酮合酶 | 第20-24页 |
·NRPS/PKS 及 PKS/NRPS 杂合体系 | 第24-27页 |
·吡啶霉素生物合成研究现况 | 第27-32页 |
·吡啶霉素早期研究 | 第28-29页 |
·吡啶霉素生物合成机制的研究 | 第29-32页 |
第二章 实验材料与方法 | 第32-43页 |
·实验材料 | 第32-37页 |
·菌株 | 第32页 |
·质粒(见表 2.2) | 第32-33页 |
·本研究用到的 PCR 引物及序列 | 第33-34页 |
·培养基和溶液 | 第34-37页 |
·实验方法 | 第37-43页 |
第三章 吡啶霉素合成基因 pyrG 中 A domain 的研究 | 第43-63页 |
·前言 | 第43-44页 |
·PyrG 中两个腺苷化结构域(A-domain)的生物信息学分析 | 第44-48页 |
·A domain 相关四种蛋白表达载体的构建及表达条件摸索 | 第48-51页 |
·A domain 相关蛋白表达载体的构建 | 第48-49页 |
·A domain 相关蛋白表达条件的摸索 | 第49-51页 |
·A domain 相关蛋白纯化及蛋白活性的测定 | 第51-59页 |
·PyrG-A2、PyrG-AT 动力学曲线的测定 | 第59-62页 |
本章小结 | 第62-63页 |
第四章 PyrG 中 KR domain 的体外功能验证 | 第63-85页 |
·前言 | 第63-71页 |
·pyrG-PCP(T)克隆、表达及体外活化 | 第71-75页 |
·pyrG-PCP(T)克隆、表达及纯化 | 第71-72页 |
·sfp 基因表达载体的构建及与 pyrG-T 基因的共表达 | 第72-74页 |
·PyrG-T 蛋白的理论分子量预测及 Q-TOF 验证 | 第74-75页 |
·体外生化反应验证 PyrG-KR 的功能 | 第75-84页 |
·HPLC 及 Q-TOF 验证体外生化反应 | 第75-78页 |
·PyrH 生物信息学分析及体外表达 | 第78-81页 |
·MbtH-like 蛋白辅助 KR 体外功能验证 | 第81-84页 |
本章小结 | 第84-85页 |
第五章 总结与展望 | 第85-88页 |
·本研究工作总结 | 第85-86页 |
·主要创新点 | 第86页 |
·吡啶霉素生物合成机制研究的进一步展望 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-91页 |
致谢 | 第91页 |