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吡啶霉素中NRPS模块PyrG的功能研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
符号说明(Abbreviations)第11-13页
第一章 绪论第13-32页
   ·前言第13-14页
   ·非核糖体多肽合成酶第14-20页
   ·聚酮合酶第20-24页
   ·NRPS/PKS 及 PKS/NRPS 杂合体系第24-27页
   ·吡啶霉素生物合成研究现况第27-32页
     ·吡啶霉素早期研究第28-29页
     ·吡啶霉素生物合成机制的研究第29-32页
第二章 实验材料与方法第32-43页
   ·实验材料第32-37页
     ·菌株第32页
     ·质粒(见表 2.2)第32-33页
     ·本研究用到的 PCR 引物及序列第33-34页
     ·培养基和溶液第34-37页
   ·实验方法第37-43页
第三章 吡啶霉素合成基因 pyrG 中 A domain 的研究第43-63页
   ·前言第43-44页
   ·PyrG 中两个腺苷化结构域(A-domain)的生物信息学分析第44-48页
   ·A domain 相关四种蛋白表达载体的构建及表达条件摸索第48-51页
     ·A domain 相关蛋白表达载体的构建第48-49页
     ·A domain 相关蛋白表达条件的摸索第49-51页
   ·A domain 相关蛋白纯化及蛋白活性的测定第51-59页
   ·PyrG-A2、PyrG-AT 动力学曲线的测定第59-62页
 本章小结第62-63页
第四章 PyrG 中 KR domain 的体外功能验证第63-85页
   ·前言第63-71页
   ·pyrG-PCP(T)克隆、表达及体外活化第71-75页
     ·pyrG-PCP(T)克隆、表达及纯化第71-72页
     ·sfp 基因表达载体的构建及与 pyrG-T 基因的共表达第72-74页
     ·PyrG-T 蛋白的理论分子量预测及 Q-TOF 验证第74-75页
   ·体外生化反应验证 PyrG-KR 的功能第75-84页
     ·HPLC 及 Q-TOF 验证体外生化反应第75-78页
     ·PyrH 生物信息学分析及体外表达第78-81页
     ·MbtH-like 蛋白辅助 KR 体外功能验证第81-84页
 本章小结第84-85页
第五章 总结与展望第85-88页
   ·本研究工作总结第85-86页
   ·主要创新点第86页
   ·吡啶霉素生物合成机制研究的进一步展望第86-88页
参考文献第88-91页
致谢第91页

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