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深海细菌Shewanella piezotolerans WP3双鞭毛系统之间的相互作用

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 前言第8-20页
   ·细菌的鞭毛系统第8-13页
     ·细菌鞭毛的结构第8-9页
     ·细菌鞭毛的类型第9-10页
     ·鞭毛介导的运动第10-11页
     ·鞭毛基因的表达调控第11-12页
     ·鞭毛基因的表达与鞭毛组装的耦合第12-13页
     ·两套鞭毛系统的相互作用第13页
   ·Shewanella piezotolerans WP3的双鞭毛系统第13-18页
     ·Shewanella piezotolerans WP3 简介第13-17页
     ·Shewanella piezotolerans WP3 的鞭毛系统第17-18页
   ·本论文的研究目的和意义第18-20页
第二章 材料与方法第20-34页
   ·材料第20-24页
     ·菌株与质粒第20-21页
     ·引物及探针第21-22页
     ·主要仪器第22页
     ·主要试剂第22-23页
     ·工具酶第23页
     ·试剂盒第23页
     ·常用溶液、培养基第23-24页
   ·方法第24-34页
     ·细菌的培养第24页
     ·细菌运动性检测第24-25页
     ·细菌鞭毛形态观察第25页
     ·细菌总DNA的提取第25页
     ·DNA乙醇沉淀第25页
     ·质粒提取第25页
     ·WP3 总RNA的提取第25-26页
     ·基因组DNA的去除及RNA的纯化第26-27页
     ·RNA的琼脂糖凝胶电泳第27页
     ·PCR反应第27页
     ·菌落PCR第27-28页
     ·琼脂糖凝胶上DNA片段的回收第28页
     ·PCR产物的回收第28页
     ·核酸内切酶酶切反应第28页
     ·连接反应第28页
     ·化学感受态细胞的制备第28-29页
     ·质粒的化学转化第29页
     ·缺失突变载体和突变菌株的构建(双亲杂交)第29-31页
     ·突变体缺失基因的回补第31页
     ·WP3 生长曲线的测定第31-32页
     ·反转录PCR (RT-PCR)第32页
     ·实时定量PCR(Real time PCR)第32-34页
第三章 结果与分析第34-50页
   ·课题的来源,目的及设计思路第34-35页
   ·△flgH1△flgH2 和△flgL1△flgL2 两个双突变体的构建第35-37页
   ·双突变体△flgH1△flgH2,△flgL1△flgL2 中flgH2,flgL2 基因的回补第37-39页
   ·WP3生长曲线的测定第39-41页
   ·WP3各菌株运动性测定第41-43页
   ·WP3各菌株鞭毛的电镜观察第43-45页
   ·WP3各突变体鞭毛基因表达定量第45-47页
   ·交叉双突变体△flgH1△flgL2 的构建第47-48页
   ·交叉双突变体△flgH1△flgL2 的运动性检测第48-50页
第四章 讨论第50-52页
   ·两套鞭毛系统的关系第50页
   ·两套鞭毛系统的温度适应性第50-52页
第五章 结论与展望第52-53页
   ·结论第52页
   ·展望第52-53页
参考文献第53-57页
附录第57-59页
致谢第59-61页

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