摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第一章 前言 | 第8-20页 |
·细菌的鞭毛系统 | 第8-13页 |
·细菌鞭毛的结构 | 第8-9页 |
·细菌鞭毛的类型 | 第9-10页 |
·鞭毛介导的运动 | 第10-11页 |
·鞭毛基因的表达调控 | 第11-12页 |
·鞭毛基因的表达与鞭毛组装的耦合 | 第12-13页 |
·两套鞭毛系统的相互作用 | 第13页 |
·Shewanella piezotolerans WP3的双鞭毛系统 | 第13-18页 |
·Shewanella piezotolerans WP3 简介 | 第13-17页 |
·Shewanella piezotolerans WP3 的鞭毛系统 | 第17-18页 |
·本论文的研究目的和意义 | 第18-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-34页 |
·材料 | 第20-24页 |
·菌株与质粒 | 第20-21页 |
·引物及探针 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22-23页 |
·工具酶 | 第23页 |
·试剂盒 | 第23页 |
·常用溶液、培养基 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-34页 |
·细菌的培养 | 第24页 |
·细菌运动性检测 | 第24-25页 |
·细菌鞭毛形态观察 | 第25页 |
·细菌总DNA的提取 | 第25页 |
·DNA乙醇沉淀 | 第25页 |
·质粒提取 | 第25页 |
·WP3 总RNA的提取 | 第25-26页 |
·基因组DNA的去除及RNA的纯化 | 第26-27页 |
·RNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
·PCR反应 | 第27页 |
·菌落PCR | 第27-28页 |
·琼脂糖凝胶上DNA片段的回收 | 第28页 |
·PCR产物的回收 | 第28页 |
·核酸内切酶酶切反应 | 第28页 |
·连接反应 | 第28页 |
·化学感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
·质粒的化学转化 | 第29页 |
·缺失突变载体和突变菌株的构建(双亲杂交) | 第29-31页 |
·突变体缺失基因的回补 | 第31页 |
·WP3 生长曲线的测定 | 第31-32页 |
·反转录PCR (RT-PCR) | 第32页 |
·实时定量PCR(Real time PCR) | 第32-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-50页 |
·课题的来源,目的及设计思路 | 第34-35页 |
·△flgH1△flgH2 和△flgL1△flgL2 两个双突变体的构建 | 第35-37页 |
·双突变体△flgH1△flgH2,△flgL1△flgL2 中flgH2,flgL2 基因的回补 | 第37-39页 |
·WP3生长曲线的测定 | 第39-41页 |
·WP3各菌株运动性测定 | 第41-43页 |
·WP3各菌株鞭毛的电镜观察 | 第43-45页 |
·WP3各突变体鞭毛基因表达定量 | 第45-47页 |
·交叉双突变体△flgH1△flgL2 的构建 | 第47-48页 |
·交叉双突变体△flgH1△flgL2 的运动性检测 | 第48-50页 |
第四章 讨论 | 第50-52页 |
·两套鞭毛系统的关系 | 第50页 |
·两套鞭毛系统的温度适应性 | 第50-52页 |
第五章 结论与展望 | 第52-53页 |
·结论 | 第52页 |
·展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
附录 | 第57-59页 |
致谢 | 第59-61页 |