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南方水稻黑条矮缩病的监测及其病原病毒Pns6与寄主水稻的互作

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
1 前言第12-30页
   ·南方水稻黑条矮缩病毒的研究进展第13-24页
     ·病害症状及流行概况第13-15页
     ·粒体形态和分类地位第15页
     ·基因组结构和功能第15-18页
     ·寄主植物和传毒介体第18页
     ·介体的传毒机制第18-20页
     ·SRBSDV 与寄主的互作研究第20-21页
     ·其它几种流行的水稻病毒病概述第21-24页
   ·本研究中用到的关键技术体系第24-28页
     ·酵母双杂交技术第24-26页
     ·双分子荧光互补技术第26-27页
     ·实时定量 PCR 技术第27-28页
   ·本研究的目的和意义第28-30页
2 南方水稻黑条矮缩病的流行调查和检测第30-44页
 提要第30页
 1 材料与方法第30-34页
   ·材料第30-31页
   ·方法第31-34页
 2 结果与分析第34-42页
   ·病毒 dsRNA 基因组的提取和应用第34-36页
   ·2009-2012 年湖北省水稻病毒病的监测第36-38页
   ·2009-2012 年福建省水稻病毒病的监测第38-41页
   ·其它省份水稻病毒病检测第41-42页
 3 小结与讨论第42-44页
3 SRBSDV 湖北分离物的测定及病毒基因的亚细胞定位第44-59页
 提要第44页
 1 材料与方法第44-51页
   ·材料第44页
   ·方法第44-51页
 2 结果与分析第51-58页
   ·SRBSDV 湖北分离物的序列测定第51-52页
   ·SRBSDV 湖北分离物的序列分析第52-53页
   ·病毒基因植物表达载体 pEarleyGate101 的构建第53-54页
   ·病毒基因在本氏烟细胞中的定位第54-58页
 3 小结与讨论第58-59页
4 SRBSDV 在寄主水稻体内的动态变化第59-75页
 提要第59页
 1 材料与方法第59-64页
   ·材料第59页
   ·方法第59-64页
 2 结果与分析第64-74页
   ·样品总 RNA 的质量检测第64页
   ·实时定量引物扩增效率检测第64-68页
   ·SRBSDV 在感病水稻不同生育期各组织的动态变化第68-69页
   ·水稻幼苗接种 SRBSDV 后 30 天内的病毒动态变化第69-71页
   ·SRBSDV 在水稻组织内的分布第71-72页
   ·水稻种子带毒情况分析第72-74页
 3 小结与讨论第74-75页
5 利用酵母双杂交系统筛选水稻 cDNA 文库第75-84页
 提要第75页
 1 材料与方法第75-78页
   ·材料第75-76页
   ·方法第76-78页
 2 结果与分析第78-82页
   ·文库质量的检测第78-79页
   ·文库筛选初步结果第79页
   ·文库质粒插入片段的 PCR 鉴定第79-80页
   ·文库质粒插入片段的测定及同源性分析第80-82页
 3 小结与讨论第82-84页
6 SRBSDV Pns6 与水稻蛋白互作的进一步验证第84-99页
 提要第84页
 1 材料和方法第84-89页
   ·材料第84-86页
   ·材料第86-89页
 2 结果与分析第89-95页
   ·互作蛋白全长基因的克隆第89-90页
   ·互作蛋白全长基因酵母表达载体的构建第90-91页
   ·互作蛋白全长与 Pns6 的酵母互作第91-92页
   ·互作蛋白全长 BiFC 表达载体的构建第92-93页
   ·双分子荧光互补验证 Pns6 与水稻蛋白的互作第93-95页
   ·互作水稻蛋白的表达量检测第95页
 3 小结与讨论第95-99页
7 OseEF1A 与 SRBSDV Pns6 等病毒基因的互作研究第99-113页
 提要第99页
 1 材料和方法第99-104页
   ·材料第99-100页
   ·方法第100-104页
 2 结果与分析第104-111页
   ·OseEF1A 与 SRBSDV 非结构蛋白的酵母互作第104页
   ·SRBSDV Pns6 与病毒非结构蛋白的酵母互作第104-105页
   ·OseEF1A 与 Pns6、Pns91 的共定位分析第105-106页
   ·OseEF1A 与其它水稻 dsRNA 病毒非结构蛋白的互作第106-108页
   ·OseEF1A 与 Tenuivirus 病毒蛋白的酵母互作第108-110页
   ·eEF1A 与 2 种双生病毒蛋白的酵母互作第110-111页
 3 小结与讨论第111-113页
参考文献第113-126页
附录第126-128页
致谢第128页

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