| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-15页 |
| 第一节 HBV概述 | 第10-14页 |
| ·HBV的发现过程及其种属归类 | 第10-11页 |
| ·HBV的血清型和基因型 | 第11-12页 |
| ·HBV的基因组结构及其转录调控 | 第12-14页 |
| 第二节 HBV感染模型及其研究意义 | 第14-15页 |
| 第二章 实验材料与实验方法 | 第15-40页 |
| 第一节 树鼩的饲养 | 第15-16页 |
| 第二节 PTH的分离纯化与培养 | 第16-28页 |
| ·灌注用手术器械等实验器材的准备 | 第16页 |
| ·灌注母液的配置 | 第16页 |
| ·PTH贴壁培养基配方 | 第16-17页 |
| ·PTH维持培养基配方 | 第17页 |
| ·用大鼠鼠尾Ⅰ型胶原包被细胞培养皿 | 第17-18页 |
| ·两步法PTH灌注流程 | 第18-23页 |
| ·树鼩肝星状细胞的分离和培养 | 第23-24页 |
| ·细胞冻存与复苏 | 第24-25页 |
| ·树鼩原代成纤维细胞的分离和培养 | 第25-26页 |
| ·PTH或者Huh7与HSC或者PTF细胞的共同培养 | 第26-28页 |
| 第三节 HBV,HDV和WMHBV的制备 | 第28-36页 |
| ·从病人血清中超速离心纯化HBV | 第28-29页 |
| ·Huh7细胞的培养 | 第29-30页 |
| ·用脂质体转染的方法从Huh7细胞中制备HDV | 第30-31页 |
| ·用脂质体转染的方法从Huh7细胞中制备HBV或者WMHBV | 第31-32页 |
| ·HDV的浓缩与纯化方式介绍 | 第32-33页 |
| ·确定HDV的浓度 | 第33-36页 |
| 第四节 三种病毒对PTH的侵染和侵染标志物的检测 | 第36-40页 |
| ·HBV侵染PTH实验简介 | 第36页 |
| ·HDV和WMHBV侵染PTH实验简介 | 第36页 |
| ·ELISA检测HBsAg或者HBeAg | 第36-37页 |
| ·检测PTH内病毒RNA的表达 | 第37页 |
| ·用免疫荧光染色研究PTH内病毒蛋白的表达情况 | 第37-38页 |
| ·用免疫印迹法研究PTH内特定蛋白的表达 | 第38-40页 |
| 第三章 实验结果与分析讨论 | 第40-77页 |
| 第一节 PTH的分离与培养 | 第40-56页 |
| ·PTH分离的结果与讨论 | 第40-41页 |
| ·PTH培养的细胞状态和功能 | 第41-45页 |
| ·PTH对三种病毒的感染结果分析 | 第45-50页 |
| ·PTH体外感染模型的条件优化 | 第50-54页 |
| ·PTH体外感染模型建立的意义 | 第54-55页 |
| ·HBV,HDV和WMHBV共同功能性受体的发现,确定和意义 | 第55-56页 |
| 第二节 RTK-PI3K-AKT信号转导途径对病毒感染的作用 | 第56-66页 |
| ·EGFR和HGFR参与了HBV早期入侵的过程 | 第56-58页 |
| ·磷脂酰肌醇3激酶也参与了HBV早期入侵的过程 | 第58-62页 |
| ·蛋白激酶B也参与了HBV早期入侵的过程 | 第62-63页 |
| ·RTK-PI3K-AKT信号转导途径参与HBV入侵的机理探讨 | 第63-66页 |
| 第三节 探索HBV入侵所需的相关蛋白 | 第66-74页 |
| ·用免疫共沉淀的方法寻找HBV受体的介绍 | 第66页 |
| ·表达纯化和修饰饵蛋白 | 第66-68页 |
| ·紫外光激活的共价交联手段的运用 | 第68-71页 |
| ·运用光激活的共价交联手段进行亲和纯化的经验总结 | 第71页 |
| ·将preS1-mFc表达质粒转染到PTH后用Fc亲和纯化 | 第71-74页 |
| 第四节 建立人NTCP的转基因小鼠模型 | 第74-77页 |
| 小结 | 第77-78页 |
| 附录 | 第78-81页 |
| 中英文对照表 | 第78-80页 |
| 59-RBD-his蛋白序列 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-90页 |
| 论文发表和专利申请 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
