| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 图表目录 | 第10-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-24页 |
| ·猪瘟病毒概述 | 第12-15页 |
| ·猪瘟病毒 | 第12页 |
| ·猪瘟病毒蛋白结构及功能 | 第12-15页 |
| ·eEF1A蛋白的结构和功能 | 第15-17页 |
| ·eEF1复合物的结构与功能 | 第15-16页 |
| ·eEF1A的结构 | 第16页 |
| ·eEF1A的功能 | 第16-17页 |
| ·eEF1A与病毒相互作用的研究进展 | 第17页 |
| ·蛋白相作的研究方法 | 第17-21页 |
| ·离体研究方法 | 第17-19页 |
| ·基于细胞的研究方法 | 第19-20页 |
| ·基于成像的研究方法 | 第20-21页 |
| ·蛋白组学研究方法 | 第21页 |
| ·生物信息学研究方法 | 第21页 |
| ·慢病毒表达系统 | 第21-22页 |
| ·双荧光素酶报告系统 | 第22-23页 |
| ·研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 eEF1A蛋白与CSFV NS5A蛋白相互作用及其对猪瘟病毒的抑制作用研究 | 第24-40页 |
| ·材料和方法 | 第24-32页 |
| ·细胞、菌株、载体和毒株 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·基因扩增与克隆 | 第24-26页 |
| ·PBMC cDNA文库的制备 | 第26-27页 |
| ·酵母双杂交筛选与NS5A相互作用的蛋白 | 第27-28页 |
| ·eEF1A与NS5A的酵母共转化试验 | 第28页 |
| ·NS5A的原核表达及纯化 | 第28页 |
| ·细胞的转染及蛋白的真核表达 | 第28-29页 |
| ·GST pulldown试验 | 第29页 |
| ·免疫共沉淀试验 | 第29页 |
| ·截短表达的eEF1A与NS5A的免疫共沉淀试验 | 第29-30页 |
| ·上调eEF1A表达的PK-15细胞系的构建 | 第30页 |
| ·上调eEF1A的表达对CSFV增殖的影响 | 第30页 |
| ·CSFV感染对eEF1A表达的影响 | 第30-31页 |
| ·CSFV IRES双荧光素酶报告系统试验 | 第31页 |
| ·Western blot检测 | 第31页 |
| ·荧光定量RT-PCR | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-37页 |
| ·酵母双杂交筛选与NS5A相互作用的宿主蛋白 | 第32页 |
| ·酵母共转化验证eEF1A与NS5A的相互作用 | 第32-33页 |
| ·GST pulldown验证eEF1A与NS5A的相互作用 | 第33页 |
| ·免疫共沉淀试验验证eEF1A与NS5A的相互作用 | 第33-34页 |
| ·eEF1A结构域I的N端是与NS5A相互作用的关键区域 | 第34-35页 |
| ·上调eEF1A表达抑制CSFV的增殖 | 第35-36页 |
| ·CSFV感染诱导eEF1A的表达上调 | 第36页 |
| ·eEF1A抑制CSFV IRES的活性 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| 第三章 全文结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简历 | 第49页 |
