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绿豆NBS-LRR类抗病基因克隆及其表达研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 文献综述第11-20页
   ·绿豆的研究进展第11-13页
     ·绿豆种质资源研究进展及优势品种筛选第11-12页
     ·主要农艺性状研究进展第12页
     ·绿豆相关基因克隆研究进展第12-13页
     ·国内外绿豆未舰究发展方向第13页
   ·抗病基因研究进展第13-16页
     ·植物抗病相关基因第13-14页
     ·植物抗病基因作用机理第14-15页
     ·植物抗病基因的克隆方法第15-16页
   ·转基因大豆研究进展第16-19页
     ·大豆转基因方法研究进展第16-18页
     ·大豆转基因中所用的标记基因第18-19页
   ·本研究的目的和意义第19-20页
2 材料和方法第20-30页
   ·试验材料第20-21页
     ·植物材料第20页
     ·菌株及质粒第20页
     ·酶及试剂盒第20页
     ·仪器第20页
     ·微生物培养基及溶液的配制第20页
     ·烟草叶盘法转化再生培养培养基第20页
     ·烟草转化培养基第20-21页
     ·大豆遗传转化的培养基配方第21页
   ·试验方法第21-30页
     ·绿豆NBS-LRR类抗病基因同源序列的克隆第21-25页
     ·真核表达载体的构建第25-27页
     ·植物表达载体转化农杆菌第27页
     ·转基因烟草的获得及阳性植株的分子检测第27-28页
     ·转基因大豆的获得及阳性植株的分子检测第28-30页
3 结果与分析第30-47页
   ·绿豆NBS-LRR类抗病基因的克隆及分析第30-31页
   ·绿豆RGAs的生物信息学分析第31-38页
     ·绿豆RGAs的核苷酸序列分析第31-33页
     ·绿豆RGAs的氨基酸序列分析第33-36页
     ·绿豆RGAs的氨基酸序列与其他抗病基因及同源序列同源性分析第36-38页
   ·植物表达载体pFGC5941-FGV-1的构建第38页
   ·农杆菌中目的基因FGV-1的PCR鉴定第38-39页
   ·植物表达载体pFGC5941-FGV-1的烟草遗传转化第39-40页
   ·转基因烟草阳性植株的检测第40-41页
     ·转基因烟草阳性植株的PCR检测第40页
     ·转基因烟草阳性植株的抗除草剂检测第40页
     ·转基因烟草阳性植株的抗病性检测第40-41页
   ·植物表达载体pFGC5941-FGV-1的大豆遗传转化第41-43页
   ·转基因大豆阳性植株的检测第43-47页
     ·转基因大豆阳性植株PCR检测第43-44页
     ·转基因大豆阳性植株的RT-PCR分析第44-45页
     ·转基因大豆阳性植株抗除草剂检测第45-46页
     ·转基因大豆阳性植株抗病性检测第46-47页
4 讨论与结论第47-50页
   ·讨论第47-48页
     ·绿豆NBS-LRR类抗病基因同源序列的克隆与分析第47页
     ·植物表达载体的构建第47-48页
     ·农杆菌介导的大豆遗传转化方法第48页
     ·转基因植株的获得及抗病试验病原菌接种方式的选择第48页
   ·结论第48-49页
   ·本文创新点第49-50页
参考文献第50-59页
附录第59-69页
 附录Ⅰ 试验所用部分试剂配方第59-62页
 附录Ⅱ Genbank登陆序列第62-68页
 附录Ⅲ 缩略词第68-69页
致谢第69页

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