| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 缩略语中英文对照(Abbreviation) | 第15-17页 |
| 第一篇 文献综述 | 第17-51页 |
| 第一章 脂肪细胞分化及信号调控 | 第17-39页 |
| 1 脂肪细胞的起源 | 第17-18页 |
| 2 脂肪细胞的分化过程 | 第18-19页 |
| 3 脂肪细胞分化过程中的关键转录因子 | 第19-22页 |
| ·C/EBPs | 第20-21页 |
| ·PPARγ | 第21页 |
| ·SREBP1c | 第21-22页 |
| ·KLFs | 第22页 |
| 4 脂肪细胞分化过程中的信号通路 | 第22-32页 |
| ·Wnt信号通路 | 第23-24页 |
| ·TGFβ/BMPs信号通路 | 第24-25页 |
| ·胰岛素与IGF1信号通路 | 第25页 |
| ·FGF信号通路 | 第25-26页 |
| ·Notch信号通路 | 第26-27页 |
| ·DLK/PREF1信号通路 | 第27页 |
| ·MAPK信号通路 | 第27-28页 |
| ·SHH信号通路 | 第28-29页 |
| ·其它调控 | 第29-32页 |
| 参考文献 | 第32-39页 |
| 第二章 去分化脂肪细胞的研究进展 | 第39-45页 |
| 1 DFAT细胞的获得 | 第39-40页 |
| 2 DFAT细胞在成脂分化中的优势 | 第40页 |
| 3 DFAT细胞的多能性 | 第40-41页 |
| 4 DFAT细胞与成熟脂肪细胞、MSCs细胞、iPS细胞的比较 | 第41-42页 |
| 5 总结与展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 第三章 不同部位脂肪差异的研究 | 第45-51页 |
| 1 内脏脂肪与皮下脂肪在人、小鼠中的差异研究 | 第45-46页 |
| 2 动物生产中不同部位脂肪组织的差异研究 | 第46-47页 |
| 3 脂肪细胞的异质性 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第二篇 实验部分 | 第51-107页 |
| 第四章 二花脸猪皮下脂肪与肌内脂肪表达谱芯片分析 | 第51-61页 |
| 1 实验方法 | 第51-52页 |
| ·实验动物及样品采集 | 第51页 |
| ·RNA提取 | 第51-52页 |
| ·基因芯片分析 | 第52页 |
| ·RT-qPCR | 第52页 |
| ·数据统计 | 第52页 |
| 2 实验结果 | 第52-58页 |
| ·差异表达的基因 | 第52-53页 |
| ·差异基因的GO与KEGG分析 | 第53-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 第五章 “天花板”法获取去分化的肌内脂肪细胞 | 第61-71页 |
| 1 实验方法 | 第61-64页 |
| ·实验动物及样品采集 | 第61页 |
| ·细胞分离 | 第61-62页 |
| ·原代细胞培养 | 第62页 |
| ·细胞的传代培养与冻存 | 第62页 |
| ·细胞增殖检测 | 第62页 |
| ·RNA提取 | 第62页 |
| ·RT-qRCR | 第62-63页 |
| ·油红O染色 | 第63页 |
| ·去分化肌内脂肪细胞的成脂诱导 | 第63页 |
| ·数据统计 | 第63-64页 |
| 2 实验结果 | 第64页 |
| ·成熟肌内脂肪细胞的获得与自动去分化 | 第64页 |
| ·后代细胞的生长曲线与成脂分化 | 第64-67页 |
| ·DEX、INS与IBMX对后代细胞成脂分化能力的影响 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 第六章 miR-130a通过靶向调控PPARγ的表达来影响脂肪在皮下脂肪组织与肌内脂肪组织中的沉积 | 第71-83页 |
| 1 实验方法 | 第71-75页 |
| ·实验动物及样品采集 | 第71页 |
| ·mRNA的提取 | 第71页 |
| ·RT-qPCR | 第71-72页 |
| ·Werstern Blot | 第72-73页 |
| ·miRNA预测 | 第73页 |
| ·miRNA的RT-qPCR | 第73-74页 |
| ·质粒构建 | 第74页 |
| ·miRNA靶向性验证 | 第74页 |
| ·mimic超表达 | 第74-75页 |
| ·油红O染色 | 第75页 |
| ·数据统计 | 第75页 |
| 2 实验结果 | 第75-79页 |
| ·PPARγ表达量的比较 | 第75-76页 |
| ·miRNA的表达水平比较 | 第76-77页 |
| ·miRNA靶向性验证 | 第77页 |
| ·miR-130a对肌内DFAT细胞成脂分化的影响 | 第77-79页 |
| 3 讨论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 第七章 Myostatin对肌内DFAT细胞增殖、成脂分化能力以及对肌内脂肪脂解作用的影响 | 第83-99页 |
| 1 实验方法 | 第84-85页 |
| ·肌肉组织培养液的获得 | 第84页 |
| ·细胞增殖检测 | 第84页 |
| ·DFAT细胞的成脂诱导 | 第84页 |
| ·油红O染色 | 第84页 |
| ·RT-qPCR | 第84-85页 |
| ·脂解能力检测 | 第85页 |
| ·背最长肌与血清的采集 | 第85页 |
| ·肌内脂肪含量的测量 | 第85-87页 |
| ·MSTN的ELISA检测 | 第86页 |
| ·数据统计 | 第86-87页 |
| 2 实验结果 | 第87-94页 |
| ·肌肉组织培养液对成脂分化的影响 | 第87-88页 |
| ·MSTN对肌内DFAT细胞增殖的影响 | 第88-89页 |
| ·MSTN对成脂分化的影响 | 第89-92页 |
| ·MSTN对脂肪分解的影响 | 第92页 |
| ·MSTN mRNA表达量对肌内脂肪含量的影响 | 第92-93页 |
| ·血清中MSTN蛋白含量对猪肌内脂肪含量的影响 | 第93-94页 |
| 3 讨论 | 第94-97页 |
| 参考文献 | 第97-99页 |
| 第八章 SRC-2对肌内DFAT细胞成脂分化的影响 | 第99-107页 |
| 1 实验方法 | 第99-100页 |
| ·SRC-2干扰链的设计 | 第99页 |
| ·siRNA转染条件的确定 | 第99-100页 |
| ·siRNA转染肌内DFAT细胞 | 第100页 |
| ·肌内DFAT细胞成脂诱导 | 第100页 |
| ·油红O染色 | 第100页 |
| ·mRNA提取与RT-qPCR | 第100页 |
| ·数据统计 | 第100页 |
| 2 实验结果 | 第100-104页 |
| ·SRC-2在脂肪分化过程中的时序表达 | 第100-102页 |
| ·siRNA转染条件的确定 | 第102页 |
| ·干扰效率的检测 | 第102-103页 |
| ·SRC-2对肌内DFAT细胞成脂分化的影响 | 第103-104页 |
| 3 讨论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-107页 |
| 全文结论 | 第107-109页 |
| 创新点 | 第109-111页 |
| 附录 | 第111-129页 |
| 附录一 文章所用的定量引物序列 | 第111-113页 |
| 附录二 在皮下脂肪中高表达的基因 | 第113-120页 |
| 附录三 在肌内脂肪中高表达的基因 | 第120-125页 |
| 附录四 试剂、仪器与溶液 | 第125-129页 |
| 致谢 | 第129-131页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第131页 |
