| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 縮略语 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1 胸腺五肽 | 第11-12页 |
| ·胸腺五肽来源 | 第11页 |
| ·氨基酸序列 | 第11-12页 |
| ·生物活性及其应用 | 第12页 |
| ·代谢特点 | 第12页 |
| 2 多肽和蛋白药物的PEG修饰 | 第12-22页 |
| ·MPEG修饰药物的优势及其应用 | 第13-14页 |
| ·PEG的结构与基本生物学性质 | 第14页 |
| ·MPEG修饰反应的化学基础 | 第14-17页 |
| ·修饰氨基 | 第15-16页 |
| ·修饰羧基 | 第16-17页 |
| ·修饰巯基 | 第17页 |
| ·PEG修饰蛋白多肽的反应类型 | 第17-18页 |
| ·液相反应 | 第17页 |
| ·固相反应 | 第17-18页 |
| ·PEG修饰蛋白多肽的反应方案设计 | 第18-19页 |
| ·选择合适旳PEG修饰剂 | 第19页 |
| ·修饰反应条件的优化 | 第19页 |
| ·PEG修饰蛋白多肽的分析方法 | 第19-21页 |
| ·高效液相色谱法 | 第20页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳法 | 第20页 |
| ·圆二色光谱(CD)和荧光光谱分析 | 第20页 |
| ·质谱(MS)分析 | 第20-21页 |
| ·PEG修饰蛋白多肽的分离纯化 | 第21-22页 |
| ·尺寸排阻色谱法 | 第21页 |
| ·离子交换层析色谱法 | 第21-22页 |
| ·反相色谱和疏水层析 | 第22页 |
| ·亲和层析色谱法 | 第22页 |
| 3 本课题的研究目的和研究内容 | 第22-25页 |
| ·研究目的 | 第22-23页 |
| ·研究内容 | 第23-25页 |
| ·修饰条件优化 | 第23页 |
| ·分离纯化 | 第23页 |
| ·产物表征及药物活性 | 第23-25页 |
| 第二章 MPEG对TP5的修饰 | 第25-49页 |
| 1 引言 | 第25-27页 |
| ·修饰反应试验设计 | 第25-27页 |
| ·修饰反应流程 | 第27页 |
| 2 材料与仪器 | 第27-28页 |
| ·主要材料 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| 3 实验方法 | 第28-32页 |
| ·检测方法 | 第28-29页 |
| ·建立反相高效液相(RP-HPLC)检测TP5浓度的方法 | 第28-29页 |
| ·RP-HPLC分析修饰产物组成 | 第29页 |
| ·MPEG修饰胸腺五肽(TP5)实验 | 第29-32页 |
| ·主要溶液配制 | 第29页 |
| ·mPEG修饰胸腺五肽(TP5)反应动力学研究 | 第29-30页 |
| ·胸腺五肽与修饰剂摩尔比对修饰反应的影响 | 第30页 |
| ·反应缓冲溶液pH值对修饰反应的影响 | 第30-31页 |
| ·正交试验优化反应工艺 | 第31-32页 |
| 4 实验结果 | 第32-45页 |
| ·反相高效液相(RP-HPLC)检测TP5浓度 | 第32-37页 |
| ·RP-HPLC法标准曲线 | 第32-33页 |
| ·精密度试验结果 | 第33页 |
| ·回收率试验 | 第33页 |
| ·RP-HPLC法分析修饰粗产物各成分比例 | 第33-37页 |
| ·MPEG修饰TP5工艺优化 | 第37-45页 |
| ·修饰反应动力学考察 | 第37-39页 |
| ·胸腺五狀与修饰剂摩尔比对修饰反应的影响 | 第39-41页 |
| ·反应缓冲溶液pH值对修饰反应的影响 | 第41-42页 |
| ·正交试验 | 第42-45页 |
| 5 小结 | 第45-46页 |
| ·反相高效液相(RP-HPLC)检测TP5浓度 | 第45页 |
| ·修饰反应动力学研究 | 第45页 |
| ·MPEG-BUTYRALD修饰TP5反应的单因素影响考察 | 第45-46页 |
| ·MPEG-SPA修饰TP5反应的单因素影响考察 | 第46页 |
| ·MPEG修饰TP5反应的正交试验 | 第46页 |
| 6 讨论 | 第46-49页 |
| ·采用反相高效液相法(RP-HPLC)检测修饰产物组成 | 第46-47页 |
| ·MPEG修饰TP5反应的正交试验 | 第47-49页 |
| 第三章 修饰产物的分离纯化 | 第49-59页 |
| 1 引言 | 第49-51页 |
| ·修饰产物分离纯化试验设计 | 第49-50页 |
| ·修饰产物的分离纯化流程 | 第50-51页 |
| 2 材料与仪器 | 第51-52页 |
| ·主要材料 | 第51页 |
| ·仪器 | 第51-52页 |
| 3 实验方法 | 第52-53页 |
| ·主要溶液配制 | 第52页 |
| ·SP SEPHAROSE FAST FLOW柱料起始缓冲液PH值选择 | 第52-53页 |
| ·SP SEPHAROSE FAST FLOW离子交换层析法分离修饰产物 | 第53页 |
| ·除盐冷冻干燥 | 第53页 |
| ·RP-HPLC纯度检测 | 第53页 |
| 4 实验结果 | 第53-57页 |
| ·SP SEPHAROSE FAST FLOW离子交换层析柱料缓冲液起始PH值选择 | 第53-54页 |
| ·SP SEPHAROSE FAST FLOW离子交换层析法分离修饰产物 | 第54-56页 |
| ·mPEG-ButyrALD修饰TP5粗产物分离纯化 | 第54-55页 |
| ·mPEG-SPA修饰TP5粗产物分离纯化 | 第55-56页 |
| ·RP-HPLC法分析单修饰产物纯度 | 第56-57页 |
| 5 小结 | 第57页 |
| ·离子交换层析柱料起始PH值的选择 | 第57页 |
| ·SP SEPHAROSE FAST FLOW离子交换层析法用于分离修饰产物 | 第57页 |
| 6 讨论 | 第57-59页 |
| ·选择MPEG修饰粗产物分离纯化方法 | 第57-58页 |
| ·MPEG-SPA-TP5同时出现在峰②和峰③中 | 第58-59页 |
| 第四章 修饰产物的表征 | 第59-67页 |
| 1 引言 | 第59-60页 |
| ·MALDI-TOF-MS分析产物分子量分布 | 第59页 |
| ·酶解稳定性分析 | 第59页 |
| ·体内促免疫效果验证 | 第59-60页 |
| 2 材料与仪器 | 第60-61页 |
| ·主要材料 | 第60页 |
| ·主要仪器 | 第60-61页 |
| ·实验动物 | 第61页 |
| 3. 实验方法 | 第61-62页 |
| ·基质辅助激光解吸时间飞行质谱(MALDI-TOF-MS)分析分子量 | 第61页 |
| ·体外酶解稳定性 | 第61页 |
| ·体内促免疫效果研究(动物实验) | 第61-62页 |
| 4 实验结果 | 第62-65页 |
| ·质谱侧当分子量 | 第62-63页 |
| ·修饰产物体外耐酶解稳定性研究 | 第63页 |
| ·药物活性 | 第63-65页 |
| 5 小结 | 第65页 |
| ·单修饰产物分子量 | 第65页 |
| ·耐酶解稳定性 | 第65页 |
| ·单修饰产物促免疫活性 | 第65页 |
| 6 讨论 | 第65-67页 |
| ·MALDI-TOF来检测其分子量 | 第65页 |
| ·酶解稳定性的初步考察 | 第65-66页 |
| ·修饰对整体药效的影响 | 第66-67页 |
| 全文总结及展望 | 第67-69页 |
| 创新点 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 论文发表情况 | 第79页 |
