| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-19页 |
| 1. 干扰素概述 | 第11页 |
| 2. B干扰素研究概况 | 第11-12页 |
| ·p干扰素概述 | 第11页 |
| ·p干扰素的应用 | 第11-12页 |
| ·p干扰素的研发现状 | 第12页 |
| 3. 蛋白质的长效化修饰 | 第12-14页 |
| ·蛋白质的多聚唾液酸修饰 | 第12-13页 |
| ·蛋白质的XTEN修饰 | 第13页 |
| ·p干扰素的长效化修饰 | 第13-14页 |
| 4. 细胞自噬 | 第14-19页 |
| ·细胞自噬与微生物感染 | 第14页 |
| ·细胞自噬与肿瘤治疗 | 第14-15页 |
| ·细胞自噬的发生发展 | 第15-16页 |
| ·细胞自噬的研究方法 | 第16-17页 |
| ·干扰素与细胞自噬 | 第17-19页 |
| 第一章 重组人B干扰素大肠杆菌工程菌的构建、表达、纯化及长效化修饰的初步研究 | 第19-39页 |
| 摘要 | 第19页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| ·LB培养基 | 第19页 |
| ·酶和载体 | 第19页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-24页 |
| ·重组人β干扰素Ser~(17)目的基因的克隆 | 第20页 |
| ·连接片段的制备及鉴定 | 第20页 |
| ·重组人β干扰素Ser~(17)表达载体的构建 | 第20-21页 |
| ·连接产物的转化及阳性转化子的鉴定 | 第21页 |
| ·阳性转化子的诱导表达 | 第21页 |
| ·重组人β干扰素Ser~(17)的纯化 | 第21-22页 |
| ·重组人β干扰素Ser~(17)的检定 | 第22页 |
| ·多聚唾液酸的活化 | 第22-23页 |
| ·多聚唾液酸修饰β干扰素的反应 | 第23页 |
| ·XTEN修饰β干扰素 | 第23-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-36页 |
| ·重组人β干扰素Ser~(17)目的基因PCR克隆的鉴定 | 第24页 |
| ·连接产物的双酶切鉴定 | 第24-25页 |
| ·重组人β干扰素Ser~(17)表达载体的双酶切鉴定 | 第25-26页 |
| ·阳性转化子的诱导表达结果 | 第26-27页 |
| ·重组人β干扰素Ser~(17)的纯化 | 第27-30页 |
| ·重组人β干扰素Ser~(17)的鉴定 | 第30-31页 |
| ·β干扰素的多聚唾液酸修饰 | 第31-32页 |
| ·β干扰素-XTEN融合蛋白目的基因PCR克隆的鉴定 | 第32-33页 |
| ·连接产物的双酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·β干扰素-XTEN表达载体的双酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·阳性转化子的诱导表达 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-39页 |
| 第二章 细胞自噬在重组人B干扰素治疗恶性神经胶质瘤中的作用及机制研究 | 第39-73页 |
| 摘要 | 第39页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·细胞 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·试剂和材料 | 第39-40页 |
| ·抗体 | 第40页 |
| ·siRNA | 第40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-42页 |
| ·细胞增殖实验 | 第40页 |
| ·激光共聚焦分析 | 第40-41页 |
| ·电子显微镜分析 | 第41页 |
| ·蛋白质印记实验 | 第41页 |
| ·流式细胞实验 | 第41页 |
| ·RNA干扰实验 | 第41-42页 |
| ·统计分析 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-70页 |
| ·重组人β干扰素对人神经胶质瘤细胞的生长抑制情况研究 | 第42-44页 |
| ·细胞自噬抑制剂3-MA和氯喹对人神经胶质瘤细胞的生长抑制情况研究 | 第44-47页 |
| ·重组人β干扰素诱导人神经胶质瘤细胞发生细胞自噬 | 第47-50页 |
| ·抑制细胞自噬对β干扰素引起人神经胶质瘤细胞生长抑制的影响 | 第50-54页 |
| ·抑制细胞自噬对β干扰素引起的人神经胶质瘤细胞凋亡的影响 | 第54-60页 |
| ·抑制细胞凋亡对β干扰素诱导的人神经胶质瘤细胞自噬的影响 | 第60-64页 |
| ·β干扰素诱导的细胞自噬与Akt/mTOR信号通路之间的关系 | 第64-67页 |
| ·β干扰素诱导的细胞自噬与ERK1/2信号通路之间的关系 | 第67-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 全文总结 | 第73-75页 |
| 创新点 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 附录 | 第85-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第93页 |
