人参皂苷Re单克隆抗体的制备及其酶联免疫分析方法的建立
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 上篇 文献综述 | 第10-30页 |
| 综述一 人参皂苷RE研究进展 | 第10-22页 |
| 参考文献 | 第18-22页 |
| 综述二 基于单克隆抗体的免疫分析技术研究现状 | 第22-30页 |
| 参考文献 | 第27-30页 |
| 下篇 实验研究 | 第30-78页 |
| 前言 | 第30-32页 |
| 1 研究背景 | 第30-31页 |
| 2 研究方法 | 第31页 |
| 3 创新点 | 第31-32页 |
| 第一章 人参皂苷RE单克隆抗体的制备 | 第32-48页 |
| 1 材料 | 第32-36页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| ·细胞株 | 第32页 |
| ·中药活性成分标准品 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器器械 | 第33-34页 |
| ·常用溶液和培养基 | 第34-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-40页 |
| ·GRe人工免疫抗原和包被原的制备 | 第36-37页 |
| ·GRe人工抗原的鉴定 | 第37页 |
| ·人工抗原免疫原性鉴定 | 第37-38页 |
| ·细胞融合 | 第38页 |
| ·单克隆细胞的筛选 | 第38-39页 |
| ·特异性检测 | 第39页 |
| ·单克隆抗体的扩大生产 | 第39-40页 |
| ·辛酸法纯化抗体 | 第40页 |
| 3 实验结果 | 第40-46页 |
| ·GRe人工抗原薄层色谱结果 | 第40页 |
| ·GRe人工抗原的紫外鉴定结果 | 第40-41页 |
| ·包被原最佳工作浓度 | 第41页 |
| ·血清抗体效价测定 | 第41-42页 |
| ·血清GRe抗体灵敏度测定 | 第42-43页 |
| ·血清抗GRe抗体特异性检测 | 第43-44页 |
| ·人参皂苷Re单克隆细胞株的筛选 | 第44-45页 |
| ·腹水纯化前后效价 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 第二章 人参皂苷RE酶联免疫吸附分析法的建立 | 第48-58页 |
| 1 材料 | 第48-49页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48-49页 |
| ·主要溶液配制 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-50页 |
| ·最佳包被浓度的确定 | 第49-50页 |
| ·腹水工作浓度及竞争抑制曲线的建立 | 第50页 |
| ·标准竞争抑制曲线 | 第50页 |
| ·腹水中单抗的特异性 | 第50页 |
| ·加样回收率 | 第50页 |
| ·精密度 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-55页 |
| ·腹水工作浓度的确定 | 第50-52页 |
| ·标准竞争抑制曲线 | 第52页 |
| ·腹水特异性分析 | 第52-54页 |
| ·加样回收率 | 第54页 |
| ·精密度 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 第三章 中药复方中人参皂苷RE含量的检测 | 第58-64页 |
| 1 材料 | 第58-59页 |
| ·中药材 | 第58页 |
| ·化学试剂 | 第58页 |
| ·主要仪器 | 第58页 |
| ·主要耗材 | 第58-59页 |
| ·主要溶液配制 | 第59页 |
| 2 实验方法 | 第59页 |
| ·样品处理 | 第59页 |
| ·中药复方中GRe含量的ELISA法测定 | 第59页 |
| 3 实验结果 | 第59-61页 |
| ·标准曲线 | 第59页 |
| ·中药复方中的GRe含量结果 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 第四章 人参皂苷RE免疫亲和层析敲除法的建立 | 第64-72页 |
| 1 材料 | 第64-65页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·主要仪器 | 第64页 |
| ·主要溶液配制 | 第64-65页 |
| 2 实验方法 | 第65-67页 |
| ·免疫亲和层析柱的制备 | 第65-66页 |
| ·免疫亲和层析敲除法的建立 | 第66页 |
| ·人参皂苷Re免疫亲和层析柱性能评价方法 | 第66-67页 |
| 3 实验结果 | 第67-71页 |
| ·偶联率结果 | 第67页 |
| ·GRe薄层色谱检测法的建立 | 第67-68页 |
| ·GRe高效液相指纹图谱 | 第68-69页 |
| ·GRe间接竞争ELISA检测法的建立 | 第69-71页 |
| 4 讨论 | 第71-72页 |
| 第五章 人参皂苷RE在人唾液中的代谢研究 | 第72-78页 |
| 1 材料 | 第72页 |
| ·人参颗粒 | 第72页 |
| ·主要仪器 | 第72页 |
| ·主要耗材 | 第72页 |
| 2 实验方法 | 第72-73页 |
| ·样品采集 | 第72-73页 |
| ·样品处理 | 第73页 |
| ·样品含量的ELISA检测 | 第73页 |
| 3 人参皂苷RE在入唾液代谢的药时曲线结果 | 第73-75页 |
| 4 讨论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-78页 |
| 小结 | 第78-80页 |
| 附录:缩略词及中英文对照表 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 简历 | 第84页 |