重组金属β-内酰胺酶的制备及快速检测试纸的研制
| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩写语 | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-20页 |
| ·β-内酰胺类抗生素概述 | 第14-15页 |
| ·β-内酰胺类抗生素耐药及其耐药机理 | 第15页 |
| ·β-内酰胺酶简介 | 第15-17页 |
| ·金属β-内酰胺酶CcrA | 第17-18页 |
| ·β-内酰胺酶的检测方法 | 第18页 |
| ·选题的意义及研究内容 | 第18-20页 |
| 第2章 金属β-内酰胺酶的表达鉴定及制备 | 第20-35页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·细菌和质粒 | 第20页 |
| ·药品试剂 | 第20-23页 |
| ·主要仪器及型号 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| ·质粒转移大肠杆菌BL21(DE3) | 第25-26页 |
| ·重组CcrA的诱导表达 | 第26-27页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测蛋白的表达 | 第27-28页 |
| ·粗蛋白的分离纯化 | 第28页 |
| ·CcrA表达条件的优化 | 第28-29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-34页 |
| ·重组金属β-内酰胺酶的表达 | 第29-30页 |
| ·CcrA表达条件的优化 | 第30-33页 |
| ·IPTG对表达结果的影响 | 第30-32页 |
| ·温度、pH值,DO和补料速率对表达结果的影响 | 第32-33页 |
| ·CcrA的纯化 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第3章 碘量法检测金属β-内酰胺酶的活性 | 第35-40页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·药品试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器及型号 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第4章 分光光度法检测金属β-内酰胺酶的活性 | 第40-50页 |
| ·引言 | 第40-41页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·药品及试剂 | 第41-42页 |
| ·主要仪器及型号 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·可行性实验 | 第42页 |
| ·美罗培南标准曲线的绘制 | 第42页 |
| ·羟胺法测定样品中的美罗培南含量 | 第42页 |
| ·检测条件优化 | 第42-43页 |
| ·Fe~(3+)用量对检测结果的影响 | 第42页 |
| ·pH对羟胺法检测美罗培南的影响 | 第42-43页 |
| ·显色稳定性的考察 | 第43页 |
| ·金属β-内酰胺酶浓度对显色的影响 | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-48页 |
| ·可行性实验 | 第43-45页 |
| ·美罗培南标准曲线的绘制 | 第43-44页 |
| ·羟胺法测定样品中的美罗培南含量 | 第44-45页 |
| ·检测条件优化 | 第45-48页 |
| ·Fe~(3+)用量对检测结果的影响 | 第45-46页 |
| ·pH对羟胺法检测美罗培南的影响 | 第46页 |
| ·显色稳定性的考察 | 第46-47页 |
| ·金属β-内酰胺酶浓度对显色的影响 | 第47-48页 |
| ·与碘量法比较 | 第48页 |
| ·本章小结 | 第48-50页 |
| 第5章 金属β-内酰胺酶快速检测试纸的研究 | 第50-55页 |
| ·引言 | 第50页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·药品及试剂 | 第50-51页 |
| ·主要仪器和型号 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51页 |
| ·样品处理 | 第51页 |
| ·快速检测试纸的检测范围及稳定性 | 第51页 |
| ·金属β-内酰胺酶的标准比色卡制作 | 第51页 |
| ·结果和讨论 | 第51-54页 |
| ·不同酶活的样品的显色反应结果 | 第51-52页 |
| ·快速检测试纸的检测范围及稳定性 | 第52-53页 |
| ·标准比色卡的制作 | 第53-54页 |
| ·快速检测试纸的使用 | 第54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
