| 致谢 | 第1-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| ·围食膜研究历史 | 第9页 |
| ·围食膜的种群分布 | 第9-10页 |
| ·围食膜的分类 | 第10页 |
| ·围食膜的产生 | 第10页 |
| ·围食膜的结构组成 | 第10-12页 |
| ·围食膜的功能 | 第12-13页 |
| ·机械保护和外源物入侵的屏障 | 第12页 |
| ·具有明显的选择透性 | 第12页 |
| ·将中肠腔分隔成不同腔室 | 第12-13页 |
| ·其他作用 | 第13页 |
| ·围食膜蛋白 | 第13-17页 |
| ·肠粘蛋白(ⅡM) | 第13-16页 |
| ·粘蛋白结构域(Mucin Domain)特征 | 第15页 |
| ·几丁质结合功能域结构特征 | 第15-16页 |
| ·肠粘蛋白的功能 | 第16页 |
| ·几丁质结合蛋白 | 第16页 |
| ·其他围食膜蛋白 | 第16-17页 |
| ·围食膜中潜在的害虫防治靶标位点 | 第17-19页 |
| 2 引言 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-32页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第20-21页 |
| ·供试昆虫与细胞 | 第20页 |
| ·昆虫细胞及真核基因表达系统 | 第20页 |
| ·酶和其它试剂 | 第20页 |
| ·主要溶液 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-32页 |
| ·棉铃虫中肠总RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·基因的科隆 | 第22-26页 |
| ·目的基因的扩增 | 第22-24页 |
| ·切胶回收目的基因片段 | 第24页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| ·原核重组克隆载体的构建 | 第25-26页 |
| ·原核重组表达载体的构建 | 第26-27页 |
| ·目的基因的回收 | 第26页 |
| ·酶切产物与表达载体的连接 | 第26页 |
| ·转化 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的筛选与阳性克隆的鉴定 | 第27页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第27-29页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第27页 |
| ·SDS-PAGE检测表达产物 | 第27-28页 |
| ·Western Blot | 第28页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第28-29页 |
| ·利用Bac-to-Bac杆状病毒系统表达目的蛋白 | 第29-32页 |
| ·pFastbacHT载体的构建 | 第29-30页 |
| ·转座 | 第30页 |
| ·重组质粒(Bacmid)的分离 | 第30页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第30-31页 |
| ·Sf9细胞的培养 | 第31页 |
| ·转染 | 第31页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第31-32页 |
| 4 结果与分析 | 第32-47页 |
| ·棉铃虫中肠总RNA的提取 | 第32页 |
| ·目的基因的扩增 | 第32-36页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第32-33页 |
| ·目的基因的扩增 | 第33-34页 |
| ·原核重组克隆载体的构建 | 第34-36页 |
| ·原核重组表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·目的基因在原核系统的诱导表达 | 第37-39页 |
| ·pET-IIM86基因的原核表达 | 第37页 |
| ·pET-Mucin基因的原核表达 | 第37-39页 |
| ·Mucin蛋白的表达 | 第37-38页 |
| ·Mucin蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| ·重组杆状病毒表达载体的构建 | 第39-42页 |
| ·pFastbacHT-ⅡM3、pFastbacHT-ⅡM4、pFastbacHT-ⅡM86的构建 | 第39-40页 |
| ·重组Bacmid DNA的构建 | 第40-42页 |
| ·目的蛋白在昆虫细胞中的表达 | 第42-47页 |
| ·ⅡM86的表达 | 第42-43页 |
| ·转染 | 第42页 |
| ·表达 | 第42-43页 |
| ·ⅡM3的表达 | 第43-45页 |
| ·转染 | 第43-44页 |
| ·表达 | 第44-45页 |
| ·ⅡM4的表达 | 第45-47页 |
| ·转染 | 第45页 |
| ·表达 | 第45-47页 |
| 5 结论与讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 英文摘要 | 第55-56页 |