致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1. 文献综述 | 第8-16页 |
·昆虫杆状病毒 | 第8-10页 |
·杆状病毒简介 | 第8页 |
·杆状病毒杀虫剂的应用研究 | 第8-9页 |
·杆状病毒表达载体的研究 | 第9-10页 |
·昆虫中肠围食膜的研究简介 | 第10-11页 |
·增效蛋白 | 第11-16页 |
·增效蛋白简介 | 第11页 |
·增效蛋白的命名 | 第11页 |
·增效蛋白的来源 | 第11-12页 |
·增效蛋白的分子生物学特征 | 第12-14页 |
·增效蛋白的作用模式 | 第14页 |
·增效蛋白的开发与应用 | 第14-16页 |
2. 引言 | 第16-17页 |
3. 材料与方法 | 第17-30页 |
·材料、试剂与仪器 | 第17-19页 |
·材料 | 第17页 |
·载体 | 第17页 |
·常用药品 | 第17页 |
·培养基及试剂 | 第17-18页 |
·细胞培养所用的试剂 | 第18-19页 |
·主要仪器 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-30页 |
·HaNPV病毒纯化 | 第19页 |
·引物设计 | 第19页 |
·目的基因的克隆 | 第19-20页 |
·目的基因的原核表达和功能鉴定 | 第20-25页 |
·目的基因的真核表达和功能鉴定 | 第25-30页 |
4. 结果与分析 | 第30-42页 |
·目的基因的扩增 | 第30页 |
·目的基因的原核表达 | 第30-33页 |
·重组克隆载体pGEM-T-En的验证 | 第30-31页 |
·重组表达载体pET-28a-En的验证 | 第31页 |
·目的基因的原核表达 | 第31-32页 |
·Western blot鉴定 | 第32-33页 |
·目的蛋白的纯化 | 第33页 |
·目的蛋白的功能鉴定 | 第33-35页 |
·生物测定结果 | 第33-34页 |
·体外孵育 | 第34-35页 |
·目的基因的真核表达 | 第35-42页 |
·重组克隆载体pGEM-T-En的验证 | 第35-36页 |
·重组表达载体pEGFP-N1-En的鉴定 | 第36页 |
·重组供体质粒pFastBacHT-A-En-EGFP的构建 | 第36-37页 |
·重组穿梭质粒Bacmid-En-EGFP的构建 | 第37-38页 |
·重组供体质粒pFastBacHT-A-En的构建 | 第38页 |
·重组穿梭质粒Bacmid-En的构建 | 第38-39页 |
·杆状病毒包装 | 第39页 |
·目的基因En-EGFP的真核表达及Western blot鉴定 | 第39-41页 |
·目的基因En的真核表达及Western blot鉴定 | 第41-42页 |
5. 结论与讨论 | 第42-44页 |
·结论 | 第42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
ABSTRACT | 第49-50页 |