| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| ·大丽轮枝菌的研究概况 | 第11-12页 |
| ·微菌核的生物学特性 | 第12-14页 |
| ·微菌核的超微结构及其形成能力的遗传 | 第12页 |
| ·微菌核的形成条件 | 第12-13页 |
| ·影响微菌核萌发的外界条件 | 第13页 |
| ·微菌核与寄主植物发病之间的关系 | 第13-14页 |
| ·微菌核的分子生物学研究 | 第14页 |
| ·真菌基因敲除研究进展 | 第14-19页 |
| ·基因敲除质粒构建方法 | 第14-17页 |
| ·基因敲除常用的遗传转化方法 | 第17-19页 |
| ·VDH1 的研究进展 | 第19页 |
| ·GPCRs 的研究进展 | 第19-21页 |
| ·GPCRs 的结构 | 第20页 |
| ·GPCRs 的分类 | 第20-21页 |
| ·GPCRs 的功能 | 第21页 |
| ·GPCRs 在不同生物中的研究情况 | 第21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 VDH1 和 GPCR 基因敲除质粒的构建 | 第23-40页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·菌株及质粒 | 第23-24页 |
| ·试剂仪器 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-33页 |
| ·引物设计 | 第24页 |
| ·基因组 DNA 提取方法 | 第24页 |
| ·融合 PCR 法基因敲除质粒的构建 | 第24-28页 |
| ·一步法基因敲除质粒的构建 | 第28-30页 |
| ·重组质粒的转化 | 第30页 |
| ·阳性克隆的筛选和检测 | 第30-31页 |
| ·重组质粒提取 | 第31-32页 |
| ·融合 PCR 法基因敲除质粒的验证 | 第32页 |
| ·一步法基因敲除质粒的验证 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-38页 |
| ·融合 PCR 法基因敲除质粒的获得 | 第33-35页 |
| ·一步法基因敲除质粒的获得 | 第35-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 VDH1 和 GPCR 基因敲除和转化子的鉴定 | 第40-50页 |
| ·材料 | 第40-42页 |
| ·菌株 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·试剂 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-46页 |
| ·农杆菌电击感受态的制备 | 第42-43页 |
| ·基因敲除载体转化农杆菌 | 第43-44页 |
| ·农杆菌介导转化大丽轮枝菌 | 第44-45页 |
| ·农杆菌对头孢霉素的抗性检测 | 第45页 |
| ·VDH1 和 GPCR 基因敲除转化子的筛选 | 第45页 |
| ·VDH1 和 GPCR 基因敲除转化子的分子生物学验证 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-49页 |
| ·头孢霉素最佳使用浓度的确定 | 第46-47页 |
| ·VDH1 和 GPCR 基因敲除转化子的获得 | 第47-48页 |
| ·VDH1 和 GPCR 基因敲除转化子的鉴定 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 VDH1 和 GPCR 基因敲除突变体的表型观察与致病性测定 | 第50-58页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·菌株 | 第50页 |
| ·主要培养基及配方 | 第50页 |
| ·试验器材 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-52页 |
| ·突变体在 PDA 上菌落形态观察 | 第50页 |
| ·突变体 PDA 培养基上生长速度测定 | 第50页 |
| ·突变体产孢量的测定 | 第50-51页 |
| ·突变体微菌核产量测定 | 第51页 |
| ·突变体微菌核萌发情况的测定 | 第51-52页 |
| ·病情指数的调查和统计 | 第52页 |
| ·结果 | 第52-56页 |
| ·突变体形态观察 | 第52-53页 |
| ·菌落生长速度测定 | 第53页 |
| ·产孢量的测定 | 第53-54页 |
| ·微菌核产量的测定 | 第54-55页 |
| ·微菌核萌发情况的测定 | 第55页 |
| ·致病力测定 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第五章 全文结论 | 第58-60页 |
| ·结论 | 第58页 |
| ·今后工作展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
