| 摘要 | 第1-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-17页 |
| 1 巨噬细胞移动抑制因子研究进展 | 第8-14页 |
| ·MIF的组织来源 | 第8-9页 |
| ·MIF的基因结构及多态性 | 第9页 |
| ·MIF的蛋白结构及其酶活性 | 第9-10页 |
| ·MIF的生物学功能及其机制 | 第10-14页 |
| 本实验立项依据和研究意义 | 第14-16页 |
| 本实验的基本思路 | 第16-17页 |
| 第二章 巨噬细胞移动抑制因子蛋白性质、结构和分子进化分析 | 第17-32页 |
| 1 材料与方法 | 第17-19页 |
| ·鸡MIF mRNA序列和蛋白序列的获取 | 第17页 |
| ·鸡MIF序列的生物信息学分析 | 第17-19页 |
| 2 结果与分析 | 第19-30页 |
| ·鸡MIF核酸和蛋白质序列 | 第19-20页 |
| ·理化性质分析 | 第20页 |
| ·疏水性分析 | 第20-21页 |
| ·信号肽预测 | 第21-22页 |
| ·跨膜区结构预测 | 第22-23页 |
| ·糖基化位点预测 | 第23-24页 |
| ·磷酸化位点预测 | 第24-25页 |
| ·鸡MIF蛋白质二级结构预测 | 第25-26页 |
| ·鸡MIF蛋白三级结构预测 | 第26-28页 |
| ·亚细胞定位 | 第28页 |
| ·系统进化树分析 | 第28-30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 4 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 鸡MIF原核蛋白表达、纯化和生物活性初步鉴定 | 第32-54页 |
| 1 材料与方法 | 第32-42页 |
| ·试验材料 | 第32-34页 |
| ·试验方法 | 第34-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-49页 |
| ·肉鸡肝脏组织总RNA的提取 | 第42-43页 |
| ·RT-PCR扩增肉鸡MIF基因序列 | 第43页 |
| ·pEASY-E1-MIF原核表达载体的构建及酶切和测序鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白小量表达 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白大量表达及纯化 | 第45-46页 |
| ·质谱分析 | 第46-47页 |
| ·Western-blot检测 | 第47页 |
| ·酶活性初探 | 第47-49页 |
| 3 讨论 | 第49-53页 |
| ·鸡MIF重组蛋白的制备 | 第49页 |
| ·关于引物与酶的选择 | 第49页 |
| ·关于载体pEASY-E1的介绍 | 第49-50页 |
| ·感受态细胞对转化的影响 | 第50-51页 |
| ·大肠杆菌表达蛋白表达效率的影响因素 | 第51页 |
| ·蛋白质复性的条件及影响因素 | 第51-53页 |
| 4 小结 | 第53-54页 |
| 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| ABSTRACT | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
