| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 本文词语缩写 | 第12-13页 |
| 目录 | 第13-17页 |
| 引言 | 第17-18页 |
| 第一部分 文献综述 | 第18-32页 |
| 第一节 角蛋白的结构与降解 | 第18-20页 |
| 1 角蛋白概述 | 第18页 |
| 2 角蛋白废弃物的降解工艺 | 第18-20页 |
| ·传统水解处理法 | 第18-19页 |
| ·生物技术处理法 | 第19-20页 |
| 第二节 角蛋白酶的来源和性质 | 第20-22页 |
| 1 角蛋白酶的来源 | 第20-21页 |
| ·真菌 | 第20页 |
| ·放线菌 | 第20页 |
| ·细菌 | 第20-21页 |
| 2 角蛋白酶的性质 | 第21-22页 |
| ·角蛋白酶的分子量 | 第21页 |
| ·角蛋白酶的晶体结构 | 第21页 |
| ·底物特异性 | 第21页 |
| ·最适反应pH和最适反应温度 | 第21-22页 |
| ·各种离子和蛋白酶抑制剂的作用 | 第22页 |
| 第三节 角蛋白酶的作用机制 | 第22-24页 |
| 1 物理压力理论 | 第22页 |
| 2 膜电位理论 | 第22-23页 |
| 3 硫解作用理论 | 第23页 |
| 4 复合酶理论 | 第23-24页 |
| 第四节 角蛋白酶分子生物学与基因工程 | 第24-27页 |
| 1 来源不同的角蛋白酶基因 | 第24-25页 |
| ·细菌角蛋白酶基因 | 第24-25页 |
| ·放线菌角蛋白酶基因 | 第25页 |
| ·真菌角蛋白酶基因 | 第25页 |
| 2 角蛋白酶基因的异源表达 | 第25-27页 |
| ·角蛋白酶基因的原核表达及其分子改造 | 第25-26页 |
| ·角蛋白酶基因的毕赤酵母中的表达及其分子改造 | 第26-27页 |
| 3 角蛋白酶的热稳定性改造 | 第27页 |
| 第五节 角蛋白酶的应用研究 | 第27-32页 |
| 1 角蛋白酶在饲料业中的应用 | 第28页 |
| ·角蛋白酶对角蛋白废弃物的利用 | 第28页 |
| ·角蛋白酶对饲料利用率的影响 | 第28页 |
| 2 角蛋白酶与医疗行业 | 第28-29页 |
| ·角蛋白酶与阮病毒 | 第28-29页 |
| ·角蛋白酶与皮肤病 | 第29页 |
| ·角蛋白酶与医药 | 第29页 |
| 3 其它方面 | 第29页 |
| 4 角蛋白酶研究中存在的问题 | 第29-32页 |
| ·表达系统的选择 | 第30页 |
| ·制约角蛋白酶高效表达的因素 | 第30页 |
| ·可能的解决途径 | 第30-32页 |
| 第二部分 本研究的目的、内容、意义与技术路线 | 第32-34页 |
| 1 研究的目的、意义 | 第32页 |
| 2 研究内容 | 第32页 |
| 3 研究意义 | 第32页 |
| 4 技术路线 | 第32-34页 |
| 第三部分 试验研究 | 第34-117页 |
| 试验一：地衣芽孢杆菌角蛋白酶基因(kerA)的克隆 | 第34-45页 |
| 1 试验材料 | 第34-35页 |
| 2 试验方法 | 第35-38页 |
| 3 结果 | 第38-43页 |
| 4 讨论 | 第43-44页 |
| 5 小结 | 第44-45页 |
| 试验二：kerA基因在大肠杆菌中的表达及重组酶酶学性质研究 | 第45-61页 |
| 一 角蛋白酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第45-54页 |
| 1 试验材料 | 第45-46页 |
| 2 试验方法 | 第46-49页 |
| 3 结果 | 第49-52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 5 小结 | 第53-54页 |
| 二 E. coli重组角蛋白酶分离纯化及酶学性质研究 | 第54-61页 |
| 1 试验材料 | 第54页 |
| 2 试验方法 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-59页 |
| 4 讨论 | 第59-60页 |
| 5 小结 | 第60-61页 |
| 试验三：kerA基因在毕赤酵母菌中表达及重组酶酶学性质研究 | 第61-82页 |
| 一 角蛋白酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第61-74页 |
| 1 试验材料 | 第61-64页 |
| 2 试验方法 | 第64-67页 |
| 3 结果 | 第67-72页 |
| 4 讨论 | 第72-74页 |
| 5 小结 | 第74页 |
| 二 毕赤酵母重组角蛋白酶分离纯化及酶学性质分析 | 第74-82页 |
| 1 试验材料 | 第74页 |
| 2 试验方法 | 第74-75页 |
| 3 结果 | 第75-80页 |
| 4 讨论 | 第80-81页 |
| 5 小结 | 第81-82页 |
| 试验四：高效表达角蛋白酶基因的分子设计及其在毕赤酵母中的表达研究 | 第82-98页 |
| 1 试验材料 | 第82-83页 |
| 2 试验方法 | 第83-86页 |
| 3 结果 | 第86-93页 |
| 4 讨论 | 第93-97页 |
| 5 小结 | 第97-98页 |
| 试验五：耐热角蛋白酶基因的分子设计及其在毕赤酵母中的表达研究 | 第98-107页 |
| 1 试验材料 | 第98页 |
| 2 试验方法 | 第98-99页 |
| 3 结果 | 第99-105页 |
| 4 讨论 | 第105-106页 |
| 5 小结 | 第106-107页 |
| 试验六：重组酶小规模制备及其应用效果评定 | 第107-117页 |
| 一 重组角蛋白酶小规模制备 | 第107-111页 |
| 1 试验材料 | 第107-108页 |
| 2 试验方法 | 第108页 |
| 3 结果 | 第108-110页 |
| 4 讨论 | 第110-111页 |
| 5 小结 | 第111页 |
| 二 重组角蛋白酶应用效果初步评定 | 第111-117页 |
| 1 材料与方法 | 第111-114页 |
| 2 结果 | 第114-116页 |
| 4 讨论 | 第116页 |
| 5 小结 | 第116-117页 |
| 第四部分 本研究的结论、创新点和研究展望 | 第117-119页 |
| 一 结论 | 第117页 |
| 二 创新点 | 第117页 |
| 三 今后的研究展望 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文目录 | 第132页 |
