| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-20页 |
| ·研究背景 | 第14-15页 |
| ·研究目的和意义 | 第15页 |
| ·国内外研究进展 | 第15-18页 |
| ·角蛋白酶的微生物来源及其理化性质 | 第15页 |
| ·微生物降解羽毛的分子机制 | 第15-16页 |
| ·角蛋白酶基因的分子生物学研究 | 第16-18页 |
| ·角蛋白酶的应用 | 第18页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第18-20页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 厌氧角蛋白降解菌的鉴定及功能分析 | 第20-32页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-24页 |
| ·菌株的纯度鉴定及分离纯化 | 第20-21页 |
| ·形态观察 | 第21页 |
| ·生理生化实验 | 第21-22页 |
| ·基因组提取 | 第22页 |
| ·16S rRNA 鉴定 | 第22-23页 |
| ·基因组 G+C 含量测定 | 第23页 |
| ·细胞脂肪酸测定 | 第23页 |
| ·细胞呼吸醌测定 | 第23页 |
| ·挥发酸测定 | 第23页 |
| ·氨氮测定 | 第23-24页 |
| ·羽毛角蛋白的降解率 | 第24页 |
| ·结果与讨论 | 第24-31页 |
| ·菌株 KD-1 的形态特征 | 第24页 |
| ·菌株 KD-1 的生理生化特征 | 第24-25页 |
| ·基因组 DNA （G+C）mol % | 第25-26页 |
| ·细胞脂肪酸组分 | 第26页 |
| ·细胞呼吸醌成分 | 第26页 |
| ·代谢产物中挥发酸分析 | 第26页 |
| ·代谢产物中的氨氮含量 | 第26-27页 |
| ·菌株 KD-1 的系统发育树分析 | 第27-30页 |
| ·羽毛角蛋白的降解速率测定 | 第30页 |
| ·Keratinibaculum paraultunense gen. nov., sp. nov.的描述 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 Keratinibaculum paraultunense 厌氧降解羽毛角蛋白的机制初探 | 第32-44页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·供试菌株 | 第32页 |
| ·试剂与仪器 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-34页 |
| ·菌株 KD-1 降解羽毛角蛋白的显微观察 | 第32页 |
| ·角蛋白酶、蛋白酶与二硫键还原酶活性的检测分析 | 第32-33页 |
| ·粗角蛋白酶活的反应 pH 和反应温度范围 | 第33页 |
| ·粗酶液角蛋白酶活的影响因子 | 第33-34页 |
| ·粗酶液中含硫化合物测定 | 第34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-43页 |
| ·KD-1 降解羽毛角蛋白的扫描电镜分析 | 第34-35页 |
| ·角蛋白酶、蛋白酶和二硫键还原酶的检测分析 | 第35-37页 |
| ·粗角蛋白酶活的反应 pH 和反应温度范围 | 第37-39页 |
| ·粗酶液角蛋白酶活的影响因子 | 第39-40页 |
| ·粗酶液中含硫化合物测定 | 第40-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 第四章 最佳产酶条件研究 | 第44-53页 |
| ·材料与方法 | 第44-46页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·培养基及培养方法 | 第44页 |
| ·pH 值测定 | 第44页 |
| ·角蛋白酶活性测定 | 第44-45页 |
| ·单因素实验 | 第45页 |
| ·正交实验优化发酵培养基 | 第45-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-52页 |
| ·单因素实验 | 第46-48页 |
| ·正交实验优化角蛋白酶发酵培养基 | 第48-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 第五章 角蛋白酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第53-73页 |
| ·实验材料 | 第53-55页 |
| ·菌株 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·培养基及培养方法 | 第53页 |
| ·试剂和缓冲液 | 第53-55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| ·酶活测定 | 第55页 |
| ·蛋白含量测定 | 第55页 |
| ·粗酶液的制备 | 第55页 |
| ·粗酶液的浓缩 | 第55-56页 |
| ·脱盐柱脱盐 | 第56-57页 |
| ·离子交换层析 | 第57页 |
| ·尺寸排阻层析 | 第57页 |
| ·角蛋白酶的鉴定 | 第57-58页 |
| ·角蛋白酶的理化性质 | 第58-59页 |
| ·实验结果 | 第59-72页 |
| ·蛋白含量测定标准曲线 | 第59-60页 |
| ·蛋白浓缩 | 第60-61页 |
| ·Hiprep 26/10 Desalting 脱盐 | 第61页 |
| ·Hiprep DEAE FF 16/10 阴离子层析 | 第61页 |
| ·Superdex 20010/300 GL 尺寸排阻层析 | 第61-62页 |
| ·纯化结果分析 | 第62-63页 |
| ·角蛋白酶的鉴定 | 第63-65页 |
| ·角蛋白酶的理化性质 | 第65-72页 |
| ·本章小结 | 第72-73页 |
| 第六章 全文结论 | 第73-75页 |
| ·结论 | 第73-74页 |
| ·厌氧角蛋白降解菌 KD-1 系统发育分析 | 第73页 |
| ·菌株 KD-1 降解羽毛角蛋白的机制初探 | 第73页 |
| ·菌株 KD-1 发酵产角蛋白酶的条件研究 | 第73页 |
| ·角蛋白酶的分离纯化及其理化性质研究 | 第73-74页 |
| ·存在的问题 | 第74页 |
| ·工作展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 附录 | 第80-83页 |
| 1 菌株 KD-116S RRNA 部分序列，GENBANK 登录号 KC188660 | 第80-81页 |
| 2 菌株 KD-1 菌种保藏证书 | 第81-82页 |
| 3 文章录用证明 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 作者简介 | 第85页 |
