| 目录 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 缩写词 | 第16-18页 |
| 第一章 综述 | 第18-34页 |
| 1 植物花色的形成机理 | 第18-25页 |
| ·植物花色素种类 | 第19-23页 |
| ·影响花色形成的其他因素 | 第23-25页 |
| 2 类黄酮生物合成途径的相关酶基因的研究进展 | 第25-29页 |
| ·类黄酮 3’-羟化酶（flavonoid 3’-hydroxylase, F3’H） | 第25-26页 |
| ·二氢黄酮醇-4-还原酶(dihydroflavonol-4-reductase, DFR) | 第26-28页 |
| ·黄酮醇合成酶(flavonol synthase, FLS) | 第28-29页 |
| 3 全长 cDNA 文库的构建方法及应用 | 第29-31页 |
| ·SMART 法构建全长 cDNA 文库 | 第29-30页 |
| ·全长 cDNA 文库的应用 | 第30-31页 |
| 4 多花水仙花色的研究进展 | 第31-32页 |
| 5 本研究的内容和意义 | 第32-34页 |
| ·本研究的意义 | 第32页 |
| ·本研究的内容 | 第32-34页 |
| 第二章 多花水仙类黄酮 3’-羟化酶基因 cDNA 全长的克隆与分析 | 第34-56页 |
| 1 试验材料 | 第34-36页 |
| ·植物材料 | 第34-35页 |
| ·试验用试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第35-36页 |
| ·引物合成 | 第36页 |
| 2 试验方法 | 第36-39页 |
| ·多花水仙总 RNA 的提取与检测 | 第36页 |
| ·cDNA 的合成 | 第36页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·PCR 扩增 | 第37-38页 |
| ·目的片段的回收 | 第38页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第38页 |
| ·连接产物的转化及重组子的检测 | 第38页 |
| ·序列的拼接及基因的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 3 结果和分析 | 第39-53页 |
| ·多花水仙总 RNA 的提取与检测 | 第39-40页 |
| ·黄花水仙 F3’H 基因 cDNA 全长的克隆及序列分析 | 第40-44页 |
| ·多花水仙三种花色类型 F3’H 基因 ORF 的扩增 | 第44-45页 |
| ·多花水仙 F3’H 基因的生物信息学分析 | 第45-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| ·多花水仙 F3’H 基因拷贝数的推测 | 第53页 |
| ·多花水仙 F3’H 功能结构域分析 | 第53-54页 |
| ·多花水仙不同花色品种中 F3’H 基因的差异分析 | 第54-55页 |
| ·多花水仙 F3’H 基因克隆的意义 | 第55-56页 |
| 第三章 多花水仙二氢黄酮醇 4-还原酶基因 cDNA 全长的克隆与分析 | 第56-74页 |
| 1 试验材料 | 第56页 |
| 2 试验方法 | 第56-57页 |
| 3 结果和分析 | 第57-72页 |
| ·黄花水仙 DFR 基因 cDNA 全长的克隆及序列分析 | 第57-61页 |
| ·多花水仙三种花色类型 DFR 基因 ORF 的扩增 | 第61-63页 |
| ·多花水仙 DFR 基因的生物信息学分析 | 第63-72页 |
| 4 讨论 | 第72-74页 |
| ·多花水仙 DFR 底物特异性结合区域预测 | 第72页 |
| ·多花水仙 DFR 克隆的意义 | 第72-74页 |
| 第四章 多花水仙黄酮醇合成酶基因的克隆及分析 | 第74-90页 |
| 1 实验材料 | 第74页 |
| 2 试验方法 | 第74-75页 |
| 3 结果和分析 | 第75-87页 |
| ·金盏银台 FLS 基因 cDNA 全长的克隆及序列分析 | 第75-79页 |
| ·多花水仙三种花色类型 FLS 基因 ORF 的扩增 | 第79-80页 |
| ·多花水仙 FLS 基因的生物信息学分析 | 第80-87页 |
| 4 讨论 | 第87-90页 |
| ·多花水仙 FLS 基因的克隆 | 第87页 |
| ·多花水仙 FLS 的功能结构域分析 | 第87-88页 |
| ·多花水仙 FLS 与其他基因的互作关系 | 第88-90页 |
| 第五章 多花水仙花色形成过程中F3’H、DFR和FLS基因的荧光定量PCR分析 | 第90-102页 |
| 1 试验材料 | 第90页 |
| ·植物材料 | 第90页 |
| ·试验用主要试剂和仪器 | 第90页 |
| 2 试验方法 | 第90-92页 |
| ·多花水仙总 RNA 的提取与检测 | 第90-91页 |
| ·cDNA 的合成 | 第91页 |
| ·引物设计 | 第91页 |
| ·实时荧光定量 PCR 反应条件和数据分析 | 第91-92页 |
| 3 结果和分析 | 第92-98页 |
| ·不同花色类型花瓣和副冠四个时期总 RNA 质量 | 第92页 |
| ·三个基因的特异性扩增的动力学曲线和溶解曲线 | 第92-93页 |
| ·F3’H 、DFR 和 FLS 基因在多花水仙花发育不同时期的表达分析 | 第93-98页 |
| ·F3’H 在多花水仙花发育不同时期的表达 | 第93-95页 |
| ·DFR 在多花水仙花发育不同时期的表达 | 第95-96页 |
| ·FLS 在多花水仙花发育不同时期的表达 | 第96-98页 |
| 4 讨论 | 第98-102页 |
| 第六章 黄花水仙 cDNA 文库的构建 | 第102-110页 |
| 1 试验材料 | 第102-103页 |
| ·植物材料 | 第102-103页 |
| ·试验用试剂 | 第103页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第103页 |
| ·引物合成 | 第103页 |
| 2 试验方法 | 第103-105页 |
| ·黄花水仙总 RNA 的提取与检测 | 第103页 |
| ·双链 cDNA 的合成 | 第103-104页 |
| ·双链 cDNA 的分级分离以及与载体的连接 | 第104页 |
| ·连接产物的转化 | 第104页 |
| ·文库滴度的测定与文库的扩增 | 第104页 |
| ·插入片段长短及重组率的检测 | 第104-105页 |
| 3 结果和分析 | 第105-107页 |
| ·黄花水仙总 RNA 的提取与检测 | 第105-106页 |
| ·黄花水仙 dscDNA 的合成 | 第106页 |
| ·黄花水仙 cDNA 链分级 | 第106页 |
| ·cDNA 文库质量的检测 | 第106-107页 |
| ·文库的滴度 | 第106页 |
| ·插入片段大小及重组率的检测 | 第106-107页 |
| 4 讨论 | 第107-110页 |
| 参考文献 | 第110-120页 |
| 附录 Ⅰ 多花水仙三种花色的不同发育时期 | 第120-121页 |
| 附录 Ⅱ 多花水仙 F3’H cDNA 核苷酸比对结果 | 第121-122页 |
| 附录 Ⅲ 多花水仙 F3’H cDNA 编码产物的氨基酸组成 | 第122-123页 |
| 附录 Ⅳ 多花水仙 DFR cDNA 核苷酸比对结果 | 第123-124页 |
| 附录 Ⅴ 多花水仙 DFR cDNA 编码产物的氨基酸组成 | 第124-125页 |
| 附录 Ⅵ 多花水仙 FLS cDNA 核苷酸比对结果 | 第125-126页 |
| 附录 Ⅶ 多花水仙 FLS cDNA 编码产物的氨基酸组成 | 第126-127页 |
| 附录 Ⅷ 金盏银台 FLS 与中国水仙 FLS 及洋水仙 ANS cDNA 核苷酸比对 | 第127-128页 |
| 致谢 | 第128页 |
