| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-24页 |
| ·关节软骨组织介绍 | 第13-14页 |
| ·关节软骨缺损及临床常用治疗方法 | 第14-16页 |
| ·软骨组织工程 | 第16-22页 |
| ·种子细胞 | 第17页 |
| ·支架材料 | 第17-19页 |
| ·生长因子 | 第19页 |
| ·共培养技术在软骨组织工程中的应用 | 第19-20页 |
| ·三维动态培养 | 第20-21页 |
| ·共培养体系中的细胞分离 | 第21-22页 |
| ·本文的主要意义及研究目的 | 第22-24页 |
| 第2章 基于海藻酸凝胶微球动态培养rACs | 第24-45页 |
| ·引言 | 第24-25页 |
| ·实验材料与方法 | 第25-31页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·实验试剂 | 第25-27页 |
| ·实验器材 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·兔软骨细胞的分离,冷冻保存,培养和扩增 | 第27-28页 |
| ·细胞包埋 | 第28页 |
| ·死活荧光染色 | 第28页 |
| ·MTT检测 | 第28-29页 |
| ·DNA含量测定 | 第29页 |
| ·GAG含量测定 | 第29页 |
| ·组织化学染色 | 第29页 |
| ·免疫荧光染色 | 第29页 |
| ·qRT-PCR | 第29-30页 |
| ·扫描电镜观察 | 第30页 |
| ·动物实验 | 第30页 |
| ·数据处理 | 第30-31页 |
| ·实验结果 | 第31-42页 |
| ·兔软骨细胞形态 | 第31页 |
| ·细胞死活染色 | 第31页 |
| ·细胞活性 | 第31-32页 |
| ·DNA含量 | 第32-33页 |
| ·GAG含量 | 第33-34页 |
| ·组织化学染色 | 第34页 |
| ·免疫荧光染色 | 第34-36页 |
| ·qRT-PCR | 第36-37页 |
| ·皮下移植实验 | 第37-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-45页 |
| 第3章 基于海藻酸凝胶微球动态培养条件下rMSCs的成软骨分化 | 第45-52页 |
| ·引言 | 第45-46页 |
| ·实验材料与方法 | 第46-47页 |
| ·实验动物 | 第46页 |
| ·实验试剂 | 第46页 |
| ·rMSCs的分离,冷冻保存和传代培养 | 第46页 |
| ·细胞包埋 | 第46页 |
| ·死活荧光染色 | 第46-47页 |
| ·MTT检测 | 第47页 |
| ·DNA含量测定 | 第47页 |
| ·GAG含量测定 | 第47页 |
| ·RT-PCR | 第47页 |
| ·数据处理 | 第47页 |
| ·实验结果 | 第47-48页 |
| ·细胞死活荧光染色 | 第47页 |
| ·诱导条件下rMSCs的生长与基质分泌 | 第47-48页 |
| ·RT-PCR | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第4章 可简便分离共培养中两种细胞的新型动态共培养体系的建立 | 第52-72页 |
| ·引言 | 第52-54页 |
| ·实验材料与方法 | 第54-56页 |
| ·主要试剂及材料 | 第54-55页 |
| ·主要仪器 | 第55页 |
| ·含Fe_3O_4的海藻酸钠处理 | 第55页 |
| ·细胞包埋与培养 | 第55页 |
| ·死活荧光染色 | 第55页 |
| ·MTT检测 | 第55页 |
| ·DNA含量测定 | 第55页 |
| ·GAG含量测定 | 第55页 |
| ·细胞回收 | 第55-56页 |
| ·细胞流式仪检测回收的rMSCs表面特征抗原 | 第56页 |
| ·组织化学染色 | 第56页 |
| ·数据处理 | 第56页 |
| ·实验结果 | 第56-69页 |
| ·静态培养条件下Fe_3O_4对rACs活性、增殖及GAG分泌的影响 | 第56页 |
| ·静态培养条件下Fe_3O_4对rMSCs活性和增殖的影响 | 第56-58页 |
| ·三维动态条件下不同培养基中含Fe_3O_4微球内rACs的生长 | 第58-60页 |
| ·海藻酸浓度对动态共培养中两种细胞的影响 | 第60-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-72页 |
| 第5章 基于新型三维动态共培养体系考察rMSCs和hMSCs成软骨分化 | 第72-83页 |
| ·引言 | 第72-73页 |
| ·实验材料与方法 | 第73-75页 |
| ·实验试剂 | 第73页 |
| ·细胞分离、冷冻保存、培养和扩增 | 第73-74页 |
| ·细胞包埋 | 第74页 |
| ·死活荧光染色 | 第74页 |
| ·MTT检测细胞活性 | 第74页 |
| ·DNA含量测定 | 第74页 |
| ·GAG含量测定 | 第74页 |
| ·组织化学染色 | 第74页 |
| ·免疫荧光染色 | 第74页 |
| ·RT-PCR | 第74-75页 |
| ·数据处理 | 第75页 |
| ·实验结果 | 第75-81页 |
| ·rMSCs与rACs的三维动态共培养 | 第76-78页 |
| ·hAMSCs与rACs的三维动态共培养 | 第78-81页 |
| ·讨论 | 第81-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 第6章 全文总结与展望 | 第83-86页 |
| ·全文总结 | 第83-84页 |
| ·未来展望 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
