| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1. 引言 | 第10-26页 |
| ·手性胺 | 第10-14页 |
| ·化学法 | 第10页 |
| ·生物法 | 第10-14页 |
| ·单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO) | 第14-20页 |
| ·单胺氧化酶种类 | 第14页 |
| ·黑曲霉来源的单胺氧化酶(MAO-N) | 第14-20页 |
| ·定向进化策略 | 第20-24页 |
| ·非理性设计 | 第20-22页 |
| ·理性设计 | 第22-23页 |
| ·半理性设计 | 第23页 |
| ·CASTing | 第23-24页 |
| ·本课题研究内容及意义 | 第24-26页 |
| ·研究内容 | 第24-25页 |
| ·意义 | 第25-26页 |
| 2. 半理性设计改造单胺氧化酶MAO-N | 第26-45页 |
| ·试剂与材料 | 第26-29页 |
| ·菌种与质粒 | 第26页 |
| ·工具酶 | 第26页 |
| ·化学试剂 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-28页 |
| ·仪器设备 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-36页 |
| ·分子对接 | 第29页 |
| ·突变库构建 | 第29-32页 |
| ·高通量平板筛选 | 第32页 |
| ·96微孔板筛选 | 第32-33页 |
| ·蛋白纯化 | 第33-34页 |
| ·酶活力测定 | 第34-35页 |
| ·液相分析拆分反应 | 第35-36页 |
| ·实验结果与讨论 | 第36-45页 |
| ·分子对接 | 第36-38页 |
| ·突变库构建 | 第38页 |
| ·平板筛选 | 第38-39页 |
| ·96微孔板筛选 | 第39-40页 |
| ·蛋白纯化与SDS-PAG | 第40页 |
| ·酶活力测定 | 第40-41页 |
| ·位点组合突变 | 第41-42页 |
| ·高效液相色谱分析 | 第42-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 3. 无理设计(epPCR)改造单胺氧化酶MAO-N | 第45-55页 |
| ·试剂与材料 | 第45-46页 |
| ·菌种与质粒 | 第45页 |
| ·工具酶 | 第45页 |
| ·化学试剂 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45页 |
| ·仪器设备 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-49页 |
| ·随机突变库构建 | 第46-48页 |
| ·高通量筛选 | 第48页 |
| ·酶活力测定 | 第48页 |
| ·底物特异性 | 第48-49页 |
| ·单胺氧化酶拆分反应 | 第49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-55页 |
| ·随机突变库构建 | 第49-50页 |
| ·epPCR | 第49页 |
| ·MegaPCR | 第49-50页 |
| ·高通量筛选 | 第50-51页 |
| ·酶活力测定 | 第51页 |
| ·底物特异性 | 第51-53页 |
| ·高效液相分析 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 4 结论与建议 | 第55-57页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| ·建议 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 作者简历及硕士期间发表文章 | 第63页 |