| 目录 | 第1-6页 |
| CONTENTS | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-19页 |
| ·旋毛虫与旋毛虫病 | 第12页 |
| ·旋毛虫 ES 抗原 | 第12-14页 |
| ·ES 抗原组成 | 第12-13页 |
| ·ES 抗原在免疫诊断方面研究 | 第13页 |
| ·ES 抗原在免疫系统方面研究 | 第13-14页 |
| ·旋毛虫常用的检测方法 | 第14-15页 |
| ·TOLL 样受体 | 第15-17页 |
| ·TOLL 样受体的信号传导通路 | 第15-16页 |
| ·TLRs-NF-κB 的激活与功能 | 第16页 |
| ·TLR2 与 TLR4 | 第16-17页 |
| ·双荧光素酶报告基因分析 | 第17-18页 |
| ·研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-30页 |
| ·材料 | 第19-22页 |
| ·实验动物和细胞株 | 第19页 |
| ·菌株和载体 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要溶液配制 | 第19-21页 |
| ·仪器设备 | 第21页 |
| ·应用软件及网络资源 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-30页 |
| ·旋毛虫 ES 抗原单抗制备及双夹心 ELISA 方法建立 | 第22-26页 |
| ·旋毛虫 ES 抗原成分与 TLR2、TLR4 受体直接作用分析 | 第26-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-44页 |
| ·旋毛虫 ES 抗原单克隆抗体制备 | 第30-31页 |
| ·旋毛形线虫肌幼虫 ES 抗原 SDS-PAGE 分析 | 第30页 |
| ·纯化的重组蛋白浓度的测定 | 第30页 |
| ·最佳抗原及抗体工作浓度的确定 | 第30-31页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第31页 |
| ·杂交瘤细胞分泌抗体稳定性的鉴定 | 第31页 |
| ·杂交瘤细胞部分特性鉴定 | 第31-35页 |
| ·测定细胞上清液效价 | 第31页 |
| ·Western blot 鉴定 | 第31-32页 |
| ·抗体亚类鉴定结果 | 第32页 |
| ·杂交瘤细胞染色体数分析 | 第32-33页 |
| ·单克隆抗体交叉反应 | 第33页 |
| ·单抗A11腹水纯化 | 第33-34页 |
| ·兔抗旋毛虫 ES 抗原多抗的纯化 | 第34-35页 |
| ·双抗体夹心 ELISA 方法建立 | 第35-37页 |
| ·兔抗 ES 抗原 IgG 与 A11 单抗最佳工作浓度的确定 | 第35页 |
| ·双抗体夹心 ELISA 判定标准 | 第35页 |
| ·交叉反应结果 | 第35-36页 |
| ·灵敏度检测结果 | 第36页 |
| ·宿主血液中循环抗原检测 | 第36-37页 |
| ·旋毛虫 ES 抗原成分与 TLR2、TLR4 受体直接作用分析 | 第37-44页 |
| ·A11 单抗亲和层析分离天然旋毛虫 43、49、53kDa 混合蛋白 | 第37页 |
| ·mTLR2、mTLR4 基因的扩增 | 第37-38页 |
| ·mTLR2、mTLR4 基因真核表达载体的鉴定 | 第38-40页 |
| ·mTLR2、mTLR4 基因的真核表达分析 | 第40-41页 |
| ·mTLR2、mTLR4 对 NF-κB 转录活性的影响 | 第41-42页 |
| ·旋毛虫抗原与 mTLR2、mTLR4 受体直接作用 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| ·旋毛虫 ES 抗原的单克隆抗体制备 | 第44页 |
| ·双抗体夹心 ELISA 方法建立 | 第44-45页 |
| ·天然 43、49、53kDa 混合蛋白的提取 | 第45页 |
| ·mTLR2、mTLR4 受体的真核表达 | 第45-46页 |
| ·旋毛虫抗原与 mTLR2、mTLR4 受体的直接作用 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |
