| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-14页 |
| ·L-氨基酸氧化酶简介 | 第8页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶概述 | 第8-13页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶的研究进展 | 第8-10页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶的纯化 | 第10页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶的性质 | 第10-11页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶的应用 | 第11-13页 |
| ·论文的研究意义和目的 | 第13页 |
| ·论文的研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-22页 |
| ·实验材料 | 第14-15页 |
| ·菌株和质粒 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14页 |
| ·主要仪器 | 第14页 |
| ·培养基 | 第14-15页 |
| ·实验方法 | 第15-22页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶生产菌株的筛选方法 | 第15-16页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶生产菌株的鉴定方法 | 第16页 |
| ·硫酸二乙酯和紫外诱变方法 | 第16-17页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶生产菌的产酶条件优化 | 第17-18页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶基因的调取 | 第18页 |
| ·PCR 产物连接 pMD18-T 载体 | 第18页 |
| ·重组质粒 pET28a-LGOX 的构建 | 第18-20页 |
| ·重组 LGOX 在大肠杆菌 BL21(DE3)中的诱导表达 | 第20页 |
| ·重组 LGOX 在 3L 发酵罐上的培养 | 第20页 |
| ·重组 LGOX 粗酶液的制备与纯化 | 第20页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶酶学性质研究 | 第20-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-46页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶生产菌株的筛选 | 第22页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶生产菌株的鉴定 | 第22-24页 |
| ·形态及培养特征 | 第22-23页 |
| ·生理生化特性 | 第23-24页 |
| ·16S rDNA 序列分析鉴定 | 第24页 |
| ·硫酸二乙酯诱变 | 第24-26页 |
| ·紫外诱变 | 第26-27页 |
| ·诱变菌株稳定性验证 | 第27-28页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶生产菌的产酶条件优化 | 第28-32页 |
| ·L-谷氨酸的添加量 | 第28-29页 |
| ·碳源的选择与优化 | 第29页 |
| ·氮源的选择与优化 | 第29-30页 |
| ·碳氮源含量正交 | 第30-31页 |
| ·产酶初始 pH 优化 | 第31页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶在细胞中的定位 | 第31-32页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶粗酶性质 | 第32-34页 |
| ·最适反应温度和温度稳定性 | 第32-33页 |
| ·最适反应 pH | 第33页 |
| ·底物特异性 | 第33-34页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶基因的调取 | 第34-36页 |
| ·Streptomyces sp. X-119-6 基因组的调取 | 第34-35页 |
| ·LGOX 基因的 PCR 扩增 | 第35页 |
| ·质粒 pMD18T-LGOX 的 PCR 验证 | 第35-36页 |
| ·基因序列的测定 | 第36页 |
| ·重组质粒 pET28a-LGOX 的构建 | 第36-37页 |
| ·pMD18T-LGOX 和 pET28a 的双酶切 | 第36页 |
| ·LGOX 与 pET28a 载体的连接 | 第36-37页 |
| ·重组 LGOX 在大肠杆菌 BL21(DE3)中的诱导表达 | 第37-41页 |
| ·IPTG 浓度对 LGOX 表达的影响 | 第38-39页 |
| ·诱导时间对 LGOX 表达的影响 | 第39页 |
| ·诱导温度对 LGOX 表达的影响 | 第39-40页 |
| ·重组 LGOX 在 3L 发酵罐上的培养 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| ·LGOX 纯酶酶学性质 | 第42-46页 |
| ·最适反应温度和温度稳定性 | 第42-43页 |
| ·最适反应 pH | 第43-44页 |
| ·底物特异性 | 第44页 |
| ·K_m值的测定 | 第44-46页 |
| 主要结论与展望 | 第46-48页 |
| 主要结论 | 第46页 |
| 展望 | 第46-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
