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骨髓间充质干细胞减轻腹膜纤维化研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-22页
引言第22-23页
第一章 MSCs 减轻急性腹膜纤维化的研究第23-111页
 第一节 MSCs 减轻急性腹膜纤维化的疗效研究第23-52页
  一、 前言第23-24页
  二、 实验材料、主要试剂与仪器第24-25页
  三、 实验方法第25-34页
   (一) 细胞培养第25-30页
   (二) 实验动物处理第30-31页
   (三) 腹膜粘连肉眼评分第31页
   (四) 病理 HE 染色第31页
   (五) 病理 Masson 三色染色第31-32页
   (六) 免疫组化分析第32-33页
   (七) 腹膜组织的免疫荧光分析第33页
   (八) 原代 RPMCs 机械性划伤模型第33页
   (九) 机械性划伤的 RPMCs 迁移速度测定第33-34页
   (十) RPMCs 的免疫荧光分析第34页
   (十一)统计学处理第34页
  四、 结果第34-46页
   (一) 特征性表面标志物鉴定第34-35页
   (二) MSCs 成骨分化潜能的鉴定第35-36页
   (三) MSCs 成脂分化潜能的鉴定第36页
   (四) MSCs 治疗急性腹膜粘连的最佳注射方式与时间点第36-37页
   (五) 尾静脉注射 MSCs 可减轻急性腹膜粘连程度第37-38页
   (六) 尾静脉注射 MSCs 可减轻急性腹膜粘连的病理改变第38-40页
   (七) 尾静脉注射 MSCs 可改善急性腹膜粘连的炎症、纤维化反应第40-42页
   (八) 尾静脉注射 MSCs 可促进损伤 PMCs 的修复第42-44页
   (九) 原代 RPMSCs 培养的鉴定第44页
   (十) MSCs 促进体外 RPMSCs 机械性损伤的修复-迁移能力第44-45页
   (十一)MSCs 促进体外 RPMSCs 机械性损伤的修复-增殖能力第45-46页
  五、 讨论第46-49页
  六、 小结第49页
  七、 参考文献第49-52页
 第二节 MSCs 减轻急性腹膜纤维化的作用方式研究第52-76页
  一、 前言第52页
  二、 实验材料、主要试剂与仪器第52-54页
   (一) 实验动物与细胞第52-53页
   (二) 主要试剂第53页
   (三) 主要仪器第53-54页
   (四) 其他第54页
  三、 实验方法第54-59页
   (一) SD 大鼠骨髓来源 MSCs 培养与操作第54-56页
   (二) 实验动物处理第56-58页
   (三) 小动物活体成像技术示踪 MSCs第58页
   (四) 双光子显微镜技术示踪 MSCs第58页
   (五) 免疫荧光分析第58-59页
   (六) 腹膜粘连肉眼评分第59页
   (七) 病理 Masson 三色染色第59页
   (八) 统计学处理第59页
  四、 结果第59-69页
   (一) 尾静脉注射 MSCs 不在大鼠损伤的腹膜区域积聚第59-60页
   (二) 尾静脉注射 MSCs 主要在大鼠肺脏积聚第60-61页
   (三) 尾静脉注射 MSCs 在大鼠肺脏中未被巨噬细胞吞噬第61-62页
   (四) 腹腔注射 MSCs 不在大鼠损伤的腹膜区域积聚第62-63页
   (五) 腹腔注射 MSCs 主要在大鼠脾脏积聚第63-64页
   (六) 腹腔注射 MSCs 在大鼠脾脏中被巨噬细胞吞噬第64-65页
   (七) 腹腔注射 MSCs 不在 SCID 小鼠损伤的腹膜区域积聚第65-66页
   (八) 尾静脉注射 MSCs-CM 可减轻急性腹膜粘连程度第66-67页
   (九) 尾静脉注射 MSCs-CM 可减轻急性腹膜粘连的病理改变第67-69页
  五、 讨论第69-71页
  六、 小结第71页
  七、 参考文献第71-76页
 第三节 MSCs 通过分泌方式减轻急性腹膜纤维化的机制研究第76-111页
  一、 前言第76-77页
  二、 实验材料、主要试剂与仪器第77-79页
   (一) 实验动物与细胞第77页
   (二) 主要试剂第77-78页
   (三) 主要仪器第78页
   (四) 其他第78-79页
  三、 实验方法第79-90页
   (一) 细胞培养第79-83页
   (二) 抗体芯片检测无血清 MSCs-CM 细胞因子成分第83-84页
   (三) RT-PCR第84-85页
   (四) Western blot第85-86页
   (五) 原代 RPMCs 机械性划伤模型第86页
   (六) 机械性划伤的 RPMCs 迁移速度测定第86页
   (七) RPMCs 的免疫荧光分析第86-87页
   (八) 实验动物处理第87-88页
   (九) 腹膜粘连肉眼评分第88页
   (十) 病理 Masson 三色染色第88-89页
   (十一)ELISA 检测 TSG-6 浓度第89页
   (十二)免疫荧光分析第89-90页
   (十三)统计学处理第90页
  四、 结果第90-105页
   (一) 抗体芯片技术检测无血清 MSCs-CM 中细胞因子分泌的变化第90-92页
   (二) ELISA 验证无血清 MSCs-CM 中 TSG-6 分泌的变化第92-93页
   (三) 尾静脉注射 MSCs 后大鼠血清中 TSG-6 浓度一过性升高第93页
   (四) 尾静脉注射后在肺脏中积聚的 MSCs 表达 TSG-6第93-94页
   (五) 腹腔注射后在脾脏中积聚的 MSCs 不表达 TSG-6第94-95页
   (六) mRNA 水平 TSG-6-siRNA 的 knockdown 效果第95-96页
   (七) 细胞蛋白水平 TSG-6-siRNA 的 knockdown 效果第96-97页
   (八) siRNA 对 MSCs 分泌 TSG-6 的 knockdown 效果第97-98页
   (九) 尾静脉注射 TSG-6-siRNA MSCs 大鼠血清 TSG-6 无明显升高第98-99页
   (十) 尾静脉注射后在肺脏中积聚的 TSG-6-siRNA MSCs 不明显表达 TSG-6第99-100页
   (十一)MSCs 分泌 TSG-6 促进 RPMSCs 机械损伤修复-迁移能力第100-101页
   (十二)MSCs 分泌 TSG-6 促进 RPMSCs 机械损伤修复-增殖能力第101-102页
   (十三)MSCs 可通过分泌 TSG-6 减轻急性腹膜粘连程度第102-103页
   (十四)MSCs 可通过分泌 TSG-6 减轻急性腹膜粘连的病理改变第103-105页
  五、 讨论第105-106页
  六、 小结第106页
  七、 参考文献第106-111页
第二章 MSCs 减轻慢性腹膜纤维化的研究第111-135页
 第一节 MSCs 减轻慢性腹膜纤维化的疗效研究第111-135页
  一、 前言第111页
  二、 实验材料、主要试剂与仪器第111-113页
   (一) 实验动物与细胞第111-112页
   (二) 主要试剂第112页
   (三) 主要仪器第112页
   (四) 其他第112-113页
  三、 实验方法第113-117页
   (一) 细胞培养第113-114页
   (二) 实验动物处理第114-115页
   (三) 病理 Masson 三色染色第115页
   (四) 腹膜超滤量检测第115页
   (五) 腹膜葡萄糖转运量检测第115-116页
   (六) 病理 HE 染色第116页
   (七) 免疫组化分析第116-117页
   (八) 统计学处理第117页
  四、 结果第117-130页
   (一) MSCs 治疗慢性腹膜纤维化的最佳注射时间点第117-118页
   (二) 尾静脉注射 MSCs 可改善腹膜透析的腹膜超滤功能第118-119页
   (三) 尾静脉注射 MSCs 可降低腹膜透析的腹膜葡萄糖转运功能第119-120页
   (四) 尾静脉注射 MSCs 可减轻腹膜透析的腹膜纤维化程度第120-122页
   (五) 尾静脉注射 MSCs 可降低腹膜透析的腹膜血管密度第122-124页
   (六) 尾静脉注射 MSCs 可抑制腹膜透析 PMCs 的减少第124-126页
   (七) 尾静脉注射 MSCs 可减少腹膜透析腹膜肌成纤维细胞数量第126-128页
   (八) 尾静脉注射 MSCs 可减少腹膜透析腹膜 TGF-β1 表达第128-130页
  五、 讨论第130-132页
  六、 小结第132页
  七、 参考文献第132-135页
第三章 全文总结第135-136页
第四章 文献综述第136-176页
 第一节 MSCs 简介第137-139页
  一、 MSCs 的发现简史第137页
  二、 MSCs 的多向分化潜能第137-138页
  三、 MSCs 的表面标志物第138-139页
 第二节 MSCs 发挥治疗效应的作用方式第139-141页
  一、 MSCs 的定植作用方式第139-140页
  二、 MSCs 的旁分泌作用方式第140-141页
 第三节 MSCs 促进损伤修复、抗纤维化的作用机制第141-147页
  一、 趋化第142页
  二、 免疫调节第142-144页
  三、 抑制炎症反应第144-145页
  四、 抗菌第145页
  五、 活化内源性干/祖细胞第145页
  六、 降低内皮细胞通透性第145页
  七、 促进新生血管生成第145-146页
  八、 抗凋亡第146页
  九、 抗纤维化第146-147页
 第四节 MSCs 治疗各器官、组织损伤与纤维化的研究第147-153页
  一、 关节第147页
  二、 肺脏第147-148页
  三、 肝脏第148-149页
  四、 神经系统第149-150页
  五、 心脏第150-151页
  六、 肾脏第151-153页
 第五节 临床试验研究第153-154页
 第六节 MSCs 治疗的副作用第154-156页
 第七节 小结及现存问题第156页
 参考文献第156-176页
致谢第176-177页
个人简历第177-178页
在学期间发表的学术论文与研究成果第178-179页

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